Chlordioxid v COVID-19: Hypotéza o možném mechanismu molekulárního působení v SARS-CoV-2

 

Eduardo Insignares-Carrione *, Blanca Bolano Gómeza Andreas Ludwig KalckerLVWWG Global Director Director, Liechtensteiner Verein für Wissenschaft und Gesundheit, Lichtenštejnsko, Švýcarsko 2Ředitel výzkumného oddělení, Genesis Foundation, Kolumbie

Swiss SVNB Biophysics Researcher, Managing Director, Liechtensteiner Verein für die Wissenschaft und Gesundheit, Švýcarsko

 

Původní dokument: 

 

Abstraktní

 

Úvod: Cílem tohoto přehledu je hypotéza mechanismu působení oxidu chloričitého na COVID-19 studiem jeho mechanismu působení ve struktuře SARS-CoV-2.

Metody: Byly provedeny recenze výzkumu mechanismu působení oxidu chloričitého ve virech, zejména SARS-CoV-2 a chřipkových virech na úrovni aminokyselin ve virové špičce, a tato data byla přenesena na stejné strukturní aminokyseliny jako SARS-CoV-2 . Použili jsme ----- počítačové rekonstrukce, využití dat prostřednictvím kryoelektronických studií a předchozí práce založené na softwaru pro rozšířenou realitu ChimeraX (UCSF). 

výsledky: Projekce a simulace oxidace chlordioxidu ve strukturních aminokyselinách SARS-CoV-2 umožňuje odvodit místa, kde oxid chloričitý působí denaturalizujícím účinkem na virovou strukturu a na lidský ACE2, stejně jako je možné pochopit extrémní rychlost, s jakou jedná, což by mohlo vysvětlit první zjištění klinických pozorovacích studií používání oxidu chloričitého v COVID-19 prováděných autory v Bolívii za přísného dodržování etické komise. 

Závěr: Oxidace kritických aminokyselin oxidem chloričitým ve špičce koronaviru SARS-CoV-2 a ve struktuře ACE2 nám umožňuje porozumět potenciálně terapeutickým účinkům oxidu chloričitého rozpuštěného ve vodě orálně v COVID-19. Doufáme, že brzy zveřejníme klinické aplikační zkoušky tohoto slibného systémového virucidu. 

Klíčová slova: SARS-CoV-2 • COVID-19 • Aminokyseliny • Chlordioxid 

 

Úvod 

COVID-19 je infekční onemocnění způsobené virem SARS-CoV-2. Poprvé byla detekována v čínském městě Wuhan (provincie Chu-pej) v prosinci 2019. Za tři měsíce se rozšířila v podstatě do všech zemí světa, a proto ji Světová zdravotnická organizace prohlásila za pandemii. (WHO, 11. března 2020). 

Neexistuje žádná specifická léčba; hlavní terapeutická opatření spočívají ve zmírnění příznaků a udržení životně důležitých funkcí. Výzkum zaměřený na nalezení účinné léčby byl zahájen od ověření pandemického rozsahu onemocnění. Ústředním problémem je, že ani po jedenácti měsících od jejího oficiálního nástupu není účinná léčba tohoto onemocnění známa. Při absenci účinné léčby jsme studovali nové terapeutické možnosti s úmyslem najít účinnou a bezpečnou léčbu COVID-19. 

V souladu s výše uvedeným se tento výzkum zaměřuje na aktuální výsledky a předchozí výzkumy, které přidávají možné terapeutické účinky jako virucidní oxid chloričitý ve vodném roztoku a bez přítomnosti chloritanu sodného pomocí konceptů translační medicíny založené na znalostech o struktuře viru a mechanismus působení oxidu chloričitého ve virech, aby bylo možné navrhnout možnou léčbu volby pro COVID-19 [1,2]. 

* Korespondenční adresa: Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript./ Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript. 

Autorské právo: © 2020 Insignares-Carrione E a kol. Toto je článek s otevřeným přístupem distribuovaný za podmínek licence Creative Commons Attribution License, která umožňuje neomezené použití, distribuci a reprodukci na jakémkoli médiu za předpokladu, že bude připsán původní autor a zdroj.

 

Přijaté 10. listopadu 2020; Přijato 22. listopadu 2020; Zveřejněno 30

listopad 2020

Oxid chloričitý 

Působení oxidu chloričitého je dáno jeho selektivitou pro pH a oblastí nebo velikostí, kde působí. To znamená, že tato molekula disociuje a uvolňuje kyslík při kontaktu s jinou kyselinou [3]. Při reakci se jeho atom chloru váže na sodík v médiu a mění se na chlorid sodný (běžná sůl) uvolňující kyslík, který oxiduje přítomné patogeny kyselého pH a převádí je na alkalické oxidy. Když tedy chlordioxid disociuje, uvolňuje kyslík do krve, jak to dělají erytrocyty (červené krvinky) na stejném principu (známém jako Bohrův efekt), který má být selektivní pro kyselost.

 

Jak se to normálně děje v krvi, uvolňuje oxid chloričitý kyslík, když narazí na kyselou půdu, ať už jde o kyselinu mléčnou nebo o kyselost patogenu. Jeho možný terapeutický účinek se předpokládá mimo jiné díky tomu, že vytváří alkalické prostředí a současně eliminuje malé kyselé patogeny oxidací s elektromagnetickým přetížením, které není možné rozptýlit jednobuněčnými organismy. Doba úmrtí viru musí být analogická s dobou zpoždění způsobenou chemickou reakcí kvůli dobám potřebným k pokrytí celého objemu. Můžeme očekávat, že u viru o průměru 120 nanometrů bude doba zničení mnohem kratší díky jeho geometrickému faktoru.

 

Podle studií Zoltána Noszticziuse je oxid chloričitý selektivním antimikrobiálním činidlem, které může rychle zabíjet mikrometrické organismy, ale nemůže způsobit skutečné poškození mnohem větším organismům, jako jsou zvířata nebo lidé, protože nemůže proniknout hluboko do jejich tkání.

 

Je známo, že mnohobuněčná tkáň má nejvyšší schopnost rozptýlit elektrické náboje, a proto není ovlivněna stejným způsobem napětím oxidačně-redukčního procesu (ORP), jako je tomu u jednobuněčných organismů, a proto existuje biochemicky řečeno, a větší ochrana buněk kvůli velikosti.

 

Chlordioxid, který je nejúčinnějším necytotoxickým dezinfekčním prostředkem známým po ozonu, a který se používá jako vodný roztok, má obrovské možnosti

terapeutické použití, protože je také schopné pronikat a eliminovat biofilm, což ozon nedělá [3]. Velkou výhodou možného terapeutického použití oxidu chloričitého při infekcích je nemožnost bakteriální nebo virové rezistence na ClO.2protože má na rozdíl od chloru (Cl2), který působí chlorací [3].

 

Přestože je ozon v antiseptickém smyslu silnější, jeho vysoký oxidační potenciál 2.07 a krátký poločas pouhých 15 minut při 25 ° C s hodnotou pH 7.0 ho činí méně účinným než ClO2pro terapeutické aplikace in vivo. Oxid chloričitý je pH (-) a oxidační činidlo selektivní pro velikost a na rozdíl od jiných látek nereaguje s většinou složek živých tkání (3). Chlordioxid rychle reaguje s fenoly a thioly nezbytnými pro život bakterií.

 

U fenolů tento mechanismus spočívá v napadení benzenového kruhu odstraněním zápachu, chuti a dalších meziproduktů [4]. Oxid chloričitý účinně ničí viry a je až 10krát účinnější než chlornan sodný (bělidlo nebo bělidlo). Ukázalo se také, že je velmi účinný proti malým parazitům, prvokům [5]. Jedním z témat, která byla v poslední době hodně hodnocena, je reaktivita oxidu chloričitého s aminokyselinami. V testech reaktivity oxidu chloričitého s 21 aminokyselinami reagovaly při pH kolem 4 pouze cystein [5], tryptofan [6], tyrosin [6], prolin a hydroxyprolin.

 

Cystein a methionin (4) jsou dvě aromatické aminokyseliny, které obsahují síru, tryptofan a tyrosin a dva anorganické ionty Fe2+a Mn2+[3]. Cystein, protože patří do skupiny thiolů, je aminokyselina až 50krát reaktivnější se všemi mikrobiálními systémy než ostatní čtyři aminokyseliny, a proto není možné, aby vytvořila rezistenci proti oxidu chloričitému.

 

Hypotéza, kterou zde navrhujeme, spočívá v tom, že příčinu antivirového účinku oxidu chloričitého lze vysvětlit jeho působením na nejméně pět výše uvedených aminokyselin nebo na peptidové zbytky.

 

Chlordioxid (ClO2) se používá od roku 1944 při úpravě pitné vody díky své biocidní síle, stejně jako ve většině lahvových vod vhodných pro lidskou spotřebu díky téměř nulové toxicitě ve vodném roztoku, který se systematicky používá při dezinfekci a konzervaci krevní transfuzní vaky [3,4]. Jelikož se jedná o selektivní oxidant, je jeho způsob působení velmi podobný fagocytóze, kde se k eliminaci všech typů patogenů používá mírný oxidační proces [3,4].

 

Chlordioxid (ClO2) je nažloutlý plyn, který dosud není součástí běžného lékopisu jako léku, a to navzdory tomu, že se osvědčil při denaturaci virů, s několika patenty pro účinné použití různých způsobů léčby, jako je dezinfekce nebo sterilizace krevních složek (krvinek, krevních proteinů atd.) .) 4, parenterální léčba (intravenózní cestou) infekcí HIV, nebo pro léčbu neurodegenerativních onemocnění, jako je amyotrofická laterální skleróza (ALS), Alzheimerova choroba a další patenty pro použití, jako jsou patenty pro: léčbu rakoviny indukující apoptózu (CN 103720709 A ) léčba nádoru (US 10, 105, 389 B1) antivirová léčba sinusitidy (US 2o16 / 0074432 A1), imunologická stimulace systému (US 5,830,511 2014082514 1), iniciace a diferenciace kmenových buněk (WO6280716A1), metoda vaginální léčby (US 4,737,307B4,296,102), ošetření kůže proti virům a bakteriím (US 2015 0320794 1), metoda léčby lidské amébiázy (US 87.3106 100015251 4689215), léčba proti infekcím kandidózy (US 53841134/20100159031 A53841134), ošetřovatelé ran t (US 20100159031), Orální ošetření dutin (US 53841134), (US20100159031), Proti zánětům (US11136), Ošetření houbami na nehty (US 4) a Proti zánětům (USXNUMX), Ošetření proti houbám na nehty (US XNUMX) a Proti zánětům USXNUMX), Ošetření proti plísni nehtů (US XNUMX) a Švýcarský patent čeká na vyřízení / XNUMX-CH. (Kalcker, A.) [XNUMX].

 

Na základě výše uvedeného lze zřídit tři provozovny:

 

1. Oxid chloričitý může bojovat proti virům prostřednictvím procesu selektivní oxidace denaturací kapsidových proteinů a následnou oxidací genetického materiálu viru, čímž se deaktivuje. Protože není možné se přizpůsobit oxidačnímu procesu, brání vzniku rezistence viru, čímž vzniká oxid chloričitý (ClO2) slibné zacházení s jakýmkoli virovým poddruhem.

    

2. Existují vědecké důkazy, že oxid chloričitý je účinný proti

   koronaviry SARS-CoV-2 [4] a SARS-CoV-2, jako jsou práce provedené na univerzitě v Queretaro v Mexiku a zveřejněné v listopadu 2020 COVID-19, nazvané „In vivo hodnocení antivirového účinku ClO2(chlordioxid) v kuřecích embryích inokulovaných ptačím koronavirem

    

   (IBV), ve kterém ClO2léčba měla výrazný dopad na IBV infekci. Konkrétně byly virové titry 2.4krát nižší a úmrtnost byla u infikovaných embryí ošetřených ClO snížena na polovinu2. Infekce způsobila vývojové abnormality bez ohledu na léčbu. Léze typické pro infekce IBV byly pozorovány u všech inokulovaných embryí, ale závažnost byla u ClO obvykle nižší2- ošetřená embrya. Žádné makroskopické ani mikroskopické důkazy o toxicitě způsobené ClO2byl nalezen v použitých dávkách.

    

3. Toxicita: Největší problémy, které vznikají u léků nebo látek, které lze obecně považovat za takové, jsou kvůli jejich toxicitě a vedlejším účinkům. V případě vdechování dýchacích cest existuje toxicita s oxidem chloričitým, ale nejsou k dispozici žádné zprávy o toxicitě při doporučené dávce 30 mg nebo 30 ppm ve vodném roztoku při orálním podání a žádná klinicky prokázaná smrt ani při vysokých dávkách při požití. Letální dávka (LD50, poměr akutní toxicity) se odhaduje na 292 mg na kilogram po dobu 14 dnů, přičemž ekvivalent u 50 kg dospělého by byl 15,000 50 mg podávaných po dobu dvou týdnů. Sub-toxické orální dávky, které lze použít, jsou přibližně 100 ppm rozpuštěných ve 10 ml vody 500krát denně, což odpovídá 2 mg. Kromě toho se oxid chloričitý disociací rozkládá na iont chloru, který se okamžitě spojuje s iontem sodným a vytváří v lidském těle běžnou sůl NaCl a kyslík O19. Stručně řečeno, oxid chloričitý v doporučených dávkách 30 mg nebo 30 ppm za den v COVID-5 není toxický [8-XNUMX].

 

Virucidní účinky oxidu chloričitého

 

Chlordioxid je účinné antimikrobiální činidlo, které ničí bakterie, viry a některé parazity [9]. Její širokospektrální germicidní profil je odvozen z působení této sloučeniny jako necytotoxického oxidačního činidla.

 

Viry se obvykle skládají z vnější vrstvy nebo proteinového obalu, který zapouzdřuje nukleovou kyselinu, kterou může být DNA nebo RNA. Když přijde oxid chloričitý do kontaktu s virem, uvolní se na cílovém viru jeden vysoce reaktivní rodící se atom kyslíku. Tento kyslík se váže na specifické aminokyseliny v proteinovém obalu viru, denaturuje proteiny a způsobí neaktivitu viru. Vznikající atomy kyslíku se navíc vážou na guanin, jednu ze čtyř bází nukleových kyselin, které se nacházejí v RNA a DNA, a tvoří 8-oxoguanin. Tato oxidace guaninových zbytků zabraňuje replikaci virových nukleových kyselin [10].

 

V publikované vědecké literatuře existují zprávy, že oxid chloričitý inaktivuje širokou škálu virů, včetně chřipky A, lidského adenoviru, lidského rotaviru, echoviru, bakteriofága f2 a polioviru [11–16].

 

Viry chřipky A jsou sférické jednovláknové RNA viry s negativním smyslem, které mají lipidovou membránu, která obsahuje vrcholy složené z glykoproteinů známých jako HA (hemaglutinin) a NA (neuraminidáza). Ve viru je osm samostatných řetězců RNA [17]. Předklinická studie zjistila, že plynný oxid chloričitý je účinný při prevenci infekce virem chřipky A vyvolané aerosolem. Tato studie používala nízké koncentrace plynného oxidu chloričitého (tj

0.03 ppm) v kleci na myš. Tato úroveň je pod úrovní dlouhodobé expozice OSHA (8 hodin) pro plynný chlordioxid v okolním vzduchu na pracovišti, což je 0.1 ppm [18]. Plynný oxid chloričitý účinně snižoval počet infekčních virů v plicích myší a výrazně snižoval úmrtnost. Úmrtnost byla 70. den 7% (10/16) ve skupině neošetřené oxidem chloričitým a 0% (0/10) ve skupině léčené oxidem chloričitým. Autoři potvrdili tyto výsledky opakováním experimentu. Výsledky opakované studie byly 50% (5/10) úmrtnost v neošetřené skupině a 0% (0/10) v léčené skupině.

 

Autoři dospěli k závěru, že nízké hladiny plynného chlordioxidu (tj. 0.03 ppm), které jsou pod přípustnou úrovní expozice na lidských pracovištích, „by mohly být použity v přítomnosti lidí k prevenci jejich infekce virem chřipky A a případně dalšími souvisejícími viry s respiračními infekcemi traktu (str. 65). Navrhli, že „může být místně použit plynný chlordioxid

jako jsou kanceláře, divadla, hotely, školy a letištní budovy bez evakuace lidí bez narušení jejich běžných činností. “Autoři navrhli, aby jejich metoda„ otevírala novou cestu prevence pandemické chřipky “(str.

65) po provedení studia na škole s příznivými výsledky v tomto ohledu.

 

Bylo zjištěno, že infekčnost viru je snížena in vitro aplikací oxidu chloričitého a vyšší koncentrace způsobí ještě větší snížení. Tato inhibice infekčnosti byla korelována se změnami virových proteinů. Tyto změny byly výsledkem zabudování atomů kyslíku do tryptofanových a tyrosinových zbytků umístěných v HA a NA proteinech [11]. Tyto proteiny jsou denaturovány přídavkem atomů kyslíku, což eliminuje schopnost viru infikovat další buňky [19]. Pozdější studie zjistila, že inaktivace viru chřipky A je způsobena přenosem 2 atomů kyslíku z chloru na oxid do specifického zbytku tryptofanu (W153) ve špičkovém proteinu hemaglutininu (HA) [20].

 

Adenoviry jsou neobalené viry s ikosahedrální kapsidou obsahující dvouřetězcový genom DNA. Bylo klasifikováno sedm skupin lidských adenovirů [21]. Nedávná studie zjistila, že oxid chloričitý může pomoci snížit hladinu adenoviru v pitné vodě [12]. Tato studie zkoumala účinky chlordioxidu a ultrafialového světla na hladinu adenoviru v pitné vodě v Nizozemsku. Autoři zjistili, že aplikace oxidu chloričitého v nízkých koncentracích (0.05 - 0.1 ppm) snížila adenoviry v pitné vodě, zatímco UV dezinfekce byla bez dezinfekce chlordioxidem nedostatečná.

 

Rotaviry jsou dvouvláknové RNA viry, které se skládají z 11 jedinečných dvouvláknových molekul RNA obklopených třívrstvou ikosahedrální proteinovou kapsidou [22]. Tyto viry, které jsou celosvětově hlavní příčinou závažných průjmových onemocnění u kojenců a malých dětí, jsou inaktivovány oxidem chloričitým. Ve skutečnosti jsou při koncentracích chloridového oxidu v rozmezí od 0.05 do 0.2 ppm inaktivovány během 20 sekund in vitro [23,24].

 

Bacteriophage f2 je pozitivní smysl jednovláknový RNA virus, který infikuje Escherichia coli bakterie. An in vitro studie zjistila, že 0.6 mg / litr oxidu chloričitého rychle (tj. do 30 sekund) inaktivoval bakteriofág f2 a narušil jeho schopnost vázat se na svého hostitele, E. coli [patnáct]. Inaktivace viru i inhibice jeho schopnosti vázat se na hostitele se zvyšovaly s vyšším pH a se zvyšujícími se koncentracemi oxidu chloričitého. Autoři dále zjistili, že oxid chloričitý denaturuje virové kapsidové proteiny reakcí s tyrosinovými, tryptofanovými a cysteinovými zbytky. Tyto aminokyseliny byly téměř úplně rozloženy do 15 minut po vystavení oxidu chloričitému.

 

Poliovirus je pozitivní virus pozitivní RNA RNA [25]. Ridenour a Ingerson zjistili, že oxid chloričitý může inaktivovat virus obrny in vitro.

Později Álvarez a O'Brien tuto práci rozšířili tím, že ukázali tuto úpravu 1 ppm chlordioxidu in vitro vede k separaci RNA od kapsidy a také způsobuje změny v RNA [16,26].

 

Kromě výše zmíněných studií poskytuje další podporu virucidním účinkům USA Agentura na ochranu životního prostředí (EPA), která 10. dubna 2020 uvedla oxid chloričitý jako dezinfekční prostředek registrovaný EPA k usmrcení viru SARS-CoV-2. chlor [27]. Web EPA naznačuje, že tento produkt je určen k povrchovému použití, nikoli k humánnímu použití.

 

Lidské studie účinků oxidu chloričitého na virus SARS-CoV-2 dosud nebyly provedeny. V současné době dva autoři (Insignares a Bolano) provádějí první multicentrickou klinickou studii na světě o účinnosti perorálního oxidu chloričitého u lidí v COVID-19 (ClinicalTrials. Identifikátor vlády: NCT04343742). An in vitro studie zjistila, že oxid chloričitý inaktivuje geneticky příbuzný virus SARS-CoV-2 [28]. Koncentrace

Bylo zjištěno, že 2.19 mg / litr oxidu chloričitého způsobuje úplnou inaktivaci SARS-Co-V v odpadních vodách. Pobočka naší skupiny je v procesu provádění in vitro vyšetřování působení oxidu chloričitého na SARS-CoV-2 v Indii a jsme v procesu publikování zprávy o simulaci mechanismu působení chlordioxidu v SARS-Co-V-2 metodou in silico, prováděno v Japonsku.

 

V Ekvádoru (Aememi) pro oxid chloričitý, účinná terapie pro léčbu COVID-19; 51) Byl proveden předběžný pokus s podáním perorálního chlordioxidu u 104 pacientů s COVID-19, kteří měli různé profily z hlediska věku, pohlaví a závažnosti onemocnění, menšina diagnostikovaná testováním a většina skríninkem podle typických příznaky nemoci. Proto byla data spravována pomocí symptomatické skórovací stupnice, přičemž 10 je maximální vnímání a 0 je minimum symptomu: horečka, zimnice, bolest svalů, suchý kašel, bolesti hlavy, bolesti zad, potíže s dýcháním, zvracení, průjem, bolest hrdlo, ztráta čichu, ztráta chuti, špatná chuť k jídlu.

 

Doporučil se oxid chloričitý v koncentraci 3000 ppm v dávce deseti cm10 zředěné v jednom litru vody, užívané po celý den, rozdělené do 20 denních dávek, užívaných každou hodinu a půl po dobu 3 dnů. Výsledky byly distribuovány podle příznaků po prvním, druhém, třetím a čtvrtém léčebném dni. Byly rozděleny na segmenty mezi muži a ženami a byly rovněž prezentovány společné výsledky. Následující tabulky ukazují příznaky a v prvním a posledním grafu chování ve vztahu k symptomatologické škále mezi prvním a čtvrtým dnem perorálního příjmu chlordioxidu (obrázky 4 a XNUMX).

 

 

 

Obrázek 1. Strukturální rozdíly mezi RBM SARS-CoV-2 a SARS-CoV.

 

 

Obrázek 2. Trojrozměrná struktura SARS-CoV-2 Mpro ve dvou různých pohledech.

 

 

Obrázek 3. Výsledky oxidu chloričitého 1. den jeho podání.

 

Z této předběžné studie lze vyvodit následující závěry: Oxid chloričitý je rozhodně neškodný - vůbec netoxický - v doporučených a požitých dávkách a všechny počáteční příznaky se začaly snižovat od prvního dne léčby, přičemž pokles je zcela patrný čtvrtý den. Konkrétně se dramaticky snížily příznaky nejvíce svědčící o probíhající infekci, jako je horečka, zimnice, bolesti hlavy, bolest v krku, ztráta chuti k jídlu a ztráta chuťových a čichových smyslů. Další příznaky, jako je bolest svalů a kašel, zůstaly poněkud běžné, protože po ukončení nemoci mají tendenci zůstat zbytkové déle.

Duben 2020, zjištění následujících výsledků: 1. PubMed (Medline): 4 reference, 2.

LILACS: 18 referencí, 3. Cochrane Library: 56 referencí, 4. Věda: 1,168

odkazy, 5. Scielo: 61 referencí, 6. MedScape: 19 referencí pro celkem 1,326 2 vědeckých publikací, jejichž obsah se týkal použití oxidu chloričitého v různých aplikacích a mechanismu působení oxidu chloričitého v SARS-CoV-XNUMX viruse. Nakonec jsme zkontrolovali registry na www. clintrials.gov a seznamy WHO International Clinical Trials Registry

Platforma (ICTRP) za účelem identifikace probíhajících nebo nepublikovaných klinických studií.

Materiály a metody

 

Za účelem vyhledání referenčních informací použitých v tomto článku byly webové vyhledávače zkontrolovány pomocí kritérií MesH v souladu se strategií vyhledávání uvedenou v následujících řádcích v období od ledna do

 

Strategie vyhledávání

 

„Chlordioxid“ NEBO „Protokol o chlordioxidu“ NEBO Chlordioxid A virus; Chlordioxid A SARS-COV-2; NEBO „Léková léčba COVID-19“ NEBO „špičkový glykoprotein, virus COVID-19„ NEBO “těžký akutní respirační syndrom

Obrázek 4: Výsledky oxidu chloričitého 4. den jeho podání.

 

coronavirus 2 "NEBO" COVID-19 "NEBO" 2019-nCoV "NEBO" SARS-CoV-2 "O" 2019

nový koronavirus „OR“ 2019 onemocnění koronaviry „OR (pneumonie).

 

Z výsledků vyhledávání jsme vybrali ty, které odkazovaly na virucidní působení oxidu chloričitého na různé mikroorganismy, zejména na viry a mezi nimi i SARS-CoV-2 nebo SARS-CoV.

 

Rovněž jsme přezkoumali provedené studie týkající se působení oxidu chloričitého na aminokyseliny, zejména ty, které jsou součástí virových kapsidů. Ze zjištění zdůrazňujeme, že v roce 1986 Noss et al. prokázali, že inaktivace bakteriálního viru (bakteriofága) f2 ClO2byl kvůli jeho reakcím s virovými

kapsidové proteiny. Dále zjistili, že tři aminokyseliny viru

protein, jmenovitě cystein, tyrosin a tryptofan, mohl reagovat s ClO2rychle [15]. V roce 1987 Tan a další testovali reaktivitu ClO2na 21 volných aminokyselinách [29]. ClO2reagoval pouze se šesti aminokyselinami rozpuštěnými v 0.1 M pufru fosforečnanu sodného při pH 6.0. Reakce s cysteinem, tryptofanem a tyrosinem byla příliš rychlá na to, aby mohla být sledována jeho technikou.

 

Reaktivita tří rychle reagujících aminokyselin (cysteinu, tyrosinu a tryptofanu) byla studována v laboratoři v letech 2005 až 2008 a bylo zjištěno, že cystein má nejvyšší reaktivitu mezi těmito třemi aminokyselinami [30,31].

 

V roce 2007 Ogata zjistil, že antimikrobiální aktivita ClO2je založen na denaturaci určitých proteinů, což je způsobeno hlavně oxidační modifikací zbytků tryptofanu a tyrosinu dvou modelových proteinů (hovězí sérový albumin a glukóza-6-fosfát dehydrogenáza) použitých v jejich experimentech [32]. V roce 2012 to byl opět Ogata, kdo prokázal inaktivaci viru chřipky ClO2byla způsobena oxidací zbytku tryptofanu (W153) na hemaglutinin (protein z viru), čímž byla potlačena jeho schopnost vázat se na receptory [20].

 

V této souvislosti je zajímavé poznamenat, že spike protein nového koronavirového SARS-CoV-2 obsahuje 54 tyrosinových zbytků, 12 tryptofanu a 40 cysteinu [33].

 

Pokud předpokládáme, že ve vodném roztoku jsou všechny tyto aminokyselinové zbytky

schopné reagovat s ClO2stejně jako u volných aminokyselin může být inaktivace viru extrémně rychlá i v roztoku 0.1 mg / l ClO2.

 

Na druhou stranu jsme vybrali články, které popisují působení SARS-CoV-2 v buňkách, v jeho interakci s ACE2, a zejména jsme zkoumali videa v rozšířené realitě nebo simulační videa založená na Silico pro trojrozměrné znázornění. Z akčních webů, jako jsou videa, kde jsou mimo jiné manipulovány spikulární protein a receptor ACE2 pomocí softwaru pro rozšířenou realitu ChimeraX (UCSF) [34-41].

 

Stejným způsobem jsme přezkoumali strukturu virové špičky a na základě výzkumu Daniela Wrappa a Jasona S. McLellana z University of Texas.

 

Trojrozměrný obraz spikulárního S glykoproteinu beta-koronaviru SARS-CoV-2 byl pozorován elektronovou kryomikroskopií v rekordním čase. Díky tomuto obrazu s rozlišením 3.5 Á je potvrzeno, že tento S protein je spojen s proteinem hACE2 lidských buněk s vyšší afinitou než afinita k SARS-CoV-2koronaviru. Protein S je terčem protilátek, které nás imunizují. Jeho 3D struktura umožňuje pochopit, proč publikované monoklonální protilátky proti SARS-CoV-2 nejsou účinné proti SARS-CoV-2. Nepochybně pomůže urychlit vývoj vakcín a terapií proti infekci COVID-19 [42].

 

V těchto videích simulace a virtuální reality je pozorováno, že protein S je trimer složený ze tří peptidů, každý se dvěma podjednotkami S1 a S2. Podjednotka S1 funguje jako závěs se dvěma konformacemi zvanými „dolů“ (RBD dolů) a „nahoru“ (RBD nahoru). Zobrazování elektronovou kryomikroskopií ukazuje, že pouze jeden z peptidů je ve stavu „nahoru“, zatímco další dva jsou ve stavu „dolů“. K vazbě na mobilní přijímač dochází v konfiguraci „proti proudu“. Po navázání jsou tři proteinové S peptidy štěpeny v místě S1 / S2; druhý rozkol pak nastane v bodě S2 'a rozloží klíčový fúzní peptid (FP) na spoji mezi membránami.

 

Spikulární protein (S) je transmembránový trimerní protein typu I s 1,160 až 1,400 aminokyselinami, v závislosti na typu koronaviru.

Tento protein tvoří koronavirovou korónu; Skládá se ze tří opakujících se peptidů a je vysoce glykosylovaný, což usnadňuje jeho vazbu na bílkoviny a cukry. Každý peptid je tvořen dvěma doménami zvanými S1 a S2. U beta koronavirů, jako je SARS-CoV-2, dochází ke štěpení podjednotek S1 a S2 během fúze mezi membránami.

 

Doména S1 má dvě subdomény, jednu N-koncovou (NTD), která končí aminokyselinou, která má volnou aminoskupinu (-NH2), a další C-koncovou (CTD), která končí karboxylovou skupinou (-COOH) ); oba se vážou na receptor ACE2 hostitelské buňky, pak jsou doménami vázajícími receptor (RBD). Doména S2 je typu C-terminální a je vysoce konzervativní mezi všemi koronaviry, které se mnohem více liší v podjednotce S1. Doména S2 obsahuje dvě oblasti, HR1 a HR2, ve kterých se skupiny sedmi aminokyselin (nazývaných heptidy) opakují ve formě abcdefg, které obsahují hydrofobní zbytky ad a d, které se účastní fúze mezi membránami. Domény HR1 a HR2 jsou terapeutickými cíli, protože jsou známy léky, které inhibují jejich účinek, zabraňují nebo brání fúzi.

 

Infekce epiteliálních buněk dýchacího traktu je řízena S proteinem viru. V obecných krocích fúzního procesu nejprve doména S1 rozpoznává a váže se na receptor hostitelské buňky. Za druhé existuje první rozdělení v doménách S1 a S2 a druhé rozdělení v bodě S2 '; druhý umožňuje aktivaci fúzního peptidu (FP), který spojuje membrány hostitele a viru (tato fáze se nazývá mezistupeň fúze nebo mezistupeň fúze). A za třetí, oblast mezi HR1 a HR2 předělá (záhyby), což vede k heptameru (6-HB), který spojuje obě membrány a umožňuje vstup viru.

 

S protein koronavirů je klíčový při vývoji vakcín (antigeny, které indukují imunitní odpověď na přítomnost domény S1) a při vývoji antivirotik (inhibitory některých fází fúze mezi membránami, které normálně napadají specifické oblasti doména S2). Znalost trojrozměrné struktury proteinu S je nezbytná pro boj s epidemií COVID-19.

 

Sekvence proteinu S SARS-CoV-2 se shoduje 98% s proteinem S koronaviru Bat-RaTG13, s velkým rozdílem, že má čtyři RRAR aminokyseliny (arginin-arginin-alanin-arginin) místo pouze jedné arginin (R). Dále se liší v 29 zbytcích, z nichž 17 je v oblasti RBD. Porovnání provedené mezi 61 úplnými genomy SARS-CoV-2 dostupnými v GISAID (Global Initiative to Share All Influenza Data) ukazuje, že mezi všemi je pouze 9 různých aminokyselin; a všechny tyto varianty se nacházejí na velmi dobře zachovaných místech, což podle všeho neovlivňuje letalitu koronaviru.

 

Nejprve bylo možné charakterizovat 3D strukturu konkrétního S glykoproteinu koronaviru SARS-CoV-2 a jeho vazebné domény pro receptor RBD. Pak receptor hostitelské buňky, lidský enzym konvertující angiotensin hACE2. Dalším krokem pro vědce bylo stanovení struktury komplexu SARS-CoV-2 RBD / hACE2, které byly získány rentgenovou krystalografií a dosáhly rozlišení 2.45 Á a 2.68 Á. Mezi nálezy bylo zjištěno, že velmi jemné strukturální změny vysvětlují vyšší infekčnost a patogenezi SARS-CoV-2 (COVID-19) ve srovnání s SARS-CoV-2 (SARS).

 

Tato zjištění mají velký význam pro vývoj léků pro boj s COVID-19. in silico byly provedeny rekonstrukce (s využitím teoretických modelů s využitím počítačů), ale pozorování skutečné krystalografické struktury pomocí rentgenové difrakce je zásadní. Jak bylo uvedeno na začátku, autoři jsou v procesu publikování v Japonsku v silico studie, kterou provedli na mechanismu působení oxidu chloričitého na hrot SARS-CoV-2 a hemoglobin.

 

Prvním problémem, který vyvstává v procesu výzkumu, je, jak vytvořit komplex SARS-CoV-2 RBD / hACE2 s dostatečnou stabilitou pro jeho pozorování; Klíčové byly předchozí zkušenosti s tvorbou komplexu SARS-CoV-2RBD / hACE2 (doloženo v roce 2005), ve kterém se k posílení vazby komplexu používá solný můstek mezi Arg426 z RBD a Glu329 z hACE2. Velmi důležitým poznatkem je, že cystein na pozicích Cys336-Cys361, Cys379-Cys432 a Cys391-Cys525 stabilizuje pět beta listů (β1, β2,

β3, β4 a β7) a Cys480-Cys488 je klíčem ve spojení mezi hřebenem SARS-CoV-2 RBM a N-koncovou šroubovicí hACE2 [43-45].

 

Když se umístí simulace působení oxidu na tyto aminokyseliny (Cys), je snadné pochopit báječný přímý virucidní účinek oxidu na viry, zejména na SARS-CoV-2. Odhalený obraz má zničující účinek oxidu chloričitého na virus, který ho degraduje a denaturuje. Porovnání komplexů SARS-CoV-2RBD / hACE2 a SARS-CoV-2 RBD / hACE2 poskytuje přehled o tom, proč je COVID-19 infekčnější než SARS-CoV.

 

SARS-CoV-2 RBM tvoří větší a více kontaktované spojovací rozhraní s hACE2 než SARS-CoV-2RBM; solný můstek mezi SARS-CoV-2RBD a hACE2 je slabší než mezi SARS-CoV-2 RBD a hACE2. Krystalová struktura komplexu také obsahuje glukany spojené se čtyřmi místy hACE2 a místem RBD. Glukan spojený s Asn90 z hACE2 tvoří vodíkovou vazbu s Arg408 v jádru RBD; tato interakce je zachována mezi SARS-CoV-2 a SARS-CoV.

 

Strukturální rozdíly mezi RBM SARS-CoV-2 a SARSCoV jsou jemné, ale ovlivňují konformace smyček v hřebenech vázajících receptor. V obou RBM obsahuje jedna z hřebenových vazeb disulfidovou vazbu, která je kritická pro vazbu. SARS-CoV-2 a bat-CoV Rs3367 obsahují motiv se třemi zbytky Pro-Pro-Ala v uvedené smyčce; ale v SARS-CoV-2 a bat-CoV RaTG13 ukazují motiv čtyř zbytků Gly-Val / Gln-Glu / Thr-Gly; Proto se mění konformace smyčky, protože glyciny jsou pružnější. Tato změna zvýhodňuje vazbu RBD / hACE2. Kromě toho má hřeben kompaktnější konformaci díky vodíkovým vazbám Asn487 a Ala475 v SARS-CoV-2 RBM, čímž se smyčka obsahující Ala475 přibližuje k hACE2.

 

Kontakt hřebenu SARS-CoV-2 RBM s N-koncovou šroubovicí hACE2 je větší než u SARS-CoV-2RBM. Například N-koncový zbytek Ser19 hACE2 tvoří novou vodíkovou vazbu s páteří Ala475 SARS-CoV-2 RBM a Gln24 N-koncové šroubovice hACE2 také tvoří nový kontakt s SARS-CoV. -2 RBM. Ve srovnání s Leu472 ze SARS-CoV-2RBM ukazuje Phe486 ze SARS-CoV-2 RBM jiným směrem a tvoří hydrofobní oblast zahrnující Met82, Leu79 a Tyr83 z hACE2 (obrázek 1).

 

Srovnání s SARS-CoV-2RBM ukazuje, že tyto malé strukturální změny SARS-CoV-2 RBM jsou příznivější pro vazbu hACE2. Jsou to jemné rozdíly, ale z funkčního hlediska velmi relevantní. Byly odhaleny dvě kritická vazebná místa (virové hotspoty), kritický bod hotspot-31 na solném můstku Lys31 a Glu35 a hotspot 353 na jiném solném můstku mezi Lys353 a Asp38. Tyto dva solné můstky jsou slabé kvůli velké vzdálenosti v interakci, ale jsou uzavřeny v hydrofobním prostředí, které snižuje efektivní dielektrickou konstantu, jejich vazebná energie je vyšší (obrázek 2).

 

K potvrzení těchto strukturálních nálezů byly provedeny biochemické studie vazebné afinity RBD / hACE2 po zavedení určitých mutací do SARS-CoV-2 RBD. Tyto mutace naznačují, že koronavirus netopýra RaTG13 by mohl infikovat člověka (podporuje zoonotický původ epidemie). Kromě toho RBM SARS-CoV-2 a bat-COV RaTG13 obsahují podobný motiv čtyř zbytků v ACE2-vazebném hřebenu, což podporuje, že jeden se vyvinul z druhého. Kromě toho, aby se zlepšilo rozpoznávání hACE2, vykazuje SARS-CoV-2 dvě změny ve zbytcích L486F a Y493Q RaTG13, které podle všeho usnadnily přenos SARS-CoV-2 z netopýra na člověka. Proto nemusí být mezi netopýrem a člověkem v COVID-19 přechodný hostitel, na rozdíl od toho, co se stalo se SARS a MERS. samozřejmě zatím nelze vyloučit existenci prostředníka, kterým by mohl být pangolin nebo jiné divoké zvíře prodávané na trhu Wuhan; V případě pangolinu je nutné k objasnění problému sekvenovat více genomů pangolinového koronaviru, zatím však mezi nimi byla prokázána genomická podobnost více než 99% [46].

 

Výsledky a diskuse

 

Špička SAR-CoV-2 je silně glykosylovaná a glykosylace ano

věří, že hraje důležitou roli při detekci viru proti našemu vlastnímu imunitnímu systému. Část alfa šroubovic vede po délce hrotového proteinu. Většinou se na tomto konci koncentrují beta listy, což je místo, kde se spike protein spojuje s buňkou a infikuje ji. Zajímavostí je, že šroubovice jsou tvořeny aminokyselinami citlivými na působení oxidu chloričitého (na úrovni cysteinu).

 

Spike protein je ve skutečnosti tvořen třemi propletenými řetězci, které mají identické aminokyselinové sekvence; každý z těchto řetězců se nazývá protomer. Protomery však nemají identické trojrozměrné konformace.

 

Rozdíl v konformaci v protomerech můžeme vidět zkoumáním části špičkového proteinu, která je kritická pro životní cyklus viru, doménu vázající receptor nebo RBD. RBD je místo, kde se virus váže na enzym na povrchu hostitelských buněk, což mu umožňuje fúzi s buňkou a transport virového genetického materiálu uvnitř. Dva z těchto RBD jsou ve struktuře v nižší konformaci. Jeden z těchto RBD se však otočí. Tato „vzestupná“ konformace je vyšší energie, připravená vázat se na buněčný receptor a vést k fúzi. Předpokládá se, že když se protein špice váže, každá z těchto RBD se změní na tuto méně stabilní konformaci.

 

Naše vlastní enzymy, ty, které rozbíjejí peptidové vazby zvané proteázy, mohou štěpit protein špice na specifických místech a dochází ke konformačním změnám ve fúzi proteinu špice. RBD se váže na ACE2, což je receptor na povrchu naší buňky, ke kterému se koronavirus váže a způsobuje fúzi. Tyto struktury jsou také silně glykosylované. Pokud skryjeme cukry, abychom vytvořili model pro pochopení interakce RBD-ACE2, a dáme tam oxid chloričitý působící na aminokyseliny, můžeme se zaměřit na některé slabé interakce, které drží RBD a ACE2 pohromadě.

 

Například máme rozsáhlou síť vodíkových vazeb na rozhraní RBD-ACE2, která napadá dva tyrosinové zbytky (Tyr-489 a Tyr-83). Tento postranní řetězec tyrosinu je také vázán na karbonylový vodík asparaginového postranního řetězce (Asn-487), který se zase prostřednictvím svého atomu vodíku NH váže na glutaminkarbonyl v ACE2 (gln-24). Oxid chloričitý, postulujeme, oxiduje tyto zbytky, mimo jiné Tyr-489 a Tyr-83, s nimiž je rozhraní RBD-ACE2 denaturováno a virus se již nemůže vázat nebo již oxiduje. Kromě toho oxid chloričitý také oxiduje prolin přítomný v ACE2, který dokončuje oxidaci a deformaci ACE2.

 

Pohybující se podél, alfa šroubovice ACE2, máme postranní řetězec glutamátu, který je deprotonován při pH 7.4, a lysinový zbytek, který při tomto pH nese pozitivní náboj.

 

Pokud se virus spojí, virový genetický materiál se uvolní do buňky. V případě koronavirů tato část RNA cestuje do ribozomů naší buňky a drží ji jako rukojmí za účelem vytváření vlastních virových proteinů. Jedna zajímavá věc je, že tato virová RNA je schopná změnit třípísmenný rámec RNA bází, který je čten ribozomem; toto v podstatě duplikuje peptidovou sekvenci, kterou lze vyrobit z virové repliky pomocí našich ribozomů; proteiny, které virus potřebuje, aby shromáždil další své vlastní kopie, které se nakonec uvolní z buňky a infikují ostatní. V tomto procesu se přenáší důležitý protein a je to hlavní proteáza, která štěpí řetězec virových polypeptidů ve funkčních proteinech nezbytných pro sestavení nových virů. Toto je další terapeutický cíl, pokud je jedinec již virem nakažen; lék, který se připojuje k proteáze, může být podáván tak, aby se zabránilo vývoji zralých virových proteinů, čímž se zastaví replikace viru.

 

Tato hlavní proteáza SAR-CoV-2 je dimer složený ze dvou identických proteinových řetězců a musí se dimerizovat, aby se stala funkční proteázou. Na rozhraní dimeru existuje mnoho interakcí aminokyselin, ale vědci, kteří publikovali tuto krystalovou strukturu, naznačují, že iontové interakce mezi postranním řetězcem tohoto argininového zbytku a tímto glutamátem řídí dimerizaci. Tato interakce je přítomna na obou stranách dimeru. Při pohybu směrem k aktivnímu místu jsou důležité zbytky tvořeny cysteinovým řetězcem (Cys-145) a histidinem (His-41).

 

Tento enzym je cysteinová proteáza, takže k napadení amidové vazby peptidu využívá nukleofilní cystein. V tomto mechanismu dusík histidinu popadne proton postranního řetězce cysteinu, což mu umožní napadnout peptidovou vazbu.

Peptidová vazba se rozbije a poté může vstoupit molekula vody, čímž se uvolní cystein, takže proteáza může rozbít další polypeptidový řetězec. Enzymy obsahující nukleofilní katalytické zbytky jsou vynikajícími cíli pro nevratnou inhibici. Protože obsahují postranní řetězec nukleofilních aminokyselin - v tomto případě cystein - mohou být navrženy inhibitory, které se vážou na enzym trvalou kovalentní vazbou. Působí zde také oxid chloričitý, který oxiduje cystein, takže je tento mechanismus blokován. Na rozdíl od reverzibilních inhibitorů, které se mohou pohybovat dovnitř a ven z aktivního místa, tyto nevratné inhibitory - nazývané také inhibitory sebevraždy - trvale inaktivují protein, zabraňují mu v práci a vytvářejí více virových proteinů. Tito vědci dříve navrhli inhibitory pro jiné proteázy koronaviru. Byli schopni vázat jeden z těchto inhibitorů na aktivní místo proteázy SARS-CoV-2. Serin je zjevně zapojen do kovalentní vazby s inhibitorem ketonem. Nyní jde o reverzibilní reakci, takže nejde o inhibitor sebevraždy sám o sobě, s přítomností cysteinu kovalentně vázaného v tomto aktivním místě. Tady je tento karbonyl z inhibitoru vodíkovou vazbou se třemi NH skupinami na proteinu. Proteázový katalytický histidin se také podílí na vodíkové vazbě. Tento kruh je zapojen do rozsáhlé sítě vodíkových vazeb, která zahrnuje jak páteřní atomy struktury, tak postranní řetězce. Znalost kontaktů, které vytváří inhibitor s enzymem, umožňuje chemikům a biologům zvážit interakce a potenciálně navrhnout ještě lepší inhibitory. Kromě enzymatické inhibice, která by byla účinnou strategií kontroly viru, je vzhled oxidu chloričitého jako látky, která neinhibuje, ale „rozpouští se“ oxidací klíčové struktury viru, umožňuje působení s téměř „chirurgickým“ molekulárním přesnost, a proto je mnohem účinnější jako mechanismus kontroly virové infekce [47].

 

Proč investovat do čističky vzduchu?

 

Závěrem lze říci, že pokud známe rozložení oblastí, kde se nacházejí aminokyseliny citlivé na oxidaci oxidem chloričitým, je třeba zdůraznit, že špičkový protein koronaviru SARS-CoV-2 obsahuje kromě tyrosinu také 54 tyrosinu, 12 tryptofanu, 40 zbytků cysteinu prolin, který je zase přítomen ve struktuře ACE2 ve spojení s RBD, umožňuje promítat působení oxidu chloričitého na virovou špičku. Nejlepší pedagogický příklad je, že hrot je klíč a ACE2 zámek. Deformace klíče oxidací oxidu chloričitého v aminokyselinách cystein, tyrosin, tryptofan a prolin, šroubovicových řetězců a oxidace zámku (ACE2) zabraňují nejen spojení, ale také rozpouští existující spojení mezi spike (RBD) a ACE, velmi rychle.

 

Uznání

 

Chtěli bychom poděkovat za vaši spolupráci a příspěvky lékaři Dr. Mitchellu B. Liesterovi, Lékařské fakultě University of Colorado, Colorado Springs Branch, Monument, CO 80132.

 

Financování

 

Tato práce byla podpořena vlastními zdroji výzkumných pracovníků.

 

Střet zájmů

 

Kalcker, Andreas deklaruje možný finanční zájem, protože je vynálezcem švýcarského patentu v řízení / 11136-CH. Ostatní dva autoři nemají konkurenční ekonomické zájmy. To však nemění dodržování všech zásad autorů ohledně výměny dat a materiálů autory.

 

 

Reference

 

1. Guo, Yan-Rong, Qing-Dong Cao, Zhong-Si Hong a Yuan-Yang Tan a kol. "Vypuknutí vzniku, přenosu a klinické terapie koronavirové nemoci 2019 (COVID-19) - aktualizace stavu." Mil Med Res 7 (2020): 1-10.

2. Oyarzún, Gómez Manuel. "Translační medicína: stříbrný most mezi základními vědami a klinickou medicínou." Rev Chil I dech 33 (2017): 81-84.

3.https://www.lenntech.es/procesos/desinfeccion/quimica/desinfectantes- chlor-diocope.html

1. Ison A, Odeh IN a Margerum DW (2006) Kinetika a mechanismy oxidace chlordioxidu a cysteinchloritu a glutathionu. Inorg Chem 45: 8768-8775.

2. Stewart DJ, Napolitano MJ, Bakhmutova-Albert EV a Margerum DW (2008) Kinetika a mechanismy oxidace tryptofanu oxidem chloričitým. Inorg Chem 47: 1639-1647.

3. Napolitano, Michael J., Brandon J. Green, Jeffrey S. Nicoson a Dale W. Margerum. „Oxidace chlordioxidu tyrosinu, N-acetyltyrosinu a Dopa.“ Chem Res Toxicol 18 (2005): 501-508.

4. Tan, Hsiou-Kun, Willis B Wheeler a Cheng-I Wei. "Reakce oxidu chloričitého s aminokyselinami a peptidy: studie kinetiky a mutagenity." Mutation Res 188 (1987): 259-266.

5. Loginova, IV, SA Rubtsova a AV Kuchin. "Oxidace methioninu a cysteinových derivátů oxidem chloričitým na sulfoxidy." Chem Nat Compd 44 (2008): 752-754.

6. Gray, Nicholas F. "Volný a kombinovaný chlor." In: Microbiology of Waterborne Diseases, (2ndEdn) Academic Press, Londýn.

7. Young, RO. “Chlordioxid (ClO2) Jako netoxický antimikrobiální prostředek pro viry, bakterie a kvasinky (Candida Albicans). “ Vakcíny Int J Vaccin 2 (2016): 00052.

8. Ogata, Norio a Takashi Shibata. „Ochranný účinek plynu s nízkou koncentrací oxidu chloričitého proti infekci chřipkou a virem.“ J Gen Virol 89 (2008): 60-67.

9. Schijven, Jack, Peter Teunis, Trudy Suylen a Henk Ketelaars a kol. „QMRA adenoviru v pitné vodě v úpravně pitné vody pomocí dezinfekce UV a oxidem chloričitým.“ Water Res 158 (2019): 34-45.

10. Harakeh, M a M. Butler. "Inaktivace lidských rotavirů, SA11 a dalších enterických virů v odpadních vodách dezinfekčními prostředky." Infekce epidemiolem 93 (1984): 157-163.

11. Zhong, Qingxia, Anna Carratalà, Rachele Ossola a Virginie Bachmann a kol. "Zkřížená rezistence Echoviru 11 rezistentního na UV nebo oxid chloričitý vůči jiným dezinfekčním prostředkům." Frontiers Microbiol 8 (2017): 1928.

12. Noss, Charles I, Fred S Hauchman a Vincent P Olivieri. "Reaktivita s oxidem chloričitým s proteiny." Water Res 20 (1986): 351-356.

13. Alvarez, Maria E a RT O'Brien. "Mechanismy inaktivace polioviru oxidem chlorovodíkem a jódem." Apl Reign Microbiol 44 (1982): 1064-1071.

14. https://microbeonline.com/influenza-flu-virus-structure-classification/

     

15. https://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id202/id202bkr.html

     

16. Ogata, Norio. „Denaturace bílkovin oxidem chloričitým: oxidační modifikace zbytků tryptofanu a tyrosinu.“ biochemický 46 (2007): 4898-4911.

17. Ogata, Norio. „Inaktivace hemaglutininu viru chřipky oxidem chloru: Oxidace konzervovaného zbytku tryptofanu 153 v místě vázajícím receptory.“ J Gene Virol 93 (2012): 2558-2563.

18. Nemerow, Glen R, Phoebe L Stewart a Vijay S. Reddy. „Struktura lidského adenoviru.“ Curr Opinion Virol 2 (2012): 115-121.

19. Pesavento, JB, SE Crawford, MK Estes a BV Venkataram Prasad. "Rotavirové proteiny: struktura a shromáždění." v Reoviry: Vstup, shromáždění a morfogeneze, Springer, Berlín, Heidelberg, 2006.

20. Dennehy, Penelope H. „Infekce rotaviry: nemoc z minulosti?“ Infikujte Dis Clin

    29 (2015): 617-635.

     

21. Chen, Yu-Shiaw a JAMES M. Vaughn. "Inaktivace lidských a opičích rotavirů oxidem chloričitým." Appl Environ Microbiol 56 (1990): 1363-1366.

22. Hogle, James M „Vstup do buněk polioviru: Společná strukturální témata ve vstupních cestách virových buněk.“ Annu Rev Microbiol 56 (2002): 677-702.

23. Ridenour, GM a RS Ingols. „Inaktivace viru poliomyelitidy„ volným “chlorem.“ Am J Veřejné zdraví Zdraví národů 36 (1946): 639-644.

24. https://www.epa.gov/pesticide-registration/list-n-disinfectants-use-against- SARS-CoV-2

25. Wang, Xin-Wei, Jin-Song Li, Min Jin a Bei Zhen a kol. „Studie o rezistenci koronaviru spojeného se syndromem těžké akutní respirační syndrom.“ Metody J. Virol 126 (2005): 171-177.

26. Tan, Hsiou-Kun, Willis B Wheeler a Cheng-I Wei. "Reakce oxidu chloričitého s aminokyselinami a peptidy: studie kinetiky a mutagenity." Mutat Res 188 (1987): 259-266.

     

27. Ison, Ana, Ihab N Odeh a Dale W Margerum. „Kinetika a mechanismy oxidu chloričitého a chloritanových oxidací cysteinu a glutathionu.“ Inorg Chem 45 (2006): 8768-8775.

     

28. Napolitano, Michael J., Brandon J. Green, Jeffrey S. Nicoson a Dale W. Margerum. „Oxidace chlordioxidu tyrosinu, N-acetyltyrosinu a Dopa.“ Chem Res Toxicol 18 (2005): 501-508.

     

29. Stewart, David J., Michael J. Napolitano, Ekaterina V. Bakhmutova-Albert a Dale W. Margerum. „Kinetika a mechanismy oxidace chlordioxidu tryptofanu.“ Inorg Chem 47 (2008): 1639-1647.

     

30. Tao, Y, K Queen, CR Paden And J Zhang, et al. Syndrom těžkého akutního dýchání Coronavirus 2 Isolate 2019-Ncov. USA-IL1 / 2020, kompletní genom. NCBI Genbank, 2020.

     

31. Song, Wenfei, Miao Gui, Xinquan Wang a Ye Xiang. "Kryo-EM struktura komplexu s glykoproteinem Spike Coronavirus Spike s jeho hostitelským buněčným receptorem ACE2." Plos patogeny 14 (2018): E1007236.

     

32. Jaimes, Javier A, Nicole M. André, Jean K. Millet a Gary R. Whittaker. -Jako koronaviry. “ Archiv 2002.06196 (2020): 2-4.

     

33. Grifoni, Alba, John Sidney, Yun Zhang a Richard H Scheuermann a kol. „Cíle kandidátů na imunitní odpovědi na román koronaviru 2019 (Ncov): Sekvenční homologie a bioinformatické předpovědi.“ Cell-Host-Microbe-D-20-00119 (2020).

     

34. Xie, Liangzhi, Chunyun Sun, Chunxia Luo a Yanjing Zhang a kol. „Srovnání struktury a receptoru SARS-CoV-2 a SARS-CoV-2Spike-RBD a potenciální důsledky pro neutralizaci vývoje protilátek a vakcín.“ biorxiv (2020).

     

35. Yan, Renhong, Yuanyuan Zhang, Yingying Guo a Lu Xia a kol. „Strukturální základ pro uznání 2019-Ncov lidským ACE2.“ biorxiv (2020).

     

36. Lan, Jun, Jiwan Ge, Jinfang Yu a Sisi Shan a kol. "Struktura domény vázající se na Spike Receptor SARS-CoV-2 vázaná na ACE2 receptor." Příroda 581 (2020): 215-220.

     

37. Zhang, Linlin, Daizong Lin, Xinyuanyuan Sun a Katharina Rox a kol. “Rentgenová struktura hlavní proteázy nové koronavirové látky SARS-CoV-2 umožňuje návrh Α-Ketoamidové inhibitory. “ biorxiv (2020).

38. Walls, Alexandra C, Young-Jun Park, M Alejandra Tortorici a Abigail Wall a kol. „Struktura, funkce a antigenicita glykoproteinu Spike SARS-CoV-2.“ Buňka (2020).

     

39. Wrapp, Daniel, Nianshuang Wang, Kizzmekia S Corbett a Jory A. Goldsmith, et al. „Cryo-EM Structure of 2019-Ncov Spike in the Prefusion Conformation.“ Věda 367 (2020): 1260-1263.

     

40. Shang, Jian, Gang Ye, Ke Shi a Yushun Wan a kol. „Strukturální základ rozpoznávání receptorů podle SARS-CoV-2.“ Příroda 581 (2020): 221-224.

     

41. Xiaoli, Xiong, Kun Qu a John AG Briggs „Uzavřený a termostabilní trimér proteinu SARS-CoV-2 Peak Protein“, Příroda Structural Mol Biol. biorxiv (2020).

     

42. Lam, Tommy Tsan-Yuk, Na Jia, Ya-Wei Zhang a Marcus Ho-Hin Shum a kol. „Identifikace koronavirů souvisejících se SARS-CoV-2 u malajských luskounů.“ Příroda (2020): 1-4.

     

43. Zambrano-Estrada, Xochitl, Carlos A Dominguez-Sanchez, Marina Banuet-Martinez a Fabiola Guerrero-De La Rosa a kol. "Hodnocení antivirového účinku oxidu chloričitého (ClO2) Používání modelu obratlovců očkovaných ptačími ptáky

    Koronavirus. " biorxiv (2020).

     

44. García, R. Předběžné výsledky Použití orálního oxidu chloričitého u pacientů s COVID-19. Přímá zpráva, 2020.

 

Jak citovat tento článek: Insignares - Carrione E, Bolano Gomez B a Kalcker Andreas. „Chlordioxid v COVID-19: Hypotéza o možném mechanismu molekulárního působení v SARS-CoV-2.“ J Mol Genet Med 14 (2020): 468