Chlordioxid v covid19: hypotéza o možném mechanismu molekulárního působení v SARS-CoV-2
Chlordioxid v Covid-19:
Hypotéza o možném mechanismu molekulárního působení v SARS-CoV-2
Stáhněte si originální dokument zde:
Insignares-Carrione, Eduardo. DM * (1) Globální ředitel výzkumu LVWWG Liechtensteiner Verein für Wissenschaft und Gesundheit, Švýcarsko-Lichtenštejnsko, 2020. Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
Bolano Gómez, Blanca. Doktor medicíny (2) Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
Kalcker, Andreas Ludwig (3) Výzkumný pracovník Swiss SVNB Biphysic generální ředitel Liechtensteiner
Verein für die Wissenschaft und Gesundheit
Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
* odpovídající autor (1) (+34) 666667180
Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
Citace:
Insignares - Carrione E, Bolano Gomez B, Kalcker Andreas. (2020).
Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
Autorská práva: © 2020 Insignares - Carrione a kol. Toto je článek s otevřeným přístupem distribuovaný za podmínek licence Creative Commons Attribution License, která umožňuje neomezené použití, distribuci a reprodukci na jakémkoli médiu za předpokladu, že bude připsán původní autor a zdroj. Bude definováno editorem.
Peníze: Tato práce byla podpořena vlastními zdroji výzkumných pracovníků.
Střet zájmů: Kalcker, Andreas prohlašuje možný finanční zájem, protože je vynálezcem čekajícího švýcarského patentu / 11136-CH. Ostatní dva autoři nemají konkurenční ekonomické zájmy. To však nemění dodržování všech zásad autorů ohledně výměny dat a materiálů autory.
Úvod
ClO2, takzvaný „ideální biocid“, lze také použít jako virucidní, pokud pochopíme, jak roztok rychle zabíjí viry, aniž by způsobil újmu lidem nebo zvířatům. Naším cílem bylo najít mechanismus působení této selektivity studiem jejího reakčního mechanismu se strukturou SARS-CoV-2 teoreticky i experimentálně, prostřednictvím simulace silico.
Metody
Byly provedeny rozsáhlé přehledy předchozího výzkumu mechanismu působení ClO2 u virů, zejména virů sars-cov a chřipky, na úrovni složek aminokyselin a sacharidů, zejména na vrcholu virů, a tato data byla přenesena na strukturní aminokyseliny SARS-CoV-2 viry, zejména ty, které jsou v kritických pozicích v špičce SARS-CoV-2. Předběžná data ze simulace in silico a počáteční data z našich klinických studií o použití Cl02 v perorálních přípravcích covid19, které jsou v procesu, nám umožňují vypočítat, ve kterých aminokyselinách působí, určit místa působení ClO2 a odhadnout akce, jako je virucida v SARS-CoV-2, na základě rovnic reakce a difúze prokázaných v předchozích studiích. Používáme 3D rekonstrukce provedené počítačem, využití dat prostřednictvím studií v elektronické kryomikroskopii a předchozí práce založené na softwaru pro rozšířenou realitu ChimeraX (UCSF).
Diskuse.
Stanovení pozic aminokyselin náchylných k oxidaci chlordioxidem umožňuje promítnutí jejich možného mechanismu působení na virus SARS-CoV-2. Cystein na pozicích Cys336-Cys361, Cys379-Cys432 a Cys391-Cys525 stabilizuje pět beta listů (β1, β2, β3, β4 a β7) a Cys480-Cys488 je klíčem ve spojení mezi hřebenem SARS-CoV-2
MKP a N-koncová spirála hACE 2. Je zřejmé, že pouze na této úrovni by oxidace těchto cysteinových zbytků měla destabilizující a škodlivý účinek na beta vrstvy viru.
Výsledky
Projekce a simulace oxidace oxidu chloričitého ve strukturních aminokyselinách SARS-CoV-2, na které působí, na více než jejich počet (54 tyrosin, 12 tryptofan, 40 cysteinových zbytků, kromě prolin), umožňuje velmi jasnou představu o místech, kde oxid působí denaturačním účinkem na virovou strukturu a na lidský ACE2. Použitím zjištění rychlosti reakce a difúze oxidu na tyto aminokyseliny je možné pochopit extrémní rychlost, s jakou působí, což by mohlo vysvětlit první zjištění klinických observačních studií použití oxidu chloričitého v covid19 provedených autory v Bolívie pod přísným dodržováním etické komise.
Závěr
Znát dispozice míst, ve kterých se aminokyseliny citlivé na oxidaci oxidem chloričitým nacházejí v špičkovém proteinu koronaviru SARS-CoV-2, který navíc obsahuje 54 tyrosinů, 12 tryptofanů a 40 cysteinových zbytků prolin přítomný ve struktuře ACE2 ve spojení s RBD, umožňuje promítat působení oxidu na virovou špičku.Doufáme, že brzy zveřejníme klinické aplikační zkoušky tohoto slibného systémového virucidu.
Introducción:
Covid-19 je infekční onemocnění způsobené virem SARS-CoV-2. Poprvé byla detekována v čínském městě Wu-chan (provincie Chu-pej) v prosinci 2019. Za tři měsíce se rozšířila prakticky do všech zemí světa, a proto ji Světová zdravotnická organizace vyhlásila za pandemii. (WHO, 11. března 2020).
Neexistuje žádná specifická léčba; hlavním terapeutickým opatřením je zmírnění příznaků a udržení životně důležitých funkcí. Výzkum zaměřený na nalezení účinné léčby začal od ověření pandemického rozsahu onemocnění. Ústředním problémem je, že jedenáct měsíců po oficiálním nástupu není účinná léčba této choroby známa. Při absenci účinné léčby jsme studovali nové terapeutické možnosti s úmyslem najít efektivní a bezpečnou léčbu covid19.
V souladu s výše uvedeným se tento výzkum zaměřuje na aktuální výsledky a předchozí výzkumy [1], které přidávají možné terapeutické účinky oxidu chloričitého jako virucidního ve vodném roztoku a bez přítomnosti chloritanu sodného pomocí konceptů translační medicíny [2] ve znalostech o struktuře viru a mechanismu působení chlordioxidu ve virech navrhnout možnou léčbu volby pro covid19.
Chlordioxid
Působení oxidu chloričitého je dáno jeho selektivitou pro pH(3) a podle oblasti nebo velikosti, kde generuje svou akci. To znamená, že tato molekula disociuje a uvolňuje kyslík, když přijde do styku s jinou kyselinou. Při reakci se jeho atom chloru váže na sodík v médiu a přeměňuje se na chlorid sodný (běžná sůl) uvolňující kyslík, který oxiduje přítomné patogeny kyselého pH a převádí je na alkalické oxidy. Když tedy chlordioxid disociuje, uvolňuje kyslík do krve, stejně jako erytrocyty (červené krvinky) prostřednictvím stejného principu (známého jako Bohrův efekt), který má být selektivní pro kyselost.
Jak se v krvi obvykle stává, oxid chloričitý uvolňuje kyslík, když narazí na kyselou půdu, ať už jde o kyselinu mléčnou nebo kyselost patogenu. Jeho možný terapeutický účinek se předpokládá mimo jiné díky tomu, že vytváří alkalické prostředí a současně eliminuje malé kyselé patogeny oxidací s elektromagnetickým přetížením, které není možné rozptýlit jednobuněčnými organismy. Doba úmrtí viru musí být analogická s dobou zpoždění způsobenou chemickou reakcí kvůli dobám potřebným k pokrytí celého objemu. Můžeme očekávat, že u viru o průměru 120 nanometrů bude doba destrukce díky jeho geometrickému faktoru mnohem kratší.
Podle studií Zoltána Noszticziuse je oxid chloričitý selektivním antimikrobiálním činidlem, které může rychle zabíjet mikrometrické organismy, ale nemůže způsobit skutečné poškození mnohem větším organismům, jako jsou zvířata nebo lidé, protože nemůže proniknout hluboko do tkání.
Je známo, že mnohobuněčná tkáň má nejvyšší schopnost rozptýlit elektrické náboje, a proto není ovlivněna stejným způsobem napětím oxidačně-redukčního procesu (ORP), jako je tomu u jednobuněčných organismů, a proto existuje biochemicky větší ochrana buněk podle velikosti.
Chlordioxid, který je nejúčinnějším necytotoxickým dezinfekčním prostředkem známým po ozonu, a který se používá jako vodný roztok, má obrovské možnosti terapeutického použití, protože je také schopen proniknout a eliminovat biofilm (3), kterého ozon nedosahuje. dělat. Velkou výhodou možného terapeutického použití oxidu chloričitého při infekcích je nemožnost bakteriální nebo virové rezistence na ClO2, protože působí oxidačním mechanismem a ne jako chlor (Cl2) chlorací (3)
Přestože je ozon v antiseptickém smyslu silnější, jeho vysoký oxidační potenciál 2,07 a krátký poločas pouhých 15 minut při 25 ° C s hodnotou pH 7,0 ho činí méně účinným než ClO2 pro terapeutické aplikace. in vivo. Oxid chloričitý je oxidační činidlo selektivní pro pH (-) a velikost a na rozdíl od jiných látek nereaguje s většinou složek živé tkáně (3). Chlordioxid rychle reaguje s fenoly a thioly nezbytnými pro život bakterií.
U fenolů mechanismus spočívá v napadení benzenového kruhu, eliminaci zápachu, chuti a dalších meziproduktů (4). Oxid chloričitý účinně ničí viry a je až 10krát účinnější (5) než chlornan sodný (bělidlo nebo bělidlo). Ukázalo se také, že je velmi účinný proti malým parazitům, prvokům (4).
Jedním z témat, která byla v poslední době hodně přezkoumávána, je reaktivita oxidu chloričitého s aminokyselinami. V testech reaktivity oxidu chloričitého s 21 aminokyselinami pouze cystein4, tryptofan5, tyrosin6, prolin a hydroxyprolin reagovaly při pH kolem 6. Cystein a methionin (4) jsou dvě aromatické aminokyseliny obsahující síru, tryptofan a tyrosin a dva anorganické ionty Fe2 + a Mn2 +. (3) Cystein je díky své příslušnosti ke skupině thiolů aminokyselinou až 50krát reaktivnější se všemi mikrobiálními systémy než ostatní čtyři aminokyseliny, a proto není možné, aby vytvořil odolnost proti oxidu uhličitému. chlór.
Hypotéza, kterou zde navrhujeme, spočívá v tom, že příčinu antivirového účinku oxidu chloričitého lze vysvětlit jeho působením na nejméně pět výše uvedených aminokyselin nebo na peptidové zbytky.
Oxid chloričitý (ClO2) se od roku 1944 používá kvůli úpravě pitné vody díky své biocidní síle a také ve většině lahvových vod vhodných ke spotřebě kvůli téměř nulové toxicitě ve vodném roztoku (3,4) systematicky se používá k dezinfekci a konzervaci krevních transfúzních vaků (4). Jelikož se jedná o selektivní oxidační činidlo (3,4), je jeho způsob působení velmi podobný jako u fagocytózy, kde se k eliminaci všech typů patogenů používá mírný oxidační proces.
Oxid chloričitý (ClO2) je nažloutlý plyn, který dosud není součástí běžného lékopisu jako léčiva navzdory své prokázané účinnosti při denaturaci virů s mnoha patenty pro použití při různých způsobech léčby, jako je dezinfekce nebo sterilizace krevních složek (krvinky, krevní bílkoviny atd.) 4, parenterální léčba (intravenózní cestou) infekcí HIV (4) nebo k léčbě neurodegenerativních onemocnění, jako je amyotrofická laterální skleróza (ALS), Alzheimerova choroba (4 ) a další patenty pro použití jako patenty pro: léčbu rakoviny indukující apoptózu (CN 103720709
A) Léčba nádoru (US 10, 105, 389 B1) Antivirová léčba sinusitidy (US 2o16 / 0074432 AI), stimulace imunitního systému (US 1 5,830,511 2014082514), iniciace a diferenciace kmenových buněk (WO1A6280716), metoda vaginální léčby (US 1B4,737,307), Léčba kůže proti virům a bakteriím (US 4,296,102), Způsob léčby amebiázy u lidí (US 2015), Léčba proti kvasinkovým infekcím (US 0320794/1 A87.3106), Léčba ran (US 100015251) , Léčba ústních dutin (US 4689215), (US53841134), Proti zánětům (US20100159031), Léčba proti plísním nehtů (US XNUMX) a Švýcarský patent čeká na vyřízení / 11136-CH.(Kalker, A.).
Na základě výše uvedeného lze zřídit tři provozovny:
Oxid chloričitý může bojovat proti virům prostřednictvím procesu selektivní oxidace denaturací kapsidových proteinů a následnou oxidací genetického materiálu viru, čímž se deaktivuje. Vzhledem k tomu, že není možné se přizpůsobit oxidačnímu procesu, zabraňuje rozvoji rezistence viru, což z oxidu chloričitého (ClO2) slibuje léčbu jakéhokoli virového poddruhu.
Existují vědecké důkazy o tom, že oxid chloričitý je účinný proti koronavirům SARS-CoV (4) a SARS-CoV-2, například práce provedená na univerzitě v Queretaro v Mexiku a zveřejněná v listopadu 2020 COVID-19, nazvaná „ In vivo hodnocení antivirového účinku ClO2 (oxid chloričitý) u kuřecích embryí inokulovaných ptačími koronaviry (IBV), u nichž měla léčba ClO2 výrazný dopad na IBV infekci. Konkrétně byly virové titry 2,4krát nižší a úmrtnost byla snížena na polovinu u infikovaných embryí, která byla ošetřena ClO2. Infekce způsobila vývojové abnormality bez ohledu na léčbu. Léze typické pro infekce IBV byly pozorovány u všech naočkovaných embryí, ale závažnost byla u embryí ošetřených ClO2 významně nižší. Při použitých dávkách nebyl zjištěn žádný makroskopický ani mikroskopický důkaz toxicity způsobené ClO2. (padesáti).
Toxicita: Největší problémy, které vznikají u léků nebo látek, které lze obecně považovat za takové, jsou kvůli jejich toxicitě a vedlejším účinkům. V případě vdechování dýchacích cest existuje toxicita s oxidem chloričitým, ale nejsou žádné zprávy o toxicitě při doporučené dávce 30 mg nebo 30 ppm ve vodném roztoku orálně a neexistuje klinicky prokázaná smrt ani při vysokých dávkách při požití. Letální dávka (LD50, poměr akutní toxicity) se odhaduje na 292 mg na kilogram po dobu 14 dnů, přičemž její ekvivalent u 50 kg dospělého by byl 15.000 50 mg podávaných po dobu dvou týdnů. Sub-toxické orální dávky, které lze použít, jsou přibližně 100 ppm rozpuštěných ve 10 ml vody 500krát denně, což odpovídá 2 mg. Kromě toho se oxid chloričitý po disociaci rozkládá na iont chloru, který se okamžitě spojuje s iontem sodným a vytváří v lidském těle běžnou sůl NaCl a kyslík O19. Stručně řečeno, oxid chloričitý v doporučených dávkách 30 mg nebo 30 ppm za den v COVIDXNUMX není toxický.
Virucidní účinky oxidu chloričitého
Chlordioxid je účinné antimikrobiální činidlo, které ničí bakterie, viry a některé parazity [9]. Její širokospektrální germicidní profil je odvozen z působení této sloučeniny jako necytotoxického oxidačního činidla.
Viry se obvykle skládají z vnější vrstvy nebo proteinového obalu, který zapouzdřuje nukleovou kyselinu, kterou může být DNA nebo RNA. Když oxid chloričitý přijde do kontaktu s virem, uvolní se na cílovém viru jeden vysoce reaktivní rodící se atom kyslíku. Tento kyslík se váže na specifické aminokyseliny v proteinové vrstvě viru, denaturuje proteiny a činí virus neaktivní. Vznikající atomy kyslíku se dále váží na guanin, jednu ze čtyř bází nukleových kyselin, které se nacházejí v RNA a DNA, a tvoří 8-oxoguanin. Tato oxidace guaninových zbytků zabraňuje replikaci virových nukleových kyselin [10].
V publikované vědecké literatuře existují zprávy, že oxid chloričitý inaktivuje širokou škálu virů, včetně chřipky A [11], lidského adenoviru [12], lidského rotaviru [13], echoviru [14], bakteriofága f2 [15] a polioviru [16].
Viry chřipky A jsou sférické jednovláknové RNA viry s negativním smyslem, které mají lipidovou membránu, která obsahuje vrcholy složené z glykoproteinů známých jako HA (hemaglutinin) a NA (neuraminidáza). Ve viru je osm samostatných řetězců RNA [17]. Předklinická studie [11] zjistila, že plynný oxid chloričitý je účinný v prevenci infekce chřipkou A vyvolanou aerosolem. Tato studie používala nízké koncentrace plynného chlordioxidu (tj. 0,03 ppm) v myší kleci. Tato úroveň je pod úrovní dlouhodobé expozice OSHA (8 hodin) pro plynný chlordioxid v okolním vzduchu na pracovišti, což je 0,1 ppm [18]. Plynný oxid chloričitý účinně snižoval počet infekčních virů v plicích myší a výrazně snižoval úmrtnost. Úmrtnost byla 70. den 7% (10/16) ve skupině neošetřené oxidem chloričitým a 0% (0/10) ve skupině léčené oxidem chloričitým. Autoři potvrdili tyto výsledky opakováním experimentu. The
Výsledky opakované studie byly 50% (5/10) úmrtnost v neošetřené skupině a 0% (0/10) v léčené skupině.
Autoři dospěli k závěru, že nízké hladiny plynného chlordioxidu (tj. 0,03 ppm), které jsou pod přípustnou úrovní expozice na lidských pracovištích, „by mohly být použity v přítomnosti lidí k prevenci jejich infekce virus chřipky A a případně další viry spojené s infekcemi traktu respirační (str. 65).Navrhli, že „plynný oxid chloričitý lze použít v místech, jako jsou kanceláře, divadla, hotely, školy a budovy letišť, aniž by bylo nutné evakuovat lidi, aniž by to narušilo jejich běžné činnosti.“
Autoři navrhli, aby jejich metoda „otevírala novou cestu prevence pandemické chřipky“ (str. 65) po provedení studie ve škole s příznivými výsledky v tomto ohledu.
Bylo zjištěno, že infekčnost viru je snížena in vitro aplikací oxidu chloričitého a vyšší koncentrace způsobují ještě větší snížení. Tato inhibice infekčnosti byla korelována se změnami virových proteinů. Tyto změny byly výsledkem zabudování atomů kyslíku do tryptofanových a tyrosinových zbytků umístěných v HA a NA proteinech [11]. Tyto proteiny jsou denaturovány přídavkem atomů kyslíku, což eliminuje schopnost viru infikovat další buňky [19]. Pozdější studie zjistila, že inaktivace viru chřipky A je způsobena přenosem 2 atomů kyslíku z oxidu chloričitého na specifický zbytek tryptofanu (W153) v proteinu špičky hemaglutininu (HA).
Adenoviry jsou neobalené viry s ikosahedrální kapsidou obsahující dvouřetězcový genom DNA. Bylo klasifikováno sedm skupin lidských adenovirů [21]. Nedávná studie zjistila, že oxid chloričitý může pomoci snížit hladinu adenoviru v pitné vodě [12]. Tato studie zkoumala účinky chlordioxidu a ultrafialového světla na hladinu adenoviru v pitné vodě v Nizozemsku. Autoři našli
že aplikace oxidu chloričitého v nízkých koncentracích (0.05 - 0.1 ppm) snížila adenoviry v pitné vodě, zatímco UV dezinfekce byla bez dezinfekce chlordioxidem nedostatečná.
Rotaviry jsou dvouvláknové RNA viry, které se skládají z 11 jedinečných dvouvláknových molekul RNA obklopených třívrstvou ikosahedrální proteinovou kapsidou [22]. Tyto viry, které jsou celosvětově hlavní příčinou závažných průjmových onemocnění u kojenců a malých dětí [23], jsou inaktivovány oxidem chloričitým. Ve skutečnosti jsou při koncentracích chloridového oxidu v rozmezí od 0,05 do 0,2 ppm inaktivovány během 20 sekund in vitro [24].
Bacteriophage f2 je pozitivní jednořetězcový RNA virus, který infikuje bakterie Escherichia coli. Studie in vitro zjistila, že 0,6 mg / litr oxidu chloričitého rychle (tj. Do 30 sekund) inaktivoval bakteriofág f2 a narušil jeho schopnost vázat se na svého hostitele E. coli [15]. Inaktivace viru i inhibice jeho schopnosti vázat se na hostitele se zvyšovaly s vyšším pH a se zvyšujícími se koncentracemi oxidu chloričitého. Autoři dále zjistili, že oxid chloričitý denaturuje virové kapsidové proteiny reakcí s tyrosinovými, tryptofanovými a cysteinovými zbytky. Tyto aminokyseliny byly téměř úplně rozloženy do 2 minut po vystavení oxidu chloričitému.
Poliovirus je pozitivní virus pozitivní RNA RNA [25]. Ridenour a Ingerson [26] zjistili, že oxid chloričitý může inaktivovat virus obrny in vitro. Později Álvarez a O'Brien [16] rozšířili tuto práci tím, že ukázali, že léčba 1 ppm oxidu chloričitého in vitro vede k separaci RNA od kapsidy a také vede ke změnám v RNA.
Kromě výše zmíněných studií americká agentura pro ochranu životního prostředí (EPA), která 10. dubna 2020 uvedla oxid chloričitý jako dezinfekční prostředek registrovaný EPA k usmrcení viru SARS-CoV-2 , poskytuje další podporu
pro virucidní účinky chloru [27]. Web EPA naznačuje, že tento produkt je určen k povrchovému použití, nikoli k humánnímu použití.
Lidské studie účinků oxidu chloričitého na virus SARS-CoV-2 dosud nebyly provedeny. V současné době dva z autorů (Insignares a Bolano) provádějí první multicentrickou klinickou studii na světě o účinnosti orálního oxidu chloričitého u lidí v lidském těle19 (Identifikátor ClinicalTrials.gov: NCT04343742). Studie in vitro zjistila, že oxid chloričitý inaktivuje geneticky příbuzný virus SARS-CoV [28]. Bylo zjištěno, že koncentrace 2,19 mg / litr oxidu chloričitého způsobí úplnou inaktivaci SARS-Co-V v odpadních vodách. Pobočka naší skupiny je v procesu provádění in vitro vyšetřování působení oxidu chloričitého na SARS-CoV-2 v Indii a máme v procesu publikování zprávy o simulaci mechanismu působení chlordioxidu v SARS-Co-V-2 metodou in silico prováděnou v Japonsku.
V Ekvádoru (Aememi. Chlordioxid: účinná terapie pro léčbu covid 19; 51) Byla provedena předběžná studie s podáváním orálního oxidu chloričitého u 104 pacientů s covid19, kteří měli různé profily z hlediska věku, pohlaví a závažnosti onemocnění, menšina diagnostikována testováním a většina screeningem podle typických příznaků nemoci. Z tohoto důvodu byla data spravována pomocí symptomatické skórovací stupnice, přičemž 10 je maximální vnímání a 0 je minimum symptomu: horečka, zimnice, bolest svalů, suchý kašel, bolest hlavy, bolest zad, dušnost, zvracení, průjem. , bolest v krku, ztráta čichu, ztráta chuti, špatná chuť k jídlu.
Oxid chloričitý v koncentraci 3000 ppm byl doporučen v dávce 10 cm20 zředěné v jednom litru vody, užívané po celý den, rozdělené do XNUMX denních dávek, v dávkách každou hodinu a půl po dobu XNUMX dnů.
Výsledky byly distribuovány podle příznaků po prvním, druhém, třetím a čtvrtém dni léčby. Byly rozděleny na segmenty mezi muži a ženami a byly rovněž prezentovány společné výsledky.
Následující tabulky ukazují příznaky a v prvním a posledním grafu chování ve vztahu k symptomatologické škále mezi prvním a čtvrtým dnem požití oxidu chloričitého.
Tabulka 1: Výsledek oxidu chloričitého 1. den jeho podání
Tabulka 2: Výsledek oxidu chloričitého 4. den jeho podání
Z této předběžné studie lze vyvodit následující závěry: Chlordioxid je rozhodně neškodný - vůbec netoxický - v doporučených a požitých dávkách a všechny počáteční příznaky se začaly snižovat od prvního dne léčby, přičemž pokles je zcela evidentní Čtvrtého dne. Konkrétně se dramaticky snížily příznaky nejvíce svědčící o probíhající infekci, jako je horečka, zimnice, bolesti hlavy, bolest v krku, ztráta chuti k jídlu a ztráta chuťových a čichových smyslů. Další příznaky, jako je bolest svalů a kašel, zůstaly poněkud běžné, protože po ukončení nemoci mají tendenci zůstat zbytkové déle.
Materiály a metody:
Za účelem hledání referenčních informací použitých v tomto článku byly webové vyhledávače zkontrolovány pomocí kritérií MesH v souladu se strategií vyhledávání uvedenou v následujících řádcích v období od ledna do dubna 2020, přičemž byly nalezeny následující výsledky: 1. PubMed (Medline): 4 reference, 2. LILACS: 18 referencí, 3.
Cochrane Library: 56 referencí, 4. Věda: 1.168 referencí, 5. Scielo: 61 referencí, 6. MedScape: 19 referencí pro celkem 1.326 vědeckých publikací, jejichž obsah se týkal použití oxidu chloričitého v různých aplikacích a mechanismu působení oxidu chloričitého na viry sars-cov a sars-cov2.
Nakonec jsme zkontrolovali registry na www.clinicaltrials.gov a registry WHO International Clinical Trials Registry Platform (ICTRP), abychom identifikovali probíhající nebo nepublikované klinické studie.
Strategie vyhledávání:
„Chlordioxid“ NEBO „Protokol o chlordioxidu“ NEBO Chlordioxid A virus; Chlordioxid Y SAR-COV-2; NEBO „Léková léčba COVID-19“ NEBO „špičkový glykoprotein, virus COVID-19„ NEBO “těžký akutní respirační syndrom koronavirus 2„ NEBO „COVID-19“ NEBO „2019-
nCoV "O" SARS-CoV-2 "O" 2019 nový koronavirus "NEBO" onemocnění koronaviru 2019 "O (pneumonie).
Z výsledků vyhledávání jsme vybrali ty, které odkazovaly na virucidní působení oxidu chloričitého na různé mikroorganismy, zejména na viry a v nich SARS-CoV-2 nebo SARS-CoV.
Rovněž přezkoumáváme studie provedené na působení oxidu chloričitého na aminokyseliny, zejména ty, které jsou součástí virových kapsidů. Ze zjištění zdůrazňujeme, že v roce 1986 Noss et al. prokázali, že inaktivace bakteriálního viru (bakteriofága) f2 ClO2 [29] byla způsobena jeho reakcemi s proteiny virové kapsidy. Dále zjistili, že tři aminokyseliny virového proteinu [29], jmenovitě cystein, tyrosin a tryptofan, mohou rychle reagovat s ClO2. V roce 1987 Tan a další testovali reaktivitu ClO2 na 21 volných aminokyselinách [30]. ClO2 reagoval pouze se šesti aminokyselinami rozpuštěnými v 0,1 M pufru fosforečnanu sodného při pH 6,0. Reakce s cysteinem, tryptofanem a tyrosinem byla příliš rychlá na to, aby ji mohla jeho technika následovat.
Reaktivita tří rychle reagujících aminokyselin (cysteinu [31], tyrosinu [32] a tryptofanu [33) byla studována v laboratoři v letech 2005 až 2008 a bylo zjištěno, že cystein má nejvyšší reaktivitu mezi těmito aminokyselinami.
V roce 2007 Ogata [34] zjistil, že antimikrobiální aktivita ClO2 je založena na denaturaci určitých proteinů, což je způsobeno hlavně oxidační modifikací zbytků tryptofanu a tyrosinu dvou modelových proteinů (hovězí sérový albumin a glukóza - 6-fosfátdehydrogenáza) používané při jejich experimentech. V roce 2012 to byl opět Ogata, kdo prokázal [35], že inaktivace viru chřipky pomocí ClO2 byla způsobena oxidací tryptofanového zbytku (W153) na hemaglutinin (protein z virové špičky), čímž potlačil jeho schopnost vázat se na přijímače ..
V této souvislosti je zajímavé poznamenat, že spike protein nového koronaviru SARS_CoV-2 obsahuje 54 tyrosinových zbytků, 12 tryptofanu a 40 cysteinu [36].
Pokud předpokládáme, že ve vodném roztoku jsou všechny tyto aminokyselinové zbytky schopné reagovat s ClO2 i s volnými aminokyselinami, může být inaktivace viru extrémně rychlá i v roztoku 0,1 mg / l ClO2.
Na druhou stranu jsme vybrali články, které popisují působení SARS-CoV-2 v buňkách, v jeho interakci s ACE2, a zejména jsme zkoumali videa v rozšířené realitě nebo simulační videa založená na Silico, pro trojrozměrné znázornění webů akce jako videa, ve kterých jsou mimo jiné manipulovány spikulární protein a receptor ACE2 (37) pomocí softwaru pro rozšířenou realitu ChimeraX (UCSF). (38), (39), (40), (41), (42), (43), (44).
Stejným způsobem jsme přezkoumali strukturu virové špičky a na základě výzkumu od Daniel Wrapp a Jason S. McLellan z University of Texas.
Trojrozměrný obraz spikulárního S glykoproteinu beta-koronaviru SARS-CoV-2 byl pozorován elektronovou kryomikroskopií v rekordním čase. Díky tomuto obrazu s rozlišením 3,5 Á je potvrzeno, že tento protein S je navázán na protein hACE2 lidských buněk s vyšší afinitou než afinita k koronaviru SARS-CoV. Protein S je terčem protilátek, které nás imunizují. Jeho 3D struktura umožňuje pochopit, proč publikované monoklonální protilátky proti SARS-CoV nejsou účinné proti SARS-CoV-2. Nepochybně to pomůže urychlit vývoj vakcín a terapií proti infekci COVID-19. (Čtyři pět),
V těchto videích simulace a virtuální reality je pozorováno, že protein S je trimer složený ze tří peptidů, každý se dvěma podjednotkami S1 a S2. Podjednotka S1 funguje jako závěs se dvěma konformacemi zvanými „dolů“ (RBD dolů) a „nahoru“ (RBD nahoru). Zobrazování elektronovou kryomikroskopií ukazuje, že pouze jeden z peptidů je ve stavu „nahoru“, zatímco další dva jsou ve stavu „dolů“. Vazba na buněčný receptor nastává v "upstream" konfiguraci. Po navázání jsou tři proteinové S peptidy štěpeny v místě S1 / S2; druhé štěpení pak nastává v bodě S2 'a rozkládá klíčový fúzní peptid (FP) na spoji mezi membránami.
Diskuse
Spikulární protein (S) je transmembránový trimerní protein typu I s 1.160 až
1.400 1 aminokyselin, v závislosti na typu koronaviru. Tento protein tvoří koronavirovou korónu; Skládá se ze tří opakujících se peptidů a je vysoce glykosylovaný, což usnadňuje jeho vazbu na bílkoviny a cukry. Každý peptid je tvořen dvěma doménami zvanými S2 a S2. U beta koronavirů, jako je SARS-CoV-1, dochází ke štěpení podjednotek S2 a SXNUMX během fúze mezi membránami.
Doména S1 má zase dvě subdomény, jednu N-koncovou (NTD), která končí aminokyselinou, která má volnou aminoskupinu (-NH2), a druhou C-koncovou (CTD), která končí karboxylovou skupinou ( -COOH); oba se vážou na receptor ACE2 hostitelské buňky, pak jsou doménami vázajícími receptor (RBD). Doména S2 je typu C-terminální a je vysoce konzervativní mezi všemi koronaviry, které se mnohem více liší v podjednotce S1. Doména S2 obsahuje dvě oblasti, HR1 a HR2, ve kterých se skupiny sedmi aminokyselin (nazývaných heptidy) opakují ve formě abcdefg, které obsahují hydrofobní zbytky ad a d, které se účastní fúze mezi membránami. Domény HR1 a HR2 jsou terapeutickými cíli, protože jsou známy léky, které inhibují jejich účinek, zabraňují nebo brání fúzi.
Infekce epiteliálních buněk dýchacího traktu je řízena S proteinem viru. V obecných krocích fúzního procesu nejprve doména S1 rozpoznává a váže se na receptor hostitelské buňky. Zadruhé existuje první štěpení v doménách S1 a S2 a druhé štěpení v bodě S2 '; druhý umožňuje aktivaci fúzního peptidu (FP), který spojuje membrány hostitele a viru (tato fáze se nazývá mezistupeň fúze nebo mezistupeň fúze). A za třetí, oblast mezi HR1 a HR2 předělá (záhyby), čímž vznikne heptamer (6-HB), který spojuje obě membrány a umožňuje vstup viru. S protein koronavirů je klíčový při vývoji vakcín (antigeny, které indukují imunitní odpověď na přítomnost domény S1) a při vývoji antivirotik (inhibitory některých fází fúze mezi membránami, které normálně napadají specifické oblasti doména S2). Znalost trojrozměrné struktury proteinu S je nezbytná pro boj s epidemií COVID-19.
Sekvence proteinu S SARS-CoV-2 se shoduje 98% s proteinem S koronaviru Bat-RaTG13, s velkým rozdílem, že má čtyři RRAR aminokyseliny (arginin-arginin-alanin-arginin) místo pouze jedné arginin (R). Dále se liší v 29 zbytcích, z nichž 17 je v oblasti RBD. Porovnání provedené mezi 61 úplnými genomy SARS-CoV-2 dostupnými v GISAID (Global Initiative to Share All Influenza Data) ukazuje, že mezi všemi je pouze 9 různých aminokyselin; a všechny tyto varianty se nacházejí na velmi dobře zachovaných místech, což podle všeho neovlivňuje letalitu koronaviru.
Nejprve bylo možné charakterizovat 3D strukturu konkrétního S glykoproteinu koronaviru SARS-CoV-2 a jeho vazebné domény pro receptor RBD. Pak receptor hostitelské buňky, lidský enzym konvertující angiotensin hACE2. Dalším krokem pro vědce bylo stanovení struktury komplexu SARS-CoV-2 RBD / hACE2, které byly získány rentgenovou krystalografií a dosáhly rozlišení 2,45 Á a 2,68 Á. Mezi nálezy bylo zjištěno, že velmi jemné strukturální změny vysvětlují vyšší infekčnost a patogenezi SARS-CoV-2 (COVID-19) ve srovnání s SARS-CoV (SARS);
Tato zjištění mají velký význam pro vývoj léků pro boj s COVID
19. Byly provedeny rekonstrukce in silico (pomocí teoretických modelů s využitím počítačů), ale pozorování skutečné krystalografické struktury pomocí rentgenové difrakce je zásadní. Jak bylo uvedeno na začátku, autoři jsou v procesu publikování japonské studie in silico, kterou provedli o mechanismu působení oxidu chloričitého na hrot SARS-CoV-2 a hemoglobin.
Prvním problémem, který vyvstává v procesu výzkumu, je, jak vytvořit komplex SARS-CoV-2 RBD / hACE2 s dostatečnou stabilitou pro jeho pozorování; Klíčové byly předchozí zkušenosti s tvorbou komplexu SARS-CoV RBD / hACE2 (doložené v roce 2005), ve kterém se k posílení vazby komplexu používá solný můstek mezi Arg426 z RBD a Glu329 z hACE2. Velmi důležitým pozorováním je, že cystein na pozicích Cys336-Cys361, Cys379-Cys432 a Cys391-Cys525 stabilizuje pět beta listů (β1, β2, β3, β4 a β7) a Cys480-
Cys488 je klíčem ve spojení mezi hřebenem SARS-CoV-2 RBM a N-koncová spirála hACE2 (46), (47), (48).
Při simulaci působení oxidu na tyto aminokyseliny ( Cys ), je snadné pochopit báječný přímý virucidní účinek oxidu uhličitého na viry, zejména na SARS-CoV-2.
Odhalený obraz má zničující účinek oxidu uhličitého na virus, který ho degraduje a denaturuje.
Porovnání komplexů SARS-CoV RBD / hACE2 a SARS-CoV-2 RBD / hACE2 poskytuje přehled o tom, proč je COVID-19 infekčnější než SARS-CoV.
SARS-CoV-2 RBM tvoří větší a více kontaktované spojovací rozhraní s hACE2 než SARS-CoV RBM; Solný můstek mezi SARS-CoV RBD a hACE2 je slabší než mezi SARS-CoV-2 RBD a hACE2. Krystalová struktura komplexu také obsahuje glukany spojené se čtyřmi místy hACE2 a místem RBD. Glukan spojený s Asn90 z hACE2 tvoří vodíkovou vazbu s Arg408 v jádru RBD; tato interakce je zachována mezi SARS-CoV-2 a SARS-CoV.
Strukturální rozdíly mezi RBM SARS-CoV-2 a SARSCoV jsou jemné, ale ovlivňují konformace smyček na hřebenech vázajících receptor. V obou RBM obsahuje jedna z hřebenových vazeb disulfidovou vazbu, která je kritická pro vazbu. SARS-CoV a bat-CoV Rs3367 obsahují motiv se třemi zbytky pro-pro-Křídlo v uvedené smyčce; ale v SARS-CoV-2 a bat-CoV RaTG13 ukazují motiv čtyř zbytků Gly-Val / Gln-Glu / Thr-Gly; proto se mění konformace smyčky, protože glyciny jsou pružnější. Tato změna zvýhodňuje vazbu RBD / hACE2. Kromě toho má hřeben kompaktnější konformaci díky vodíkovým vazbám Asn487 a Ala475 v SARS-CoV-2 RBM, čímž se smyčka obsahující Ala475 přibližuje k hACE2.
Kontakt hřebenu SARS-CoV-2 RBM s N-koncovou šroubovicí hACE2 je větší než u SARS-CoV RBM. Například N-koncový zbytek Ser19 hACE2 tvoří novou vodíkovou vazbu s páteří Ala475 SARS-CoV-2 RBM a Gln24 N-koncové šroubovice hACE2 také tvoří nový kontakt s SARS-CoV. -2 RBM. Ve srovnání s Leu472 ze SARS-CoV RBM ukazuje Phe486 ze SARS-CoV-2 RBM jiným směrem a tvoří hydrofobní oblast zahrnující Met82, Leu79 a 83 tyr z hACE2.
Srovnání s SARS-CoV RBM ukazuje, že tyto malé strukturální změny SARS-CoV-2 RBM jsou příznivější pro vazbu hACE2. Jsou to jemné rozdíly, ale z funkčního hlediska velmi relevantní. Byly odhaleny dvě kritická vazebná místa (virové hotspoty), kritický bod hotspot-31 na solném můstku Lys31 a Glu35 a hotspot 353 na jiném solném můstku mezi Lys353 a Asp38. Tyto dva solné můstky jsou slabé kvůli velké vzdálenosti v interakci, ale jsou uzavřeny v hydrofobním prostředí, které snižuje účinnou dielektrickou konstantu, jejich vazebná energie je vyšší.
Obr. 2 Trojrozměrná struktura SARS-CoV-2 Mpro ve dvou různých pohledech.
Linlin Zhang a kol. Science 2020; 368: 409-412
Copyright © 2020 Autoři, některá práva vyhrazena; výhradní držitel licence Americká asociace pro pokrok ve vědě. Žádný nárok na původní díla vlády USA.
Distribuováno pod licencí Creative Commons Attribution NonCommercial License 4.0 (CC BY-NC).
K potvrzení těchto strukturálních závěrů byly provedeny biochemické studie afinity vazby RBD / hACE2 po zavedení určitých mutací v SARS-CoV-2 RBD. Tyto mutace naznačují, že koronavirus netopýra RaTG13 by mohl infikovat člověka (podporuje zoonotický původ epidemie). Kromě toho RBM SARS-CoV-2 a bat-COV RaTG13 obsahují podobný motiv čtyř zbytků v hřebenu vázajícím ACE2, což podporuje, že jeden se vyvinul z druhého. Kromě toho, aby se zlepšilo rozpoznávání hACE2, vykazuje SARS-CoV-2 dvě změny ve zbytcích L486F a Y493Q RaTG13, které podle všeho usnadnily přenos SARS-CoV-2 z netopýra na člověka. Proto nemusí být mezi netopýrem a člověkem v COVID-19 přechodný hostitel, na rozdíl od toho, co se stalo se SARS a MERS. Samozřejmě zatím není možné vyloučit existenci prostředníka, kterým by mohl být pangolin nebo jiné divoké zvíře prodávané na trhu Wuhan; V případě pangolinu je třeba za účelem objasnění problému sekvenovat více genomů pangolinového koronaviru, ale zatím mezi nimi byla prokázána genomická podobnost více než 99%. (49)
Výsledky a závěry:
Špička SAR-CoV-2 je silně glykosylovaná a předpokládá se, že glykosylace hraje důležitou roli při detekci viru proti našemu vlastnímu imunitnímu systému. Část alfa šroubovic vede po délce hrotového proteinu. Většinou se na tomto konci koncentrují beta pláty, což je místo, kde se spike protein spojuje s buňkou a infikuje ji. Zajímavostí je, že šroubovice jsou tvořeny aminokyselinami citlivými na působení oxidu chloričitého (na Cystein).
Spike protein je ve skutečnosti tvořen třemi propletenými řetězci, které mají identické aminokyselinové sekvence, každý z těchto řetězců se nazývá protomer. Protomery však nemají identické trojrozměrné konformace.
Rozdíl v konformaci v protomerech můžeme vidět zkoumáním části špičkového proteinu, která je kritická pro životní cyklus viru, doménu vázající receptor nebo RBD. RBD je místo, kde se virus váže na enzym na povrchu hostitelských buněk, což mu umožňuje fúzi s buňkou a transport virového genetického materiálu uvnitř. Dva z těchto RBD jsou ve struktuře v nižší konformaci. Jeden z těchto RBD se však otočí. Tato „nahoru“ konformace je vyšší energie, připravená vázat se na buněčný receptor a vést k fúzi. Předpokládá se, že když se protein špice váže, každá z těchto RBD se změní na tuto méně stabilní konformaci.
Naše vlastní enzymy, ty, které rozbíjejí peptidové vazby zvané proteázy, mohou štěpit protein špice na specifických místech a dochází ke konformačním změnám ve fúzi proteinu špice. RBD se váže na ACE2, což je receptor na povrchu naší buňky, ke kterému se koronavirus váže a způsobuje fúzi. Tyto struktury jsou také silně glykosylované. Pokud skryjeme cukry, abychom vytvořili model pro pochopení interakce RBD-ACE2, a dáme tam oxid chloričitý působící na aminokyseliny, můžeme se zaměřit na některé slabé interakce, které drží RBD a ACE2 pohromadě.
Například máme rozsáhlou síť vodíkových vazeb na rozhraní RBD-ACE2, která napadá dva zbytky tyrosinu ( Tyr-489 a Tyr-83 ). Tento postranní řetězec tyrosinu je také vázán na karbonylový vodík asparaginového postranního řetězce (Asn-487), který se prostřednictvím svého atomu vodíku NH váže na glutaminkarbonyl v ACE2 (gln- 24). Oxid chloričitý, který postulujeme, tyto zbytky oxiduje Tyr-489 a Tyr-83, mezi jinými, s nimiž je rozhraní RBD-ACE2 denaturováno a virus se již nemůže vázat, nebo je oxidován. Oxid navíc také oxiduje prolin přítomný v ACE2, který dokončuje oxidaci a deformaci ACE2.
Při pohybu po alfa šroubovici ACE2 máme glutamátový postranní řetězec, který deprotonuje při pH 7,4, a lysinový zbytek, který při tomto pH nese pozitivní náboj.
Pokud se virus spojí, virový genetický materiál se uvolní do buňky. V případě koronavirů tento kousek RNA putuje do ribozomů naší buňky a sekvestruje ji, aby vytvořil své vlastní virové proteiny. Jedna zajímavá věc je, že tato virová RNA je schopná změnit třípísmenný rámec RNA bází, který je čten ribozomem; To v podstatě duplikuje peptidovou sekvenci, kterou lze vyrobit z virové repliky pomocí našich ribozomů, proteinů, které virus potřebuje, aby shromáždil další své vlastní kopie, které se nakonec uvolní z buňky a infikují ostatní. V tomto procesu se přenáší důležitý protein a je to hlavní proteáza, která štěpí řetězec virových polypeptidů ve funkčních proteinech nezbytných pro sestavení nových virů. Toto je další terapeutický cíl, pokud je jedinec již infikován virem, protože lze podávat léčivo, které se váže na proteázu a brání jí ve vytváření zralých virových proteinů, takže lze zastavit replikaci viru.
Tato hlavní proteáza SAR-CoV-2 je dimer složený ze dvou identických proteinových řetězců a musí se dimerizovat, aby se stala funkční proteázou. Existuje mnoho interakcí aminokyselin na rozhraní dimeru, ale vědci, kteří publikovali tuto krystalovou strukturu, naznačují, že iontové interakce mezi postranním řetězcem tohoto argininového zbytku
a tento glutamát řídí dimerizaci. Tato interakce je přítomna na obou stranách dimeru. Při pohybu směrem k aktivnímu místu jsou důležité zbytky tvořeny cysteinovým řetězcem (Cys-145) a histidin (His-41).
Tento enzym je cysteinová proteáza, takže k napadení amidové vazby peptidu využívá nukleofilní cystein. V tomto mechanismu dusík histidinu popadne proton postranního řetězce cysteinu, což mu umožní napadnout peptidovou vazbu.
Peptidová vazba se rozbije a poté může vstoupit molekula vody, čímž se uvolní cystein, takže proteáza může rozbít další polypeptidový řetězec. Enzymy obsahující nukleofilní katalytické zbytky jsou vynikajícími cíli pro nevratnou inhibici. Protože obsahují postranní řetězec nukleofilních aminokyselin - v tomto případě cystein - mohou být navrženy inhibitory, které se vážou na enzym trvalou kovalentní vazbou. Působí zde také oxid chloričitý, který oxiduje cystein, takže je tento mechanismus blokován. Na rozdíl od reverzibilních inhibitorů, které se mohou pohybovat dovnitř a ven z aktivního místa, tyto nevratné inhibitory - nazývané také inhibitory sebevraždy - trvale inaktivují protein, zabraňují mu v práci a vytvářejí více virových proteinů. Tito vědci dříve navrhli inhibitory pro jiné proteázy koronaviru. Byli schopni vázat jeden z těchto inhibitorů na aktivní místo proteázy SARS-CoV-2. Serin je zjevně zapojen do kovalentní vazby s ketonem inhibitoru. Nyní jde o reverzibilní reakci, takže nejde o inhibitor sebevraždy sám o sobě, s přítomností cysteinu kovalentně vázaného na tomto aktivním místě. Tady je tento karbonyl z inhibitoru vodíkovou vazbou se třemi NH skupinami na proteinu. Proteázový katalytický histidin se také podílí na vodíkové vazbě. Tento kruh je zapojen do rozsáhlé sítě vodíkových vazeb, která zahrnuje jak páteřní atomy struktury, tak postranní řetězce. Znalost kontaktů, které vytváří inhibitor s enzymem, umožňuje chemikům a biologům uvažovat o interakcích a potenciálně navrhnout ještě lepší inhibitory. Kromě enzymatické inhibice, která by byla účinnou strategií pro kontrolu viru, vzhled oxidu chloričitého jako látky, která neinhibuje, ale že
„Rozpouští se“ oxidací klíčových struktur viru, umožňuje akci s téměř molekulární „chirurgickou“ přesností, a proto je mnohem účinnější jako kontrolní mechanismus virové infekce.
Závěrem, pokud víme, jaká je dispozice míst, kde se nacházejí aminokyseliny citlivé na oxidaci oxidem chloričitým, je třeba zdůraznit, že špičkový protein koronaviru SARS-CoV-2 obsahuje 54 tyrosinu, 12 tryptofanu, 40 zbytků cystein, kromě prolin, který je zase přítomen ve struktuře ACE2 ve spojení s RBD, umožňuje promítat působení oxidu na virovou špičku. Nejlepší pedagogický příklad je, že hrot je klíč a ACE2 zámek. Deformace klíče oxidací oxidu v aminokyselinách cystein, tyrosin, tryptofan a prolin, šroubovicových řetězců a oxidace zámku (ACE2) zabraňují nejen spojení, ale také rozpouští existující spojení mezi špičkou (RBD) a ACE, velmi rychle, což, jak se zdá, vysvětluje rychlost klinického působení použití oxidu chloričitého u pacientů s COVID19.
Rozpoznávání:
Chtěli bychom vám poděkovat za vaši spolupráci a příspěvky k lékaři
Mitchell B.Liester, MD (3)
Lékařská fakulta University of Colorado Colorado Springs Branch
Památník, CO 80132
Tato emailová adresa je chráněna před spamboty. Spamboty, abyste ji viděli, povolte JavaScript.
488-0024 (kancelář) (719) 338-5719 (cel)
reference:
[1] Guo YR, Cao QD, Hong ZS a kol. Původ, přenos a klinické terapie v epidemii Coronavirus Disease (COVID-2019) z roku 19: Aktualizace stavu. Mil Med Res 2020; 7 (11): 1-10.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7068984/.
2. Oyarzún Gómez, Manuel Dr., Translational Medicine: stříbrný most mezi základními vědami a klinickou medicínou. Rev. chil. Vydechl jsem. sv. 33 č. 2 Santiago jun. 2017.
3.https://www.lenntech.es/procesos/desinfeccion/quimica/desinfectantes-diocopio-de-cloro.htm
4-4Ison A, Odeh IN, Margerum DW (2006) Kinetika a oxidační mechanismy chlordioxidu a cysteinchloritu a glutathionu. Inorg Chem 45: 8768-8775. Doi: 10.1021 / ic0609554. PubMed: 17029389.
Stewart DJ, Napolitano MJ, Bakhmutova-Albert EV, Margerum DW (2008) Kinetika a mechanismy oxidace tryptofanu chlordioxidem. Inorg Chem 47: 1639-1647. doi: 10.1021 / ic701761p.PubMed: 18254588.)
Napolitano MJ, Green BJ, Nicoson JS, Margerum DW (2005) Oxidations of tyrosine, N-acetyltyrosine and Dopa with chlordioxid. Chem Res Toxicol 18: 501-508. doi: 10.1021 / tx049697i. PubMed: 15777090).
Tan, HK, Wheeler, WB, Wei, CI, Reakce oxidu chloričitého s aminokyselinami a peptidy, Mutation Research, 188: 259-266, 1987.
8-Loginova IV, Rubtsova SA, Kuchin AV (2008) Oxidace chlordioxidu methioninu a derivátů cysteinu na sulfoxid. Chem NatCompd 44: 752-754. doi: 10.1007 / s10600-009- 9182.
9 Gray, Nicholas F. Chlordioxid (kapitola 32) v Mikrobiologii chorob přenášených vodou (2. vydání). 2014. Londýn: Elsevier.
Mladý RO. Oxid chloričitý (ClO2) jako netoxické antimikrobiální činidlo pro viry, bakterie a kvasinky (Candida albicans). Vaccine Int J Vaccines 2016; 2 (6): 00052.
Ogata N, Shibata T. Ochranný účinek plynu s nízkou koncentrací oxidu chloričitého proti infekci virem chřipky A. J Gen Virol 2008; 89 (1): 60-67. (40)
[12] Schijven J, Teunis P, Suylen T, Ketelaars H, Hornstra L, Rutjes S. QMRA adenoviru v pitné vodě v úpravně pitné vody s použitím UV dezinfekce a oxidu chloričitého. Vodní výzkum. 2019; 158: 34-45.
[13] Harakeh M, Butler M. Inaktivace lidského rotaviru, SA11 a dalších enterických virů v odpadních vodách dezinfekčními prostředky. Epidemiol Infect 1984; 93 (1): 157-63.
[14] Zhong Q, Carratalà A, Ossola R, Bachmann V, Kohn T. Zkřížená rezistence ekoviru 11 odolného vůči UV záření nebo chlordioxidu vůči jiným dezinfekčním prostředkům. Frontální mikrobiologie 2017; 8: 1928.
[15] Noss CI, Hauchman FS, Olivieri VP. Reaktivita s chlordioxidem s bílkovinami. Water Res 1986; 20 (3): 351-6.
[16] Álvarez ME, O'Brien RT. Mechanismy inaktivace polioviru chlordioxidem a jodem. Apl. Panování. Microbiol 1982; 44 (5): 1064-71.
[17] Tankeshwar A. Virus chřipky: úvod, klasifikace a struktura.https://microbeonline.com/influenza-flu-virus-structure-classification/. 19. dubna 2020;
Citováno 4. dubna 2020.
[18] Americké ministerstvo práce, správa bezpečnosti a ochrany zdraví při práci. Chlordioxid.https://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id202/id202bkr.html Konzultováno 19
Duben 2020.
[19] Ogata N. Denaturace proteinů oxidem chloričitým: oxidační modifikace zbytků tryptofanu a tyrosinu. Biochem 2007; 46 (16): 4898-911.
[20] Ogata N. Inaktivace hemaglutininu chřipkového viru oxidem chloričitým: oxidace konzervovaného zbytku tryptofanu 153 na vazebném místě receptoru. J Gen Virol 2012; 93 (12): 2558-63.
[21] Nemerow GR, Stewart PL, Reddy VS. Struktura lidského adenoviru. Curr Opin Virol 2012; 2 (2): 115-21.
[22] Pesavento JB, Crawford SE, Estes MK, Prasad BV. Rotavirové proteiny: struktura a montáž. In Reovirus: Entry, Assembly, and Morphogenesis 2006 (str. 189-219). Springer, Berlín, Heidelberg.
[23] Dennehy PH. Rotavirová infekce: nemoc z minulosti? Infect Dis Clin 2015; 29 (4): 617-35.
[24) Chen YS, Vaughn JM. Inaktivace oxidu chloričitého u lidských a opičích rotavirů. Appl Environ Microbiol 1990; 56 (5): 1363-6.
[25] Hogle JM. Vstup do buněk polioviru: společná strukturní témata v cestě vstupu virových buněk. Annu Rev Microbiol 2002; 56 (1): 677-702. (54)
[26] Ridenour GM, Ingols RS. Inaktivace viru obrny „volným“ chlórem. Am J Public Health Nations Health 1946; 36 (6): 639-44.
[27] Agentura pro ochranu životního prostředí Spojených států. Seznam N: Dezinfekční prostředky pro použití proti SARS-CoV-2.https://www.epa.gov/pesticide-registration/list-n-disinfectants-use-
proti-sars-cov-216. dubna 2020; Citováno 19. dubna 2020.
[28] Wang XW, Li JS, Jin M et al. Studie rezistence na těžký akutní koronavirus spojený s respiračním syndromem. J Virol Methods 2005; 126 (1-2): 171-7.
(29). Noss CI, Hauchman FS, Olivieri VP. Reaktivita s chlordioxidem s bílkovinami. Water Res. 1986; 20 (3): 351–6,https://doi.org/10.1016/0043-1354(86)90083-7.
(30). Tan H, Wheeler BW, Wei C. Reakce oxidu chloričitého s aminokyselinami a peptidy: studie kinetiky a mutagenity. Mutat Res 1987; 188 (4): 259–66, https:
//doi.org/10.1016/0165-1218 (87) 90002-4.
(31). Ison A, Odeh IN, Margerum DW. Kinetika a oxidační mechanismy chlordioxidu a cystein chloritanu a glutathionu. Inorg Chem 2006; 45: 8768–75,https://doi.org/10.1021/ic0609554.
(32). Napolitano MJ, Green BJ, Nicoson JS, Margerum DW. Oxidace chloroxidu tyrosinu, N-acetyltyrosinu a Dopa. Chem Res Toxicol 2005; 18: 501–8,https://doi.org/10.1021/tx049697i
(33). Stewart DJ, Napolitano MJ, Bakhmutova-Albert EV, Margerum DW. Kinetika a mechanismy oxidace chlordioxidu tryptofanu. Inorg Chem 2008; 47: 1639–47,https://doi.org/10.1021/ic701761p.
(34. 2007). Ogata N. Denaturace proteinů oxidem chloričitým: oxidační modifikace zbytků tryptofanu a tyrosinu. Biochemistry 46; 4898: 911–10.1021, https://doi.org/061827/biXNUMXu.
(35). Ogata N. Inaktivace hemaglutininu viru chřipky oxidem chloričitým: oxidace konzervovaného zbytku tryptofanu 153 na vazebném místě receptoru. J Gen Virol 2012; 93: 2558–63, https://doi.org/10.1099/vir.0.044263-0.
(36). Tao Y, Queen K, Paden CR, Zhang J, Li Y, Uehara A a kol. Těžký akutní respirační syndrom koronavirus 2
_rank51 & RID5304U21XH016.
Tom Goddard, „How Coronaviruses Enter Cells“, YouTube, 03. února 2020, na základě článku Wenfei Song, Miao Gui, Ye Xiang, „Cryo-EM Struktura komplexu SARS Coronavirus Peak Glycoprotein in Complex s hostitelskou buňkou receptoru
ACE2, »PLoS Pathogens, 14: e1007236 (13. srpna 2018), doi: https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1007236.), mezi ostatními .
Javier A. Jaimes, Nicole M. André, Gary R. Whittaker, «Strukturální modelování nového špičkového proteinu koronaviru (nCoV) z roku 2019 odhaluje proteolyticky citlivou aktivační smyčku jako charakteristický rys ve srovnání s SARS-CoV a související SARS - jako jsou koronaviry, »předtisk bioRxiv 942185 (18. února 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.10.942185 ,
Alba Grifoni, John Sidney, Alessandro Sette, „Candidate Targets for 2019 New Coronavirus (nCoV) Immune Responses: Predictions Based on Sequence Homology and Bioinformatics“, preprint bioRxiv 946087 (20. února 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.12.946087
Chunyun Sun, Long Chen, Liangzhi Xie, „SARS-CoV-2 a SARS-CoV Spike-RBD Srovnání struktury a vazby na receptory a možné důsledky ve vývoji neutralizujících protilátek a vakcín“, předtisk bioRxiv 951723 (20. února, 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.16.951723
Renhong Yan, Yuanyuan Zhang, Qiang Zhou, „Strukturální základ pro uznání 2019-nCoV lidským ACE2“, předtisk bioRxiv 956946 (20. února 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956946
Jun Lan, Jiwan Ge, Xinquan Wang, „Crystal Structure of the 2019-nCoV Peak Receptor Binding Domain Bound to the ACE2 Receptor“, předtisk bioRxiv 956235 (20. února 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956235
Linlin Zhang, Daizong Lin, Rolf Hilgenfeld, „Rentgenová struktura hlavní proteázy nového koronaviru SARS-CoV-2 umožňuje návrh inhibitorů α-ketoamidu“, předtisk bioRxiv 952879 (20. února 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952879
Alexandra C. Walls, Young-Jun Park, David Veesler, „Struktura, funkce a antigenicita špičkového glykoproteinu SARS-CoV-2,“ preprint bioRxiv 956581 (20. února 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956581
Daniel WrappUNO,*, Nianshuang wangUNO,*, Kizzmekia S. Corbettdos, Jason S. McLellanUNO,†
Kryo-EM struktura vrcholu 2019-nCoV v prefuzní konformaci, Science 13. března 2020: sv. 367, číslo 6483, str. 1260-1263 DOI: 10.1126 / science.abb2507
Jian Shang, Gang Ye,…, Fang Li, „Strukturní základ rozpoznávání receptorů pomocí SARS-CoV-2“, Nature (30. března 2020), doi: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2179 y
Jun Lan, Jiwan Ge,…, Xinquan Wang, „Struktura vazebné domény špičkového receptoru SARS-CoV-2 vázaného na receptor ACE2“, Nature (30. března 2020), doi: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2180-5.
Xiaoli Xiong, Kun Qu,…, John AG Briggs, „A closed and thermostable SARS-CoV-2 peak protein trimer“, Nature Structural & Molecular Biology (31. července 2020), doi: https://doi.org/10.1038/s41594-020-0478-5,
bioRxiv předtisk 152835 (17. června 2020), doi: https://doi.org/10.1101/2020.06.15.152835. [/]
Lam TTY a kol. Identifikace koronavirů souvisejících s SARS-CoV-2 u malajských luskounů. Příroda. 2020. DOI: 10.1038 / s41586-020-2169-0
Xóchitl Zambrano-Estrada, Carlos Domínguez-Sánchez, Marina Banuet-
Martínez, Fabiola Guerrero de la Rosa, Zobrazit profil ORCID Teresa García-Gasca, Luis Prieto- Valiente, Zobrazit profil ORCID Karina Acevedo-Whitehouse Hodnocení antivirového účinku
oxidu chloričitého (ClO2) s použitím modelu obratlovců naočkovaných ptačí koronavirem.
bioRxiv 2020.10.13.336768; doi: https://doi.org/10.1101/2020.10.13.336768.
(51) aememi. García, R. a kol. 2020; Předběžné výsledky užívání orálního oxidu chloričitého u pacientů s convid19. Přímá zpráva.
