क्लोरीन डाइऑक्साइड का उपयोग कर MRSA उन्मूलन
रोगाणुरोधी प्रतिरोधी संक्रमण (एएमआर) वर्तमान में अकेले यूरोप और अमेरिका में हर साल कम से कम 50.000 लोगों के जीवन का दावा करते हैं, और दुनिया के अन्य क्षेत्रों में कई सैकड़ों हजारों लोग मर जाते हैं। 15 यूरोपीय देशों में, रक्तप्रवाह में 10% से अधिक स्टैफिलोकोकस ऑरियस संक्रमण मेथिसिलिन-प्रतिरोधी उपभेदों (MRSA) के कारण होता है,
और इनमें से कई देश 50% के करीब प्रतिरोध दर दर्ज करते हैं। 1 इसके अलावा, जबकि एंटीबायोटिक प्रतिरोधी संक्रमणों की संख्या बढ़ रही है, नए एंटीबायोटिक दवाओं की संख्या घट रही है। 1,2 इसलिए, यह जरूरी है कि एडीआर के लिए नए और नए उपचारों की मांग की जाए, और यह इस शोध का आधार है: एमआरएसए को मिटाने के लिए प्राकृतिक पदार्थों का उपयोग करना, जो आगे प्रतिरोध पैदा नहीं करते हैं। इन विट्रो में प्रयुक्त क्लोरीन डाइऑक्साइड, इस शोध का हमारा मुख्य फोकस रहा है, क्योंकि यह परीक्षण किए गए अन्य प्राकृतिक पदार्थों की तुलना में सबसे प्रभावी था।
कीवर्ड: रोगाणुरोधी प्रतिरोधी उपभेदों, मेथिसिलिन प्रतिरोधी, स्टैफिलोकोकस ऑरियू,
विषाक्त शॉक सिंड्रोम, एरिथ्रोमाइसिन, क्लोरीन डाइऑक्साइड
संकेताक्षर: MRSA, मेथिसिलिन प्रतिरोधी स्टैफिलोकोकस ऑरियस; एएमआर। रोगाणुरोधी प्रतिरोधी; TSST-1, टॉक्सिन-1 टॉक्सिक शॉक सिंड्रोम; ClO 2, क्लोरीन डाइऑक्साइड, PVL, पैंटन-वेलेंटाइन ल्यूकोसिडिन; एमएसएसए, मेथिसिलिन-संवेदनशील सैफिलोकोकस ऑरियस
परिचय
अस्पतालों या आईसीयू में प्राप्त नोसोकोमियल संक्रमण अक्सर एंटीबायोटिक प्रतिरोधी बैक्टीरिया जैसे मेथिसिलिन प्रतिरोधी स्टैफिलोकोकस ऑरियस (एमआरएसए) के कारण होते हैं। एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति यह प्रतिरोध रुग्णता की उच्च दर, मृत्यु दर और स्वास्थ्य सुविधाओं की उच्च लागत के साथ है।
एमआरएसए क्या है?
स्टैफिलोकोकस ऑरियस एक ग्राम-पॉजिटिव नारियल है जो कैटेलेज और कोगुलेज + दोनों है। स्टैफिलोकोकस ऑरियस न्युट्रोफिल-मध्यस्थता मृत्यु से निपटने के लिए कई प्रतिरक्षा परिहार रणनीतियों को विकसित करने के लिए विकसित हुआ है, जिसमें न्यूट्रोफिल सक्रियण, संक्रमण की साइट पर प्रवास, बैक्टीरियल ऑप्सोनाइजेशन, फागोसाइटोसिस और बाद में न्यूट्रोफिल-मध्यस्थता विनाश शामिल हैं। ४० एस. ऑरियस तक प्रतिरक्षा-छिपाने वाले अणुओं को जाना जाता है, और इन लुप्त हो रहे प्रोटीनों के लिए नए कार्यों की पहचान की जा रही है।
वे अल्फा-टॉक्सिन, बीटा-टॉक्सिन, गामा-टॉक्सिन, डेल्टा-टॉक्सिन, एक्सफोलिएटिन, एंटरोटॉक्सिन, पैंटन-वेलेंटाइन ल्यूकोसिडिन (पीवीएल), और टॉक्सिक शॉक सिंड्रोम टॉक्सिन 1 (TSST-1) सहित विभिन्न प्रकार के विषाक्त पदार्थों का उत्पादन करते हैं; एंटरोटॉक्सिन और TSST-1 टॉक्सिक शॉक सिंड्रोम से जुड़े हैं; प्रगतिशील मल्टीफोकल ल्यूकोएन्सेफालोपैथी त्वचा और फेफड़ों के परिगलित संक्रमण से जुड़ा हुआ है और निमोनिया और ऑस्टियोमाइलाइटिस के लिए एक महत्वपूर्ण विषाणु कारक है। 3
एस. ऑरियस विषाणुजनित कारकों की एक विस्तृत श्रृंखला को व्यक्त करता है, जिनमें शामिल हैं:
विषाक्त पदार्थ (हेमोलिसिन और ल्यूकोसिडिन), प्रतिरक्षाविहीन सतह कारक (जैसे, कैप्सूल और प्रोटीन ए), और एंजाइम जो ऊतक आक्रमण को बढ़ावा देते हैं (जैसे, हाइलूरोनिडेस)। 3
MRSA द्वारा औपनिवेशीकरण से संक्रमण का खतरा बढ़ जाता है, और संक्रमित उपभेद ५०-८०% मामलों में उपनिवेशी उपभेदों के साथ मेल खाते हैं। 50
त्वचा के संपर्क में लगभग कुछ भी एमआरएसए के संचरण में एक फोमाइट के रूप में काम कर सकता है, कोट और सफेद संबंधों से लेकर पेन और सेल फोन तक।
उपनिवेशवाद लंबे समय तक बना रह सकता है। MRSA घरेलू वातावरण में भी बना रह सकता है, उन्मूलन के प्रयासों को जटिल बना सकता है। 6
उसी समय, उपनिवेशीकरण स्थिर नहीं होता है, क्योंकि उपभेदों को विकसित होने और यहां तक कि एक ही मेजबान के भीतर बदलने के लिए पाया गया है। 7
दवा प्रतिरोधक क्षमता
MRSA ने कई स्वतंत्र अवसरों पर MGE ले जाने वाले एंटीबायोटिक प्रतिरोध जीन का अधिग्रहण किया है। पेनिसिलिन (blaZ), ट्राइमेथोप्रिम (dfrA और dfrK), एरिथ्रोमाइसिन (ermC), क्लिंडामाइसिन (संवैधानिक रूप से व्यक्त ermC), और टेट्रासाइक्लिन (tetK और tetL) के प्रतिरोध को MRSA दोनों में सम्मिलन अनुक्रम, ट्रांसपोज़न और कभी-कभी प्लास्मिड में पहचाना गया है। मेथिसिलिन अतिसंवेदनशील स्टैफिलोकोकस ऑरियस (MSSA)। 8 संभवतः अस्पताल की स्थापना के भीतर मजबूत चयनात्मक दबाव को दर्शाते हुए, एंटीबायोटिक प्रतिरोध अक्सर आनुवंशिक रूप से HA-MRSA उपभेदों के बीच कीटाणुनाशक या भारी धातुओं (जैसे, चतुर्धातुक अमोनिया यौगिकों, पारा, या कैडमियम) के प्रतिरोध से संबंधित होता है। 9
क्लोरीन डाइऑक्साइड क्या है?
अब व्यावसायिक रूप से महत्वपूर्ण यौगिक क्लोरीन डाइऑक्साइड (ClO2) हाल की खोज नहीं है। 1811 में पहली बार हम्फ्री डेवी द्वारा पोटेशियम क्लोरेट के साथ हाइड्रोक्लोरिक एसिड की प्रतिक्रिया से गैस का उत्पादन किया गया था। इसने "यूक्लोरिन" का उत्पादन किया, जैसा कि तब कहा जाता था। 1834 में क्षारीय लुगदी विरंजन का आविष्कार करने वाले वाट और बर्गेस ने अपने पहले पेटेंट में यूक्लोरीन को विरंजन एजेंट के रूप में उल्लेख किया था। 10,11
क्लोरीन डाइऑक्साइड को बाद में ब्लीच और बाद में एक कीटाणुनाशक के रूप में जाना जाने लगा। खनिज क्लोरेट से ClO2 का उत्पादन जटिल है, हालांकि, और गैस विस्फोटक है इसलिए यह नहीं हो सकता
1940 में ओलिन कॉर्पोरेशन द्वारा सोडियम क्लोराइट पाउडर के उत्पादन तक व्यावहारिक रूप से आसानी से उपयोग किया जा सकता है।
क्लोराइट नमक से जरूरत पड़ने पर क्लोरीन डाइऑक्साइड अब छोड़ा जा सकता है। नगरपालिका जल आपूर्ति में, यह आमतौर पर क्लोराइट के घोल में क्लोरीन मिलाकर और प्रयोगशाला में क्लोराइट के घोल में एक एसिड डालकर किया जाता है। एलीगर ने १९७८, १०.११ में दिखाया कि
व्यक्तिगत उपयोगकर्ता द्वारा ClO 2 को शीर्ष रूप से लागू किया जा सकता है।
ClO 2 एक छोटा अणु है जिसका आणविक भार 67,46 है और यह एक स्थिर मूलक बनाता है। 12 ClO 2 एक ऑक्सीडेंट है, जो एक इलेक्ट्रॉन (ClO 2 + e- → ClO 2 -) पर कब्जा करके क्लोराइट आयन (ClO2 -) में अपचित हो जाता है। रेडॉक्स क्षमता (ईº) 0,95 वी के रूप में अपेक्षाकृत अधिक है, इसलिए यह मानव माइक्रोबायोम को नुकसान नहीं पहुंचाता है। १३.१४
क्लोरीन डाइऑक्साइड (ClO2) समाधान
क्लोरीन डाइऑक्साइड है: जीवाणुनाशक, विषाणुनाशक, स्पोरिसाइडल, सिस्टिकसाइडल, अल्जीसाइडल और कवकनाशी। 15 क्लोरीन डाइऑक्साइड, एक मजबूत ऑक्सीडेंट, 1 से 100 पीपीएम तक की सांद्रता में सूक्ष्मजीवों को बाधित या नष्ट करने के लिए सूचित किया गया है जो 99,9 सेकंड के संवेदीकरण के उपचार के साथ शक्तिशाली एंटीवायरल गतिविधि, निष्क्रिय> या = 15% वायरस उत्पन्न करते हैं।
15-19
इसके अलावा, ClO2 बायोफिल्म को जल्दी से हटा सकता है 20 क्योंकि यह पानी में अत्यधिक घुलनशील है और ओजोन के विपरीत, प्रतिक्रिया नहीं करता है
बायोफिल्म से बाह्य कोशिकीय पॉलीसेकेराइड। इस तरह ClO2 फिल्म के भीतर रहने वाले रोगाणुओं तक पहुंचने और उन्हें मारने के लिए बायोफिल्म में तेजी से प्रवेश कर सकता है: एक बड़ा फायदा जो प्राकृतिक के लिए दोनों को संबोधित करने से अलग है
और एलोपैथिक चिकित्सा। ऐसी कई रिपोर्टें हैं कि ClO 2 Solution में विषाणुनाशक गतिविधि है। 21-25 निष्क्रियता एकाग्रता के खिलाफ
पोलियोवायरस में विभिन्न वायरस 1-2 पीपीएम होते हैं। सार्स का कारण बनने वाले कोरोनावायरस में 21,22 2,19 पीपीएम। हेपेटाइटिस ए वायरस में 23 7.5 पीपीएम, रोटावायरस में 24 और 0,2 पीपीएम। 25
क्लोरीन डाइऑक्साइड सुरक्षा
कई मूल्यांकनों ने ClO2 गैर विषैले यौगिकों को दिखाया है। पांच दशकों के उपयोग ने किसी भी प्रतिकूल स्वास्थ्य प्रभाव का संकेत नहीं दिया है।
उपयोग के मुख्य क्षेत्र पानी की आपूर्ति की कीटाणुशोधन, अवांछित स्वाद और गंध को हटाने, और लुगदी और कागज और कपड़ा उद्योगों में ब्लीचिंग कर रहे हैं।
विष विज्ञान परीक्षणों में पीने के पानी में ClO2 का अंतर्ग्रहण, ऊतक संवर्धन में वृद्धि, रक्त में इंजेक्शन, बीज शामिल हैं।
कीटाणुओं के अंडे कीटाणुरहित करना, जानवरों की त्वचा के नीचे और चूहों के मस्तिष्क में इंजेक्शन लगाना, 26,27 से अधिक चूहों को जलाना, और पौधों के तनों में इंजेक्शन लगाना। मानक परीक्षणों में एम्स उत्परिवर्तन, चीनी हम्सटर, खरगोश की आंख, त्वचा घर्षण, फार्माकोडायनामिक्स और टेराटोलॉजी शामिल हैं। 1500
एक अध्ययन में, मानव स्वयंसेवकों ने 2 पीपीएम तक के घोल में ClO2 या ClO24 पिया और कोई प्रतिकूल प्रभाव नहीं दिखाया। 28
कई अध्ययनों ने प्रजनन विषाक्तता या टेराटोलॉजी पर प्रभाव की जांच की। भ्रूण की विकृति या जन्म का कोई सबूत नहीं है।
ClO2 सांद्रता में दोष, पेय और त्वचा मार्ग दोनों में, 100 पीपीएम तक। 29-31
लंबे समय तक खिलाने के साथ, विषाक्तता मुख्य रूप से लाल रक्त कोशिकाओं में होती है। 1000 महीने के लिए कालानुक्रमिक रूप से खिलाए गए चूहों ने 6 मिलीग्राम / एल महत्वपूर्ण हेमटोलॉजिकल परिवर्तन नहीं दिखाए। हालांकि, 9 महीनों के बाद, सभी उपचार समूहों में लाल रक्त कोशिका की संख्या, हेमटोक्रिट और हीमोग्लोबिन में कमी आई।
दीर्घकालिक विषाक्तता की कमी, लेकिन निम्न-स्तरीय आधार रेखा को दो अलग-अलग अध्ययनों में नाटकीय रूप से चित्रित किया गया है जिसमें 32 चूहों और 33 मधुमक्खियों को दो साल के लिए उच्च खुराक ClO2 खिलाया गया था। पानी की आपूर्ति में 100 पीपीएम तक जोड़े जाने पर कोई हानिकारक प्रभाव नहीं देखा गया।
सामग्री और तरीके
इस शोध अध्ययन में मेथिसिलिन प्रतिरोधी स्टैफिलोकोकस ऑरियस (MRSA) का उपयोग किया गया था, जो रक्त अगर प्लेटों पर उगाया जाता था, जो एक स्थानीय प्रमाणित नैदानिक प्रयोगशाला द्वारा प्रदान किया गया था।
एमआरएसए संस्कृति
सेफ्टी क्लास 2 कैबिनेट में, ब्लड एगर प्लेट्स (कोलंबियन एगर) से, एक एमआरएसए नमूना एक निष्फल लूप का उपयोग करके पृथक संस्कृतियों से लिया गया था और 5 मिलीलीटर ट्राइप्टिक सोया शोरबा (टीएसबी) के साथ बाँझ ट्यूबों में रखा गया था। इन कल्चर ट्यूबों को 37 घंटे के लिए 48 डिग्री सेंटीग्रेड पर इनक्यूबेट किया गया था। इन कल्चर ट्यूबों को रेफ्रिजरेटर में 4 डिग्री सेल्सियस पर 10 दिनों तक संग्रहीत किया जा सकता है, जिसके लिए फिर से नमूने लिए जाएंगे।
बैक्टीरिया की गिनती
कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफयू) की गिनती करके बैक्टीरिया की मात्रा निर्धारित करने के लिए सबसे आम तरीकों में से एक है। यह व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली विधि सरल है, सेल व्यवहार्यता का एक अच्छा सामान्य विचार देती है, और बैक्टीरिया की कम सांद्रता के प्रति भी संवेदनशील है।
एक बड़ा नकारात्मक पहलू यह है कि सबसे अच्छे अनुमान वाले परिणाम प्राप्त करने में कई दिन लगते हैं। एक या एक हजार कोशिकाओं से एक कॉलोनी उत्पन्न हो सकती है और नमूना तैयार करना तकनीक से प्रौद्योगिकी के साथ-साथ हर बार नमूना स्थितियों के आधार पर भिन्न हो सकता है। सटीकता के लिए, इस जांच में Logos Biosystems (logosbio.com) से QUANTOMTx माइक्रोबियल सेल काउंटर का उपयोग किया गया था। यह एक स्वचालित छवि-आधारित सेल काउंटर है जो मिनटों में व्यक्तिगत जीवाणु कोशिकाओं की पहचान और गणना कर सकता है।
QUANTOM Tx उच्च संवेदनशीलता और सटीकता के साथ जीवाणु कोशिकाओं का पता लगाने के लिए स्वचालित रूप से कई प्रतिदीप्ति-सना हुआ सेल छवियों पर ध्यान केंद्रित करता है, कैप्चर करता है और उनका विश्लेषण करता है। इसमें एक परिष्कृत सेल डिटेक्शन और रिमूवल एल्गोरिथम शामिल है जो सबसे छोटे समूहों में भी व्यक्तिगत बैक्टीरिया कोशिकाओं की सटीक पहचान कर सकता है। इन प्रयोगों में, हम जीवित या व्यवहार्य कोशिकाओं का पता लगाने के लिए व्यवहार्य सेल स्टेनिंग किट का उपयोग करते हैं।
क्वांटम माइक्रोबियल सेल काउंटर की तुलना की गई है और प्रवाह साइटोमेट्री और हेमोसाइटोमीटर माप के रूप में सटीक पाया गया है, लेकिन समय को बहुत कम कर देता है क्योंकि प्रत्येक गणना में 30 सेकंड से अधिक नहीं लगता है और समूहों के बीच अंतर कर सकता है। सना हुआ कोशिकाओं को क्वांटम I सेल लोडिंग बफर के साथ मिलाया जाता है, जो क्वांटम M50 सेल काउंटिंग स्लाइड्स पर लोड होता है, और लगातार सटीक सेल डिटेक्शन सुनिश्चित करने के लिए एकल फोकल प्लेन के साथ कोशिकाओं को स्थिर और समान रूप से वितरित करने के लिए क्वांटम सेंट्रीफ्यूज में सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। गिनती के परिणाम और छवियों को गिनती के तुरंत बाद देखा और सहेजा जा सकता है।
क्वांटम के लिए नमूना तैयार करने के लिए, संस्कृति माध्यम के 10 माइक्रोलीटर (उल) को पहले से कैलिब्रेटेड डीएलएबी इलेक्ट्रॉनिक पिपेट का उपयोग करके लिया गया और एक बाँझ 1,5 मिलीलीटर एपपॉन्ड्रो ट्यूब में रखा गया। इसमें 2 उल व्यवहार्य सेल धुंधला डाई जोड़ा गया और 37 मिनट के लिए 30 डिग्री सेंटीग्रेड पर हेरियस इनक्यूबेटर में ऊष्मायन किया गया। प्रतिदीप्ति संकेत को बढ़ाने के लिए इस नमूने में 8 उल बफर जोड़ा गया था। क्वांटम उपभोज्य स्लाइड्स को बचाने के लिए, हम स्लाइड्स को इमराली इन्वेंशन्स iWash® स्लाइड क्लीनिंग सिस्टम्स (www.imraliinventions.com) में धोकर रीसायकल करते हैं।
इन ट्यूबों में, अलग-अलग समय के लिए अलग-अलग सांद्रता में क्लोरीन डाइऑक्साइड मिलाया गया था? क्लोरीन डाइऑक्साइड सांद्रता 0,5 μl (0,5 पीपीएम) से 5 μl (5 पीपीएम) तक थी, और नमूने के संपर्क की अवधि 30 मिनट से 30 सेकंड तक थी।
समय और अवधि के आधार पर प्रत्येक प्रयोग के लिए, कमजोर पड़ने वाले कारक को स्थिर रखने के लिए दो नमूना ट्यूब तैयार किए गए थे। प्रयोगात्मक ट्यूब में जोड़े गए क्लोरीन डाइऑक्साइड की मात्रा के आधार पर, पानी की समान मात्रा को नियंत्रण ट्यूब में जोड़ा गया था।
इन नियंत्रण और प्रायोगिक ट्यूबों से, एक इलेक्ट्रॉनिक पिपेट का उपयोग करके नमूने के 6 μl को लिया गया और M50 सेल काउंट स्लाइड्स पर रखा गया। स्लाइड्स को ३०० आरसीएफ (सापेक्ष केन्द्रापसारक बल) पर ८ मिनट के लिए क्वांटम सेंट्रीफ्यूज में रखा गया था और फिर प्रायोगिक ट्यूब से एक संदर्भ माप (नियंत्रण) और एक और माप लेने के लिए क्वांटम माइक्रोबियल सेल काउंटर में रखा गया था।
एमआरएसए प्रोटोकॉल के लिए क्वांटम माइक्रोबियल सेल काउंटर का इष्टतम विन्यास जो हमने परीक्षण के दौरान पाया, वह कमजोर पड़ने वाले कारक 2, फ्लोरोसेंस ऑब्जेक्ट का न्यूनतम आकार 0.4um, फ्लोरोसेंट ऑब्जेक्ट का अधिकतम आकार 15μm गोलाकार 50%, डिक्लस्टर स्तर 7 और डिटेक्शन संवेदनशीलता में स्थापित किया गया था। 7.
क्लोरीन डाइऑक्साइड की तैयारी
पारंपरिक क्लोरीन डाइऑक्साइड, जिसे एमएमएस कहा जाता है, को पारंपरिक क्लोरीन डाइऑक्साइड के रूप में तैयार किया गया था, जिसे एमएमएस कहा जाता है, जिसे दो घटकों, सोडियम क्लोराइट घोल (पानी में 25% घोल) और 4% हाइड्रोक्लोरिक एसिड घोल का उपयोग करके घोल के रूप में तैयार किया गया था। इनमें से प्रत्येक समाधान से एक बूंद को 1,5 मिलीलीटर एपपेन्डोर्फ़ ट्यूब में एक बाँझ 30 मिलीलीटर में रखा गया था और 7 सेकंड के लिए सक्रिय करने की अनुमति दी गई थी। इसके अलावा, सीडीएसप्लस नामक क्लोरीन डाइऑक्साइड की एक नई पीढ़ी का उपयोग करके और अधिक प्रयोग किए गए, जो एक जल उपचार उत्पाद के रूप में कुंभ प्रो-लाइफ द्वारा निर्मित एक मालिकाना उत्पाद है। यह 3000 के मानक पीएच पर क्लोरीन डाइऑक्साइड का बफर्ड रूप है और सक्रिय (250 मिली) होने पर 250 पीपीएम की एकाग्रता है। सक्रिय CDSplus (२५० मिली) से, ८३ μl = १ पीपीएम, १६६ μl = २ पीपीएम निकाले गए; 83 मिली = 1 पीपीएम।
प्रायोगिक प्रोटोकॉल
क्लोरीन डाइऑक्साइड की विभिन्न सांद्रता
एमएमएस और सीडीएसप्लस का इस्तेमाल किया गया। रेंज 1 पीपीएम से 5 पीपीएम तक थी। MMS और CDSplus के समय का सदुपयोग किया जाता था। रेंज 1 पीपीएम से 5 पीपीएम तक थी। क्लोरीन डाइऑक्साइड के संपर्क का समय 30 मिनट से 30 सेकंड तक था। प्रारंभिक प्रयोगों में यह स्पष्ट नहीं था कि निषेध के लिए किस समय की आवश्यकता होगी, लेकिन यह जल्दी से एक मिनट से भी कम समय के लिए दिखाया गया था। इसलिए, अधिकांश प्रयोगों में एक्सपोज़र का समय 1 मिनट था।
परिणाम प्रारंभिक प्रयोग
हमने पारंपरिक एमएमएस में क्लोरोबेस्ड डाइऑक्साइड की अलग-अलग सांद्रता लेना शुरू किया और 30 मिनट से 30 सेकंड तक अलग-अलग समय के लिए समाधान में एमआरएसए के साथ इन सांद्रता का परीक्षण किया। क्लोरीन डाइऑक्साइड का 1μl 1 पीपीएम की एकाग्रता के बराबर है। इन प्रयोगों में MRSA को पूरी तरह से समाप्त करने के लिए उपयोग की जाने वाली क्लोरीन डाइऑक्साइड की न्यूनतम सांद्रता 0,5 पीपीएम थी, जिसमें 30 सेकंड का एक्सपोजर समय था।
नीचे दी गई तालिका 1 क्वांटम सेल काउंटर द्वारा मापी गई एमआरएसए सेल एकाग्रता के साथ समय के एक समारोह के रूप में विभिन्न सांद्रता दिखाती है। जैसा कि आप देख सकते हैं, सभी क्लोरीन डाइऑक्साइड सांद्रता 1 से 5 पीपीएम तक, और एक्सपोजर का समय 30 मिनट से लेकर इन सभी प्रयोगों के दौरान 30 सेकंड, MRSA वृद्धि अवरोध 99,99% था।
तालिका 1 क्लोरीन डाइऑक्साइड के संपर्क में आने से पहले और बाद में जीवाणुओं की तुलना।
प्रयोग 1
तालिका 2 उपयोग किए गए क्लोरीन डाइऑक्साइड की 6 सांद्रता के लिए सेल गिनती संख्या दिखाती है, अर्थात्: 0,5, 1, 2, 3, 4 और 5 पीपीएम का उपयोग किया गया था और प्रत्येक एकाग्रता के लिए आधारभूत गणना को मापा गया था। प्रयोग संख्या 0 क्लोरीन डाइऑक्साइड की विभिन्न सांद्रता का उपयोग करके प्रत्येक प्रयोग समूह के लिए आधार रेखा (नियंत्रण) गणना है। प्रत्येक सांद्रता के लिए, प्रयोग को 5 बार दोहराया गया, जिसमें माध्य सांद्रता दी गई थी।
प्रारंभिक प्रयोगों से, चूंकि क्लोरीन डाइऑक्साइड को केवल 99,99 सेकंड के लिए 5 पीपीएम की सांद्रता पर 30% एमआरएसए बैक्टीरिया को मारने के लिए पाया गया था, अन्य सभी प्रयोगों ने मानक के रूप में एक मिनट के एक्सपोजर समय का उपयोग किया, जबकि उन्होंने विभिन्न सांद्रता की कोशिश की।
इस प्रयोग में, 2 . से लेकर ClO0,5 सांद्रता
- पारंपरिक एमएमएस का उपयोग करके 5ppm लिया गया। 5 सांद्रता में से प्रत्येक पर, निषेध दर १००% थी; तालिका 100 और चित्र देखें
- चित्रा 1 1 से 5 पीपीएम तक की विभिन्न सांद्रता का उपयोग करके एमआरएसए बैक्टीरिया की गिनती की दोहराव को दर्शाता है। प्रत्येक एकाग्रता के लिए एक आधारभूत गणना ली गई थी; यह 5 बार दोहराया गया था। सभी 5 प्रतिकृति में, MRSA विकास अवरोध 100% था।
चित्रा 2 एमआरएसए सेल गिनती की तुलना 1 मिनट से अधिक एमएमएस एकाग्रता से करता है। कवर किया गया क्षेत्र सेल गिनती की संख्या के बराबर है। प्रत्येक एकाग्रता के लिए प्रारंभिक गणना ग्राफ़ के बाईं ओर प्रदर्शित होती है और अंतिम गणना ग्राफ़ के दाईं ओर प्रदर्शित होती है। 100 मिनट के एक्सपोजर समय के साथ, सभी क्लोरीन डाइऑक्साइड सांद्रता के लिए अवरोध दर 1% थी।
चित्रा 1 एमएमएस का उपयोग कर विभिन्न सांद्रता में क्लोरीन डाइऑक्साइड
चित्रा 2 1 मिनट की अवधि के लिए पारंपरिक एमएमएस के विभिन्न सांद्रता।
तालिका 2 क्लोरीन डाइऑक्साइड (पारंपरिक एमएमएस) विभिन्न सांद्रता पर 5 बार दोहराया गया
तालिका ३ तालिका ३ के लिए १, २, ३, ४ और ५ पीपीएम की सांद्रता की तुलना करती है, क्लोरीन डाइऑक्साइड के लिए १ मिनट के एक्सपोजर के लिए १, २, ३, ४ और ५ पीपीएम की सांद्रता की तुलना करती है। विभिन्न सांद्रता के लिए प्रयोगात्मक एक के साथ नियंत्रण की तुलना की गई थी। क्लोरीन डाइऑक्साइड की इन सभी सांद्रता के लिए, निषेध दर 3% थी।
प्रयोग २: सीडीएसप्लस का उपयोग करना
1-3 पीपीएम की सांद्रता का उपयोग करते हुए, सीडीएस प्लस पीढ़ी का उपयोग करके ऊपर जैसा ही प्रयोग दोहराया गया था। 3 सांद्रता में से प्रत्येक पर, अवरोध दर फिर से १००% थी; तालिका 100 और चित्र 4 देखें। चित्रा 3 सीडीएसप्लस के विभिन्न सांद्रता, अर्थात् 3, 1 और 2 पीपीएम का उपयोग करके एमआरएसए सेल उन्मूलन को दर्शाता है। नियंत्रण समूह के लिए एक आधारभूत गणना को मापा गया, और फिर सीडीएस प्लस की प्रत्येक सांद्रता को जोड़ा गया और दो बार दोहराया गया।
सभी सांद्रता के लिए, निषेध दर 100% थी।
तालिका 4 नई पीढ़ी के सीडीएस प्लस का उपयोग करते हुए क्लोरीन डाइऑक्साइड के 1 सेकंड के एक्सपोजर के लिए 2, 3 और 60 पीपी की सांद्रता की तुलना करती है।
विभिन्न सांद्रता के लिए प्रयोगात्मक एक के साथ नियंत्रण की तुलना की गई थी।
चित्र 3 MRSA-CDSPप्लस विभिन्न सांद्रता के साथ।
चित्रा 4 एमआरएसए सेल गिनती की तुलना 1 मिनट के लिए क्लोरीन डाइऑक्साइड (सीडीएस प्लस) की एकाग्रता से करता है। शीर्ष पंक्ति नियंत्रण समूह के लिए संदर्भ कक्षों की संख्या दर्शाती है। नीचे की रेखा क्लोरीन डाइऑक्साइड की विभिन्न सांद्रता के लिए 1 मिनट के लिए कोशिकाओं को उजागर करने के बाद एमआरएसए सेल की संख्या दिखाती है; निषेध दर 100% थी।
चित्रा 4 ६० सेकंड के लिए सीडीएसपीप्लस की विभिन्न एकाग्रता।
तालिका 4 क्लोरीन डाइऑक्साइड (सीडीएसप्लस) 1 मिनट के एक्सपोजर के लिए विभिन्न सांद्रता पर तालिका 4 क्लोरीन डाइऑक्साइड (सीडीएसप्लस) 1 मिनट एक्सपोजर के लिए विभिन्न सांद्रता पर
निष्कर्ष
MRSA बहुमुखी और अप्रत्याशित है। उनकी आनुवंशिक अनुकूलन क्षमता और MRSA बहुमुखी और अप्रत्याशित है। इसकी आनुवंशिक अनुकूलन क्षमता और सफल महामारी उपभेदों की क्रमिक उपस्थिति का अर्थ है कि यह मानव स्वास्थ्य के लिए एक बड़ा खतरा बना हुआ है।
आक्रामक एमआरएसए संक्रमण से जुड़ी लगातार उच्च मृत्यु दर, इस तथ्य के बावजूद कि एफडीए ने 2014 से एमआरएसए के खिलाफ प्रभावी कई एंटीबायोटिक दवाओं को मंजूरी दे दी है, इन रोगियों के लिए इष्टतम प्रबंधन निर्धारित करने के लिए उच्च गुणवत्ता वाले परीक्षणों की आवश्यकता पर प्रकाश डाला गया है। इन विट्रो प्रयोगों में, एमआरएसए के खिलाफ क्लोरीन डाइऑक्साइड की प्रभावकारिता को लगातार प्रदर्शित किया गया है, जिसमें 99,99 पीपीएम की सबसे छोटी सांद्रता पर भी 100% -0,5% की वृद्धि अवरोध है।
पशु और मानव प्रयोगों में आज तक क्लोरीन डाइऑक्साइड की सिद्ध सुरक्षा को देखते हुए, आज MRSA से संक्रमित व्यक्तियों में क्लोरीन डाइऑक्साइड की प्रभावकारिता निर्धारित करने के लिए उच्च गुणवत्ता वाले नैदानिक परीक्षणों की तत्काल आवश्यकता है।
ये अध्ययन नैदानिक समुदाय द्वारा किए जाएंगे, जिसकी शुरुआत दुनिया के विभिन्न देशों में व्यक्तिगत नैदानिक परीक्षणों से होगी, जिसमें सभी डेटा एकत्र करने और सुरक्षित और प्रभावी नैदानिक प्रोटोकॉल विकसित करने के लिए नैदानिक परीक्षणों का एक नेटवर्क तैयार किया जाएगा। सुरक्षा के संबंध में, सावधानीपूर्वक डिज़ाइन किए गए प्रयोग में, एक सूक्ष्म जीव को मारने के लिए आवश्यक विशिष्ट समय केवल कुछ मिलीसेकंड पाया गया। चूंकि ClO2 एक काफी अस्थिर यौगिक है, इसका संपर्क समय (उपचारित सतह पर इसका स्थायित्व) कुछ मिनटों तक सीमित है।
जबकि यह प्रवास पर्याप्त सुरक्षित है (मृत्यु समय से अधिक परिमाण के कम से कम 3 आदेश होने के कारण) सभी जीवाणुओं को निष्क्रिय करने के लिए
शरीर की सतह इतनी छोटी है कि ClO 2 एक मिलीमीटर के कुछ दसवें हिस्से से अधिक गहराई तक प्रवेश नहीं कर सकता है; इसलिए, यह किसी ऐसे जीव को कोई वास्तविक नुकसान नहीं पहुंचा सकता जो एक जीवाणु से बहुत बड़ा है।
मलेरिया और एचआईवी सहित कई संक्रामक रोगों के उन्मूलन के लिए मानव स्वयंसेवकों द्वारा क्लोरीन डाइऑक्साइड के उपयोग के कई प्रमाण भी हैं, लेकिन अफ्रीका में अग्रणी में से एक, जिम विनम्र। इस उपाख्यानात्मक साक्ष्य पर बहुत विवाद है, लेकिन गवाही देने वाले गवाहों की संख्या को नजरअंदाज नहीं किया जा सकता है: राजनीति और व्यक्तिगत हितों को अलग रखा जाना चाहिए और विज्ञान को मानवता के लाभ के लिए सबूतों की जांच करनी चाहिए! 34,35
निम्नलिखित लिंक से संदर्भ और मूल दस्तावेज:
