Диоксид хлора в Covid-19:

Гипотеза о возможном механизме молекулярного действия при SARS-CoV-2

Загрузите исходный документ здесь:

Инсигнарес-Каррионе, Эдуардо. MD * (1) Директор по глобальным исследованиям LVWWG Liechtensteiner Verein für Wissenschaft und Gesundheit, Швейцария-Лихтенштейн, 2020. Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript.

Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript. 

Болано Гомес, Бланка. Доктор медицины (2) Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript.Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript.

Калькер, Андреас Людвиг (3) Исследователь Швейцарский SVNB Biphysic Управляющий директор Лихтенштейнер

Verein für die Wissenschaft und Gesundheit 

Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript. 

* автор-корреспондент (1) (+34) 666667180

Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript. 

Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript. 

Цитата: 

Insignares - Каррионе Э, Болано Гомес Б, Калькер Андреас. (2020). 

Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript.Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript.

 Авторские права: © 2020 Insignares - Carrione et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника. Будет определено редактором.

Деньги: Работа поддержана собственными ресурсами исследователей.

Конфликт интересов: Калькера, Андреас заявляет о возможном финансовом интересе, поскольку он является изобретателем находящегося на рассмотрении патента Швейцарии / 11136-CH. У двух других авторов нет конкурирующих экономических интересов. Это не влияет на соблюдение авторами всех правил обмена данными и материалами. 

Введение

ClO2, так называемый «идеальный биоцид», также мог бы применяться в качестве вирулицидного средства, если бы кто-то понял, как раствор быстро убивает вирусы, не причиняя вреда людям или животным. Наша цель состояла в том, чтобы найти механизм действия этой селективности путем изучения механизма ее реакции со структурой ТОРС-коронавирус-2 как теоретически, так и экспериментально, путем моделирования in silico.

Методика

Обширные обзоры предыдущих исследований механизма действия ClO2 на вирусы, особенно вирусы sars-cov и гриппа, были проведены на уровне компонентных аминокислот и углеводов, особенно на вирусном пике, и эти данные были перенесены на структурные аминокислоты ТОРС-коронавирус-2 вирусы, особенно те, которые находятся в критических положениях в пике ТОРС-коронавирус-2. Предварительные данные моделирования in silico и начальные данные наших клинических испытаний использования Cl02 при пероральном приеме covid19, которые продолжаются, позволяют нам вычислить, в каких аминокислотах он действует, определить места действия ClO2 и оценить действия такие как вируцида в ТОРС-коронавирус-2, основанный на уравнениях реакции-диффузии, продемонстрированных в предыдущих исследованиях. Мы используем 3D-реконструкции, сделанные с помощью компьютера, использование данных, полученных в результате исследований в области электронной криомикроскопии, и предыдущие работы, основанные на программном обеспечении дополненной реальности ChimeraX (UCSF).

Обсуждение.

Определение положений аминокислот, подверженных окислению диоксидом хлора, позволяет спроектировать их возможный механизм действия на вирус SARS-CoV-2. Цистеин в положениях Cys336-Cys361, Cys379-Cys432 и Cys391-Cys525 стабилизирует пять бета-листов (β1, β2, β3, β4 и β7), а Cys480-Cys488 является ключевым в соединении между гребнем SARS-CoV-2.

УКР и N-концевую спираль hACE 2. Ясно, что только на этом уровне окисление этих остатков цистеина будет оказывать дестабилизирующее и повреждающее действие на бета-листы вируса.

Resultados

Проекция и моделирование окисления диоксида хлора в структурных аминокислотах SARS-CoV-2, на которые он оказывает это действие, до большего, чем их количество (54 тирозина, 12 триптофана, 40 остатков цистеина, помимо пролина), позволяет составить очень четкое представление о местах, где диоксид оказывает денатурирующее действие на вирусную структуру и на человеческий ACE2. Применяя данные о скорости реакции и диффузии диоксида на эти аминокислоты, можно понять чрезвычайную скорость, с которой он действует, что могло бы объяснить первые результаты клинических наблюдательных исследований использования диоксида хлора в covid19, проведенных авторы в Боливии при строгом соблюдении этического комитета.

Заключение

Зная расположение участков, где аминокислоты, чувствительные к окислению диоксидом хлора, расположены в шиповом белке коронавируса SARS-CoV-2, который содержит 54 остатка тирозина, 12 триптофана, 40 остатков цистеина, помимо пролина, присутствующего в структура ACE2 в связи с RBD позволяет проецировать действие диоксида на вирусный спайк.Мы надеемся вскоре опубликовать клинические испытания этого многообещающего системного вирулида.

Введение:

Covid-19 - инфекционное заболевание, вызываемое вирусом SARS-CoV-2. Впервые он был обнаружен в китайском городе Ухань (провинция Хубэй) в декабре 2019 года. За три месяца он распространился практически на все страны мира, поэтому Всемирная организация здравоохранения объявила его пандемией. (ВОЗ, 11 марта 2020 г.).

Специального лечения нет; Основные лечебные мероприятия - облегчение симптомов и поддержание жизненно важных функций. Исследования по поиску эффективного лечения начались после подтверждения пандемического масштаба болезни. Основная проблема заключается в том, что через одиннадцать месяцев после официального начала заболевания эффективное лечение болезни неизвестно. В отсутствие эффективного лечения мы изучаем новые терапевтические возможности с намерением найти эффективное и безопасное лечение от covid19.

В соответствии с вышеизложенным, это исследование касается текущих результатов и предыдущих исследований [1], добавляя возможное терапевтическое действие диоксида хлора как вирулицидного средства в водном растворе и без присутствия хлорита натрия с использованием концепций трансляционной медицины [2], основанных на знания о структуре вируса и механизме действия диоксида хлора на вирусы, чтобы предложить возможное лечение выбора для covid19.

Диоксид хлора

Действие диоксида хлора определяется его селективностью по pH.(3) и по площади или размеру, где он производит свое действие. Это означает, что эта молекула диссоциирует и выделяет кислород при контакте с другой кислотой. При реакции его атом хлора связывается с натрием в среде и превращается в хлорид натрия (поваренная соль), высвобождая кислород, который окисляет присутствующие патогены с кислым pH, превращая их в щелочные оксиды. Следовательно, когда диоксид хлора диссоциирует, он выделяет кислород в кровь, как это делают эритроциты (красные кровяные тельца) по тому же принципу (известному как эффект Бора), который должен быть селективным по кислотности.

Как это обычно бывает в крови, диоксид хлора выделяет кислород при контакте с кислой почвой, будь то молочная кислота или кислотность патогена. Его возможный терапевтический эффект постулируется, среди прочего, благодаря тому факту, что он создает щелочную среду, устраняя при этом небольшие кислые патогены путем окисления с электромагнитной перегрузкой, которую невозможно рассеять одноклеточными организмами. Время смерти вируса должно быть аналогично времени задержки, вызванному химической реакцией, из-за времени, необходимого для покрытия всего объема. Можно ожидать, что у вируса диаметром 120 нанометров время уничтожения будет намного короче из-за его геометрического фактора.

Согласно исследованиям Золтана Носттициуса, диоксид хлора является противомикробным агентом избирательного размера, который может быстро убивать микроорганизмы микрометрового размера, но не может причинить реального вреда гораздо более крупным организмам, таким как животные или люди, поскольку он не может проникать глубоко в ваши ткани.

Известно, что многоклеточная ткань обладает наибольшей способностью рассеивать электрические заряды, и поэтому на нее не так же влияют напряжения окислительно-восстановительного процесса (ОВП), как в случае одноклеточных организмов, и поэтому существует более высокая биохимическая защита клеток. по размеру.

Диоксид хлора, который является наиболее эффективным нецитотоксическим дезинфицирующим средством, известным после озона, и используемый в качестве водного раствора, имеет огромные возможности для терапевтического использования, поскольку он также способен проникать и удалять биопленку (3), чего озон не может достичь. . Большим преимуществом возможного терапевтического использования диоксида хлора при инфекциях является невозможность устойчивости бактерий или вирусов к ClO2, поскольку он действует по механизму окисления, а не как хлор (Cl2), путем хлорирования (3).

Хотя озон обладает более сильным антисептическим действием, его высокий окислительный потенциал 2,07 и короткий период полураспада всего 15 минут при 25 ° C и pH 7,0 делают его менее эффективным, чем ClO2, для терапевтического применения in vivo. Диоксид хлора является окислителем, избирательным по pH (-) и размеру, и, в отличие от других веществ, не вступает в реакцию с большинством компонентов живой ткани (3). Диоксид хлора быстро вступает в реакцию с фенолами и тиолами, необходимыми для жизнедеятельности бактерий.

В фенолах механизм заключается в атаке бензольного кольца, устранении запаха, вкуса и других промежуточных соединений (4). Диоксид хлора эффективно убивает вирусы и до 10 раз более эффективен (5), чем гипохлорит натрия (отбеливатель или отбеливатель). Также было показано, что он очень эффективен против мелких паразитов, простейших (4).

Одна тема, которая в последнее время много обсуждается, - это реакционная способность диоксида хлора с аминокислотами. В тестах на реакционную способность диоксида хлора с 21 аминокислотой только цистеин4, триптофан5, тирозин6, пролин и гидроксипролин реагировали при pH около 6. Цистеин и метионин (4) - две ароматические аминокислоты, содержащие серу, триптофан и тирозин, и два неорганических иона Fe2 + и Mn2 +. (3) Цистеин, поскольку он принадлежит к группе тиолов, является аминокислотой, которая в 50 раз более активна со всеми микробными системами, чем другие четыре аминокислоты, и, следовательно, для нее невозможно создать устойчивость к углекислому газу. хлор.

Предлагаемая здесь гипотеза состоит в том, что причина противовирусного действия диоксида хлора может быть объяснена его действием по крайней мере на пять перечисленных выше аминокислот или на пептидные остатки.

Диоксид хлора (ClO2) используется с 1944 года для обработки питьевой воды из-за его биоцидной способности, а также в большинстве бутилированных вод, пригодных для употребления из-за его почти нулевой токсичности в используемых водных растворах (3,4). систематически при дезинфекции и консервации пакетов для переливания крови (4). Будучи селективным окислителем (3,4), его действие очень похоже на действие фагоцитоза, при котором для уничтожения всех типов патогенов используется мягкий процесс окисления.

Диоксид хлора (ClO2) представляет собой желтоватый газ, который на сегодняшний день не является частью традиционной фармакопеи в качестве лекарства, несмотря на его доказанную эффективность в денатурировании вирусов, с множеством патентов на использование в различных методах лечения, таких как дезинфекция или стерилизация компонентов крови (клеток крови, белки крови и т. д.) 4, парентеральное лечение (внутривенный путь) ВИЧ-инфекций (4) или для лечения нейродегенеративных заболеваний, таких как боковой амиотрофический склероз (БАС), болезнь Альцгеймера (4) и другие патенты для использования в качестве патентов на : лечение рака с индукцией апоптоза (CN 103720709

A) Лечение опухолей (US 10, 105, 389 B1), противовирусное лечение синусита (US 2o16 / 0074432 A1), стимуляция иммунной системы (US 5,830,511), инициация и дифференцировка стволовых клеток (WO2014082514A1), метод вагинального лечения (US 6280716B1), лечение кожи от вирусов и бактерий (US 4,737,307), Способ лечения амебиаза у людей (US 4,296,102), Лечение дрожжевых инфекций (US 2015/0320794 A1), Лечение ран (US 87.3106), Лечение полости рта (US 100015251) ), (US4689215), против воспалений (US53841134), лечения грибка ногтей (US 20100159031) и Патент в Швейцарии подан / 11136-CH.(Калькер А.).

Исходя из вышеизложенного, можно создать три помещения:

1. Двуокись хлора может бороться с вирусами посредством процесса избирательного окисления, денатурируя белки капсида и последующего окисления генетического материала вируса, делая его недееспособным. Поскольку адаптация к процессу окисления невозможна, вирус не может развить резистентность, что делает диоксид хлора (ClO2) многообещающим средством лечения любых подвидов вируса.

2. Существуют научные доказательства того, что диоксид хлора эффективен против коронавируса SARS-CoV (4) и SARS-CoV-2, например, работа, проведенная в Университете Керетаро в Мексике и опубликованная в ноябре 2020 года COVID-19 под названием «In vivo оценка противовирусного эффекта ClO2 (диоксида хлора) на куриных эмбрионах, инокулированных птичьим коронавирусом (IBV), у которых лечение ClO2 оказало заметное влияние на инфекцию IBV. А именно, вирусные титры были в 2,4 раза ниже, а смертность уменьшилась вдвое у инфицированных эмбрионов, обработанных ClO2. Инфекция вызвала аномалии развития независимо от лечения. Поражения, типичные для инфекций IBV, наблюдались у всех инокулированных эмбрионов, но степень тяжести, как правило, была значительно меньше у эмбрионов, обработанных ClO2. Никаких макро- или микроскопических доказательств токсичности ClO2 при использованных дозах обнаружено не было. (пятьдесят).

3. Токсичность: самые большие проблемы, возникающие с лекарствами или веществами, которые можно рассматривать как таковые в целом, связаны с их токсичностью и побочными эффектами. Существует токсичность диоксида хлора при вдыхании через дыхательные пути, но нет сообщений о токсичности при рекомендуемой дозе 30 мг или 30 ppm в водном растворе перорально, и нет клинически доказанной смерти даже при высоких дозах при пероральном приеме. Смертельная доза (LD50, коэффициент острой токсичности) оценивается в 292 мг на килограмм в течение 14 дней, тогда как ее эквивалент для взрослого с массой тела 50 кг составляет 15.000 50 мг, вводимых в течение двух недель. Субтоксичные пероральные дозы, которые можно использовать, составляют примерно 100 ppm, растворенных в 10 мл воды 500 раз в день, что эквивалентно 2 мг. Кроме того, диоксид хлора при диссоциации разлагается на ион хлора, который сразу же связывается с ионом натрия, образуя обычную соль NaCl и кислород O19 в организме человека. Таким образом, диоксид хлора в рекомендуемых для COVID30 дозах 30 мг или XNUMX частей на миллион в день не токсичен.

Вирулицидное действие диоксида хлора

Диоксид хлора - эффективное противомикробное средство, убивающее бактерии, вирусы и некоторых паразитов [9]. Его бактерицидный профиль широкого спектра действия обусловлен действием этого соединения как нецитотоксического окислителя. 

Вирусы обычно состоят из внешнего слоя или белковой оболочки, которая инкапсулирует нуклеиновую кислоту, которая может быть ДНК или РНК. Когда диоксид хлора вступает в контакт с вирусом, на вирусе-мишени выделяется единственный высокореактивный образующийся атом кислорода. Этот кислород связывается с определенными аминокислотами в белковой оболочке вируса, денатурируя белки и делая вирус неактивным. Кроме того, возникающие атомы кислорода связываются с гуанином, одним из четырех оснований нуклеиновых кислот, обнаруженных в РНК и ДНК, образуя 8-оксогуанин. Такое окисление остатков гуанина предотвращает репликацию вирусных нуклеиновых кислот [10].

В опубликованной научной литературе есть сообщения о том, что диоксид хлора инактивирует широкий спектр вирусов, включая грипп A [11], аденовирус человека [12], ротавирус человека [13], эховирус [14], бактериофаг f2 [15] и полиовирус. . [16].

Вирусы гриппа A представляют собой сферические одноцепочечные РНК-вирусы с отрицательным смыслом, которые обладают липидной мембраной, содержащей пики, состоящие из гликопротеинов, известных как HA (гемагглютинин) и NA (нейраминидаза). Внутри вируса имеется восемь одиночных цепей РНК [17]. Доклиническое исследование [11] показало, что газообразный диоксид хлора эффективен для предотвращения аэрозольной инфекции вируса гриппа А. В этом исследовании использовались низкие концентрации газообразного диоксида хлора (т.е. 0,03 ppm) в клетке для мышей. Этот уровень ниже уровня долгосрочного воздействия OSHA (8 часов) для газообразного диоксида хлора в окружающем воздухе на рабочем месте человека, который составляет 0,1 ppm [18]. Газообразный диоксид хлора эффективно снижает количество инфекционных вирусов в легких мышей и заметно снижает смертность. Смертность составила 70% (7/10) на 16 день в группе, не получавшей диоксид хлора, и 0% (0/10) в группе, получавшей диоксид хлора. Авторы подтвердили эти результаты, повторив свой эксперимент. В

Результаты повторного исследования составили 50% (5/10) смертности в группе, не получавшей лечения, и 0% (0/10) в группе лечения.

Авторы пришли к выводу, что низкие уровни газообразного диоксида хлора (т.е. 0,03 ppm), которые ниже допустимого уровня воздействия на рабочих местах человека, «могут использоваться в присутствии людей для предотвращения их заражения людьми. Вирус гриппа A и, возможно, другие вирусы связанные с инфекциями тракта респираторный (с. 65).Они предположили, что «газообразный диоксид хлора можно использовать в таких местах, как офисы, театры, отели, школы и здания аэропортов, без эвакуации людей, без нарушения их нормальной деятельности».

Авторы предположили, что их метод «открывает новый путь для предотвращения пандемического гриппа» (стр. 65) после проведения исследования в школе с благоприятными результатами в этом отношении.

Было обнаружено, что инфекционная способность вируса снижается in vitro при применении диоксида хлора, а более высокие концентрации приводят к еще большему снижению. Это подавление инфекционности коррелировало с изменениями вирусных белков. Эти изменения являются результатом включения атомов кислорода в остатки триптофана и тирозина, расположенные в белках НА и NA [11]. Эти белки денатурируются за счет добавления атомов кислорода, что исключает способность вируса инфицировать другие клетки [19]. Более позднее исследование показало, что инактивация вируса гриппа A вызывается переносом 2 атомов кислорода от диоксида хлора к определенному остатку триптофана (W153) в концевом белке гемагглютинина (HA).

Аденовирусы - это вирусы без оболочки с икосаэдрическим капсидом, содержащим геном двухцепочечной ДНК. Классифицировано семь групп аденовирусов человека [21]. Недавнее исследование показало, что диоксид хлора может помочь снизить уровень аденовируса в питьевой воде [12]. В этом исследовании изучалось влияние диоксида хлора и ультрафиолета на уровень аденовируса в питьевой воде в Нидерландах. Авторы нашли

что применение диоксида хлора в низких концентрациях (0.05–0.1 ppm) снижает количество аденовирусов в питьевой воде, в то время как УФ-дезинфекция недостаточна без дезинфекции диоксидом хлора.

Ротавирусы - это двухцепочечные РНК-вирусы, которые состоят из 11 уникальных двухцепочечных молекул РНК, окруженных трехслойным икосаэдрическим белковым капсидом [22]. Эти вирусы, которые являются основной причиной тяжелых диарейных заболеваний у младенцев и детей раннего возраста во всем мире [23], инактивируются диоксидом хлора. Фактически, при концентрации диоксида хлорида от 0,05 до 0,2 ppm они инактивируются в течение 20 секунд in vitro [24].

Бактериофаг f2 представляет собой вирус с одноцепочечной РНК с положительным смыслом, который инфицирует бактерии Escherichia coli. Исследование in vitro показало, что 0,6 мг / л диоксида хлора быстро (то есть в течение 30 секунд) инактивировал бактериофаг f2 и препятствовал его способности связываться с хозяином, E. coli [15]. Как инактивация вируса, так и ингибирование его способности связываться с хозяином возрастали с повышением pH и увеличением концентрации диоксида хлора. Кроме того, авторы обнаружили, что диоксид хлора денатурирует белки капсида вируса, вступая в реакцию с остатками тирозина, триптофана и цистеина. Эти аминокислоты почти полностью разложились в течение 2 минут после воздействия диоксида хлора.

Полиовирус - это вирус с положительной цепью РНК [25]. Риденур и Ингерсон [26] обнаружили, что диоксид хлора может инактивировать вирус полиомиелита in vitro. Позже Альварес и О'Брайен [16] расширили эту работу, показав, что обработка 1 ppm диоксида хлора in vitro приводит к отделению РНК от капсида, а также вызывает изменения в РНК.

В дополнение к упомянутым выше исследованиям Агентство по охране окружающей среды США (EPA), которое 10 апреля 2020 года включило диоксид хлора в список дезинфицирующих средств, зарегистрированных EPA для уничтожения вируса SARS-CoV-2, оказывает дополнительную поддержку.

для вирулицидного действия хлора [27]. На веб-сайте EPA указано, что этот продукт предназначен для использования на поверхности, а не для человека. 

Исследования на людях влияния диоксида хлора на вирус SARS-CoV-2 еще не проводились. В настоящее время двое из авторов (Инсигнарес и Болано) проводят первое в мире многоцентровое клиническое исследование эффективности перорального приема диоксида хлора при covid19 у людей. (Идентификатор ClinicalTrials.gov: NCT04343742). Исследование in vitro показало, что диоксид хлора инактивирует генетически связанный вирус SARS-CoV [28]. Было обнаружено, что концентрация диоксида хлора 2,19 мг / л вызывает полную инактивацию SARS-Co-V в сточных водах. Филиал нашей группы находится в процессе проведения in vitro исследования действия диоксида хлора на SARS-CoV-2 в Индии, и мы публикуем отчет о моделировании механизма действия диоксида хлора. в SARS-Co-V-2 с использованием метода in silico, проведенного в Японии.

В Эквадоре (Aememi. Диоксид хлора: эффективная терапия для лечения covid 19; 51) Предварительное испытание было проведено с пероральным приемом диоксида хлора с участием 104 пациентов с covid19, которые имели различные профили с точки зрения возраста, пола и тяжести заболевания, меньшинство было диагностировано путем тестирования, а большинство - путем скрининга в соответствии с типичными симптомами заболевания. болезнь. Таким образом, данные обрабатывались с использованием шкалы оценки симптомов, где 10 - максимальное восприятие, а 0 - минимум симптома: лихорадка, озноб, мышечная боль, сухой кашель, головная боль, боль в спине, затрудненное дыхание, рвота, диарея. , боль в горле, потеря обоняния, потеря вкуса, плохой аппетит.

Диоксид хлора в концентрации 3000 ppm был рекомендован в дозе десять куб. См, разведенной в одном литре воды, принимаемой в течение дня, разделенной на 10 дневных доз, каждые полтора часа в течение 20 дней.

Результаты распределялись по симптомам после первого, второго, третьего и четвертого дня лечения. Они были разделены на мужчин и женщин, а также были представлены общие результаты.

В следующих таблицах показаны симптомы, а на первом и последнем графике - поведение по шкале симптомов между первым и четвертым днем ​​перорального приема диоксида хлора.

Таблица 1: Результат введения диоксида хлора в первый день его приема

Таблица 2: Результат введения диоксида хлора в первый день его приема

Из этого предварительного исследования можно сделать следующие выводы: диоксид хлора определенно безвреден - совсем не токсичен - в рекомендуемых и принимаемых дозах, и все начальные симптомы начали уменьшаться с первого дня лечения, причем уменьшение было полностью очевидным. четвертый день. В частности, радикально уменьшились симптомы, наиболее характерные для продолжающейся инфекции, такие как лихорадка, озноб, головная боль, боль в горле, потеря аппетита и потеря чувства вкуса и запаха. Другие симптомы, такие как мышечная боль и кашель, оставались довольно частыми, поскольку они, как правило, остаются остаточными дольше после того, как болезнь закончилась.

Материалы и методы:

Для поиска справочной информации, использованной в этой статье, поисковые системы в Интернете были проверены с использованием критериев MesH в соответствии со стратегией поиска, указанной в последующих строках в период с января по апрель 2020 г., и были получены следующие результаты: 1. PubMed ( Medline): 4 ссылки, 2. Сирень: 18 ссылок, 3.

Кокрановская библиотека: 56 ссылок, 4. Наука: 1.168 ссылок, 5. Scielo: 61 ссылка, 6. MedScape: 19 ссылок, всего 1.326 научных публикаций, содержание которых касалось использования диоксида хлора в различных приложениях и механизма действие диоксида хлора на вирусы sars-cov и sars-cov2.

Наконец, мы изучили реестры на www.clinicaltrials.gov и реестры Международной платформы регистров клинических испытаний ВОЗ (ICTRP), чтобы выявить текущие или неопубликованные клинические испытания.

Стратегия поиска:

«Диоксид хлора» ИЛИ «Протокол диоксида хлора» ИЛИ Диоксид хлора И вирус; Диоксид хлора Y SAR-COV-2; ИЛИ «Медикаментозное лечение COVID-19» ИЛИ «Спайк гликопротеина, вирус COVID-19» ИЛИ «Коронавирус 2 тяжелого острого респираторного синдрома» ИЛИ «COVID-19» ИЛИ «2019-

nCoV "O" SARS-CoV-2 "O" Новый коронавирус 2019 г. ИЛИ "Коронавирусная болезнь 2019 г." O (пневмония).

Из результатов поиска мы отобрали те, которые касались вирулицидного действия диоксида хлора на различные микроорганизмы, в частности на вирусы, в том числе на SARS-CoV-2 или SARS-CoV.

Мы также рассматриваем проведенные исследования действия диоксида хлора на аминокислоты, особенно те, которые входят в состав вирусных капсидов. На основании полученных данных мы подчеркиваем, что в 1986 году Noss et al. продемонстрировали, что инактивация бактериального вируса (бактериофага) f2 под действием ClO2 [29] связана с его реакциями с белками вирусного капсида. Кроме того, они обнаружили, что три аминокислоты вирусного белка [29], а именно цистеин, тирозин и триптофан, могут быстро реагировать с ClO2. В 1987 году Тан и другие исследовали реакционную способность ClO2 в отношении 21 свободной аминокислоты [30]. ClO2 прореагировал только с шестью аминокислотами, растворенными в 0,1 М натрий-фосфатном буфере при pH 6,0. Реакция с цистеином, триптофаном и тирозином была слишком быстрой, чтобы следовать его методике.

Реакционная способность трех быстро реагирующих аминокислот (цистеин [31], тирозин [32] и триптофан [33) была изучена в лаборатории между 2005 и 2008 годами, обнаружив, что цистеин имеет самую высокую реактивность среди этих аминокислот. .

В 2007 году Огата [34] обнаружил, что антимикробная активность ClO2 основана на денатурации определенных белков, что в основном связано с окислительной модификацией остатков триптофана и тирозина двух модельных белков (бычьего сывороточного альбумина и глюкозы-6. - фосфатдегидрогеназа), использованные в своих экспериментах. В 2012 году Огата снова продемонстрировал [35], что инактивация вируса гриппа с помощью ClO2 вызывается окислением остатка триптофана (W153) до гемагглютинина (белка из шипа вируса), подавляя, таким образом, его способность. привязать к получателям ..

В этом контексте интересно отметить, что спайковый белок нового коронавируса SARS_CoV-2 содержит 54 остатка тирозина, 12 триптофана и 40 остатков цистеина [36].

Если предположить, что в водном растворе все эти аминокислотные остатки способны реагировать как с ClO2, так и со свободными аминокислотами, инактивация вируса может быть чрезвычайно быстрой даже в растворе 0,1 мг / л ClO2.

С другой стороны, мы выбрали статьи, которые описывают действие SARS-CoV-2 в клетках, в его взаимодействии с ACE2, и, в частности, мы исследовали видеоролики с дополненной реальностью или видеоролики моделирования на основе Silico для трехмерного представления. сайтов. действие, подобное видеоролики, в которых спикулярный белок и рецептор ACE2 (37), среди прочего, обрабатываются с помощью программного обеспечения дополненной реальности ChimeraX (UCSF). (38), (39), (40), (41), (42), (43), (44).

Таким же образом мы анализируем структуру вирусного всплеска и основываемся на исследованиях, проведенных Дэниел Рэпп и Джейсон С. Маклеллан из Техасского университета.

Трехмерное изображение игольчатого гликопротеина S бета-коронавируса SARS-CoV-2 было замечено с помощью электронной криомикроскопии в рекордно короткие сроки. Благодаря этому изображению с разрешением 3,5 Å подтверждено, что этот белок S связан с белком hACE2 клеток человека с более высоким сродством, чем у коронавируса SARS-CoV. Белок S является мишенью для иммунизирующих нас антител. Его трехмерная структура позволяет понять, почему опубликованные моноклональные антитела против SARS-CoV не эффективны против SARS-CoV-3. Это, несомненно, поможет ускорить разработку вакцин и методов лечения инфекции COVID-2. (Четыре пять),

В этих видеороликах моделирования и виртуальной реальности видно, что белок S представляет собой тример, состоящий из трех пептидов, каждый из которых имеет две субъединицы S1 и S2. Субблок S1 действует как шарнир с двумя конформациями, называемыми «вниз» (RBD вниз) и «вверх» (RBD вверх). Электронная криомикроскопия показывает, что только один из пептидов находится в состоянии «вверх», а два других - в состоянии «вниз». Связывание с клеточным рецептором происходит в «восходящей» конфигурации. После связывания три пептида белка S отщепляются по сайту S1 / S2; затем происходит второе расщепление в точке S2 ', разворачивая ключевой пептид слияния (FP) на стыке между мембранами.

Обсуждение

Спикулярный белок (S) представляет собой трансмембранный тримерный белок I типа с содержанием от 1.160 до

1.400 аминокислот в зависимости от типа коронавируса. Этот белок образует коронавирусную корону; Он состоит из трех повторяющихся пептидов и сильно гликозилирован, что облегчает его связывание с белками и сахарами. Каждый пептид состоит из двух доменов, называемых S1 и S2. В бета-коронавирусах, таких как SARS-CoV-2, расщепление субъединиц S1 и S2 происходит во время слияния между мембранами.

Домен S1, в свою очередь, имеет два субдомена: один N-концевой (NTD), который заканчивается аминокислотой, имеющей свободную аминогруппу (-NH2), и другой C-концевой (CTD), который заканчивается карбоксильной группой ( -COOH); оба связываются с рецептором ACE2 клетки-хозяина, тогда они являются рецептор-связывающими доменами (RBD). Домен S2 является С-концевым по типу и высоко консервативен среди всех коронавирусов, которые гораздо больше различаются по субъединице S1. Домен S2 содержит две области, HR1 и HR2, в которых повторяются группы из семи аминокислот (называемых гептидами) в форме abcdefg, которые содержат гидрофобные остатки a и d, которые участвуют в слиянии между мембранами. Домены HR1 и HR2 являются терапевтическими мишенями, поскольку известны лекарства, которые ингибируют их действие, предотвращая или препятствуя слиянию.

Инфекция эпителиальных клеток дыхательных путей регулируется S-белком вируса. На общих этапах процесса слияния сначала домен S1 распознает и связывается с рецептором клетки-хозяина. Во-вторых, первое расщепление происходит по доменам S1 и S2, а второе - по сайту S2 '; последний позволяет активировать слитый пептид (FP), который соединяет мембраны хозяина и вирус (эта фаза называется промежуточной стадией слияния или промежуточной стадией слияния). И, в-третьих, область между HR1 и HR2 ремоделируется (складывается), давая начало гептамеру (6-HB), который присоединяется к обеим мембранам, обеспечивая проникновение вируса. Белок S коронавирусов играет ключевую роль в разработке вакцин (антигены, которые вызывают иммунный ответ на присутствие домена S1) и для разработки противовирусных препаратов (ингибиторы некоторых стадий слияния между мембранами, обычно атакующие определенные области домен S2). Знание трехмерной структуры протеина S необходимо для борьбы с эпидемией COVID-19.

Последовательность белка S SARS-CoV-2 на 98% совпадает с белком S коронавируса Bat-RaTG13, с той большой разницей, что он содержит четыре аминокислоты RRAR (аргинин-аргинин-аланин-аргинин) вместо одной. аргинин (R). Кроме того, они различаются 29 остатками, 17 из которых находятся в области RBD. Сравнение, проведенное между 61 полным геномом SARS-CoV-2, доступным в GISAID (Глобальная инициатива по обмену всеми данными о гриппе), показывает, что между всеми ними имеется только 9 различных аминокислот; и все эти варианты обнаружены в очень хорошо сохранившихся местах, что, похоже, не влияет на летальность коронавируса.

Во-первых, удалось охарактеризовать трехмерную структуру спикулярного гликопротеина S коронавируса SARS-CoV-3 и его домена связывания рецептора RBD. Затем рецептор клетки-хозяина, человеческий ангиотензинпревращающий фермент hACE2. Следующим шагом для исследователей было определение структуры комплекса SARS-CoV-2 RBD / hACE2, которая была получена с помощью рентгеновской кристаллографии с разрешением 2 и 2,45 Å. Среди результатов было установлено, что очень тонкие структурные изменения объясняют более высокую инфекционность и патогенез SARS-CoV-2,68 (COVID-2) по сравнению с SARS-CoV (SARS);

Эти результаты имеют большое значение для разработки лекарств для борьбы с COVID-

19. Реконструкции in silico были выполнены (с использованием теоретических моделей с использованием компьютеров), но наблюдение реальной кристаллографической структуры с помощью дифракции рентгеновских лучей является важным. Как было отмечено в начале, авторы находятся в процессе публикации проведенного в Японии исследования in silico механизма действия диоксида хлора на спайк SARS-CoV-2 и гемоглобин.

Первая проблема, которая возникает в процессе исследования, заключается в том, как сформировать комплекс SARS-CoV-2 RBD / hACE2 с достаточной стабильностью для его наблюдения; Предыдущий опыт образования комплекса SARS-CoV RBD / hACE2 (подтвержденный в 2005 г.) был ключевым, в котором солевой мостик между Arg426 RBD и Glu329 hACE2 используется для усиления связывания комплекса. Очень важным наблюдением является то, что цистеин в положениях Cys336-Cys361, Cys379-Cys432 и Cys391-Cys525 стабилизирует пять бета-слоев (β1, β2, β3, β4 и β7), а Cys480-

Cys488 является ключевым на стыке гребня SARS-CoV-2 RBM и N-концевую спираль hACE2 (46), (47), (48).

При моделировании действия диоксида на эти аминокислоты ( Cys ), легко понять невероятное прямое вирулицидное действие диоксида на вирусы и, в частности, на SARS-CoV-2.

Обнаруженное изображение демонстрирует разрушительное воздействие диоксида на вирус, разрушающее и денатурирующее его.

Сравнение комплексов SARS-CoV RBD / hACE2 и SARS-CoV-2 RBD / hACE2 позволяет понять, почему COVID-19 более заразен, чем SARS-CoV.

SARS-CoV-2 RBM образует более крупный и тесный контактный стык с hACE2, чем SARS-CoV RBM; Солевой мостик между SARS-CoV RBD и hACE2 слабее, чем между SARS-CoV-2 RBD и hACE2. Кристаллическая структура комплекса также содержит глюканы, связанные с четырьмя сайтами hACE2 и сайтом RBD. Глюкан, связанный с Asn90 hACE2, образует водородную связь с Arg408 в ядре RBD; это взаимодействие сохраняется между SARS-CoV-2 и SARS-CoV.

Структурные различия между RBMs SARS-CoV-2 и SARSCoV незначительны, но они влияют на конформации петель в гребнях связывания рецепторов. В обоих RBM одна из гребневых связей содержит дисульфидную связь, которая имеет решающее значение для связывания. SARS-CoV и bat-CoV Rs3367 содержат мотив с тремя остатками Про-Про-Крыло в указанном шлейфе; но в SARS-CoV-2 и bat-CoV RaTG13 они показывают мотив из четырех остатков Gly-Val / Gln-Glu / Thr-Gly; поэтому форма петли меняется, потому что глицины более гибкие. Это изменение способствует связыванию RBD / hACE2. Кроме того, гребень имеет более компактную форму благодаря водородным связям Asn487 и Ala475 в SARS-CoV-2 RBM, приближая петлю, содержащую Ala475, к hACE2.

Контакт гребня SARS-CoV-2 RBM с N-концевой спиралью hACE2 больше, чем для SARS-CoV RBM. Например, N-концевой остаток Ser19 hACE2 образует новую водородную связь с основной цепью Ala475 RBM SARS-CoV-2, а Gln24 N-концевой спирали hACE2 также образует новый контакт с SARS-CoV. 2 RBM. По сравнению с Leu472 из RBM SARS-CoV, Phe486 из RBM SARS-CoV-2 указывает в другом направлении и образует гидрофобную область с участием Met82, Leu79 и Тыр83 из hACE2.

Сравнение с SARS-CoV RBM показывает, что эти небольшие структурные изменения SARS-CoV-2 RBM более благоприятны для связывания hACE2. Это небольшие различия, но они очень важны с функциональной точки зрения. Были обнаружены два критических сайта связывания (горячие точки связывания вируса), критическая точка горячей точки-31 в солевом мостике Lys31 и Glu35 и горячая точка-353 в другом солевом мостике между Lys353 и Asp38. Эти два солевых мостика являются слабыми из-за большого расстояния во взаимодействии, но, будучи заключенными в гидрофобную среду, которая снижает эффективную диэлектрическую проницаемость, их энергия связи выше.

Рис. 2 Трехмерная структура SARS-CoV-2 Mpro в двух разных представлениях.

Linlin Zhang et al. Наука 2020; 368: 409-412.

Copyright © 2020 Авторы, некоторые права защищены; эксклюзивный лицензиат Американской ассоциации содействия развитию науки. Нет претензий к оригинальным работам правительства США.

Распространяется по некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (CC BY-NC).

Чтобы подтвердить эти структурные данные, были проведены биохимические исследования аффинности связывания RBD / hACE2 после введения определенных мутаций в SARS-CoV-2 RBD. Эти мутации предполагают, что коронавирус летучих мышей RaTG13 может инфицировать людей (что подтверждает зоонозное происхождение эпидемии). Кроме того, RBMs SARS-CoV-2 и bat-COV RaTG13 содержат аналогичный мотив из четырех остатков в ACE2-связывающем гребне, подтверждая, что один произошел от другого. Кроме того, для повышения узнавания hACE2 SARS-CoV-2 демонстрирует два изменения в остатках L486F и Y493Q RaTG13, которые, по-видимому, способствовали передаче SARS-CoV-2 от летучих мышей человеку. Следовательно, может не быть промежуточного хозяина между летучей мышью и человеком при COVID-19, в отличие от того, что произошло с SARS и MERS. Конечно, пока невозможно исключить наличие посредника, которым вполне может быть ящер или другое дикое животное, продаваемое на рынке Ухани; В случае с панголином необходимо секвенировать больше геномов коронавируса панголина, чтобы прояснить проблему, но до сих пор между ними было подтверждено геномное сходство более 99%. (49)

Результаты и выводы:

Спайк SAR-CoV-2 сильно гликозилирован, и считается, что гликозилирование играет важную роль в обнаружении вируса против нашей собственной иммунной системы. Часть альфа-спиралей проходит по длине белка-шипа. По большей части бета-листы концентрируются на этом конце, где белок спайков сливается с клеткой, чтобы инфицировать ее. Интересно то, что спирали состоят из аминокислот, чувствительных к действию диоксида хлора (на уровень цистеина).

Белок-шип на самом деле состоит из трех взаимосвязанных цепей, которые имеют идентичные аминокислотные последовательности, каждая из этих цепей называется протомером. Однако у протомеров нет одинаковых трехмерных конформаций.

Мы можем увидеть разницу в конформации протомеров, исследуя участок белка-шипа, который имеет решающее значение для жизненного цикла вируса, рецептор-связывающий домен или RBD. RBD - это место, где вирус связывается с ферментом на поверхности клеток-хозяев, позволяя ему слиться с клеткой и нести в себе вирусный генетический материал. Два из этих RBD находятся в более низкой конформации в структуре. Однако одна из этих RBD перевернулась. Эта «верхняя» конформация - это более высокая энергия, готовая связываться с клеточным рецептором и приводить к слиянию. Считается, что при связывании белка шипа каждый из этих RBD изменяется на эту менее стабильную конформацию.

Наши собственные ферменты, те, которые разрывают пептидные связи, называемые протеазами, могут разрезать белок-спайк в определенных местах, и происходят конформационные изменения в слиянии белков-спайков. RBD связан с ACE2, рецептором на поверхности нашей клетки, с которым коронавирус связывается, чтобы вызвать слияние. Эти структуры также сильно гликозилированы. Если мы спрячем сахара, чтобы создать модель для понимания взаимодействия RBD-ACE2, и поместим туда диоксид хлора, действующий на аминокислоты, мы сможем сосредоточиться на некоторых слабых взаимодействиях, которые удерживают вместе RBD и ACE2.

Например, у нас есть обширная сеть водородных связей на границе раздела RBD-ACE2, которая вторгается в два остатка тирозина ( Тир-489 и Тир-83 ). Эта боковая цепь тирозина также связана с карбонильным водородом боковой цепи аспарагина (Asn-487), который, в свою очередь, связывается через свой атом водорода NH с карбонилом глутамина в ACE2 (gln-24). Мы предполагаем, что диоксид хлора окисляет эти остатки. Тир-489 и Тир-83среди прочего, при этом интерфейс RBD-ACE2 денатурируется, и вирус либо больше не может связываться, либо связанный окисляется. Кроме того, диоксид также окисляет пролин, присутствующий в ACE2, что завершает окисление и деформацию ACE2.

Двигаясь по альфа-спирали ACE2, мы видим глутаматную боковую цепь, которая депротонирует при pH 7,4, и остаток лизина, несущий положительный заряд при этом pH.

Если вирус сливается, вирусный генетический материал попадает в клетку. В случае коронавирусов этот фрагмент РНК перемещается к рибосомам нашей клетки и изолирует их, чтобы создать свои собственные вирусные белки. Интересно то, что эта вирусная РНК способна изменять трехбуквенный каркас оснований РНК, который считывается рибосомой; это по существу дублирует пептидную последовательность, которая может быть получена из вирусной реплики с использованием наших рибосом - белков, которые необходимы вирусу для сборки дополнительных копий самого себя, которые в конечном итоге будут выпущены из клетки и заразят другие. В этом процессе передается важный белок, и это основная протеаза, которая разрезает цепь вирусных полипептидов в функциональных белках, необходимых для сборки новых вирусов. Это еще одна терапевтическая цель, если человек уже инфицирован вирусом, поскольку можно вводить лекарство, которое связывается с протеазой и предотвращает образование зрелых вирусных белков, чтобы замедлить репликацию вируса.

Эта основная протеаза SAR-CoV-2 представляет собой димер, состоящий из двух идентичных белковых цепей, и должна димеризоваться, чтобы стать функциональной протеазой. На границе димера происходит много аминокислотных взаимодействий, но исследователи, опубликовавшие эту кристаллическую структуру, предполагают, что ионные взаимодействия между боковой цепью этого остатка аргинина

и этот глутамат управляет димеризацией. Это взаимодействие присутствует по обе стороны от димера. Двигаясь к активному центру, важные остатки состоят из цепи цистеина (Cys-145) и гистидин (His-41).

Этот фермент представляет собой цистеиновую протеазу, поэтому он использует нуклеофильный цистеин для атаки амидной связи пептида. В этом механизме азот гистидина захватывает протон боковой цепи цистеина, позволяя ему атаковать пептидную связь.

Пептидная связь разрывается, и затем может войти молекула воды, высвобождая цистеин, поэтому протеаза может разорвать другую полипептидную цепь. Ферменты, содержащие нуклеофильные каталитические остатки, являются отличными мишенями для необратимого ингибирования. Поскольку они содержат боковую цепь нуклеофильной аминокислоты - в данном случае цистеин, - можно разработать ингибиторы, которые связываются с ферментом постоянной ковалентной связью. Здесь также действует диоксид хлора, окисляя цистеин, поэтому этот механизм им блокируется. В отличие от обратимых ингибиторов, которые могут входить и выходить из активного центра, эти необратимые ингибиторы, также называемые ингибиторами самоубийства, навсегда инактивируют белок, не позволяя ему выполнять свою работу и создавая больше вирусных белков. Эти исследователи ранее разработали ингибиторы других протеаз коронавируса. Они смогли связать один из этих ингибиторов с активным сайтом протеазы SARS-CoV-2. Серин явно участвует в ковалентной связи с кетоном ингибитора. Теперь это обратимая реакция, поэтому она не является самоубийственным ингибитором с присутствием цистеина, ковалентно связанного в этом активном центре. Здесь этот ингибитор карбонил образует водородную связь с тремя группами NH на белке. Каталитический гистидин протеазы также участвует в образовании водородных связей. Это кольцо участвует в обширной сети водородных связей, которая включает как структурные атомы основной цепи, так и боковые цепи. Знание контактов, которые ингибитор устанавливает с ферментом, позволяет химикам и биологам рассматривать взаимодействия и потенциально создавать еще более эффективные ингибиторы. Помимо ингибирования ферментов, которое могло бы быть эффективной стратегией борьбы с вирусом, появление диоксида хлора как вещества, не подавляющего, а

Он «растворяет» путем окисления ключевые структуры вируса, позволяет действовать с почти молекулярной «хирургической» точностью, поэтому он гораздо более эффективен в качестве механизма контроля вирусной инфекции.

В заключение, зная расположение участков, где расположены аминокислоты, чувствительные к окислению диоксидом хлора, отметив, что спайковый белок коронавируса SARS-CoV-2 содержит 54 тирозина, 12 триптофана, 40 остатков цистеина, помимо пролин, который, в свою очередь, присутствует в структуре ACE2 в связи с RBD, позволяет проецировать действие диоксида на вирусный спайк. Лучшим педагогическим примером является то, что шип - это ключ, а ACE2 - замок. Деформация ключа за счет окисления диоксида в аминокислотах цистеина, тирозина, триптофана и пролина спиральных цепей и окисление замка (ACE2) предотвращают не только соединение, но и растворяют существующее соединение между спайком. (RBD) и ACE, очень быстро, что, по-видимому, объясняет скорость клинического действия диоксида хлора у пациентов с COVID19.

Признание:

Выражаем благодарность врачу за сотрудничество и помощь.

Митчелл Б. Листер, доктор медицины (3) 

Медицинский факультет Университета Колорадо, филиал в Колорадо-Спрингс

Памятник, CO 80132 

Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript. 

488-0024 (офис) (719) 338-5719 (сел)

Ссылки:

[1] Гуо Ю.Р., Цао К.Д., Хун З.С. и др. Происхождение, передача и клинические методы лечения вспышки коронавирусной болезни 2019 года (COVID-19): обновление статуса. Mil Med Res 2020; 7 (11): 1-10.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7068984/.

2. Оярсун Гомес, доктор Мануэль, Трансляционная медицина: серебряный мост между фундаментальными науками и клинической медициной. Преподобный чил. Я вздохнул. том 33 № 2 Сантьяго июн. 2017 г.

3.https://www.lenntech.es/procesos/desinfeccion/quimica/desinfectantes-diocopio-de-cloro.htm

4-4Ison A, Odeh IN, Margerum DW (2006) Кинетика и механизмы окисления диоксида хлора и цистеина, хлорита и глутатиона. Inorg Chem 45: 8768-8775. Doi: 10.1021 / ic0609554. PubMed: 17029389.

1. Стюарт Д.Дж., Наполитано М.Дж., Бахмутова-Альберт Е.В., Маргерум Д.В. (2008) Кинетика и механизмы окисления триптофана диоксидом хлора. Inorg Chem 47: 1639-1647. DOI: 10.1021 / ic701761p.PubMed: 18254588.)

    

2. Наполитано М.Дж., Грин Б.Дж., Никосон Дж.С., Маргерум Д.В. (2005) Окисление тирозина, N-ацетилтирозина и допа диоксидом хлора. Chem Res Toxicol 18: 501-508. DOI: 10.1021 / tx049697i. PubMed: 15777090).

    

3. Тан, Х.К., Уиллер, В.Б., Вей, К.И., Реакция диоксида хлора с аминокислотами и пептидами, Mutation Research, 188: 259-266, 1987.

8-Логинова И.В., Рубцова С.А., Кучин А.В. (2008) Окисление производных метионина и цистеина диоксидом хлора до сульфоксида. Chem NatCompd 44: 752-754. DOI: 10.1007 / s10600-009-9182.

9 Грей, Николас Ф. Диоксид хлора (Глава 32) в микробиологии болезней, передающихся через воду (2-е изд.). 2014. Лондон: Эльзевир.

1. Молодой РО. Диоксид хлора (ClO2) как нетоксичный антимикробный агент для вирусов, бактерий и дрожжей (Candida albicans). Vaccine Int J Vaccines 2016; 2 (6): 00052.

    

2. Огата Н., Шибата Т. Защитный эффект газообразного диоксида хлора низкой концентрации против заражения вирусом гриппа А. Джен Вирол 2008; 89 (1): 60-67. (40)

[12] Schijven J, Teunis P, Suylen T., Ketelaars H, Hornstra L, Rutjes S. QMRA аденовируса в питьевой воде на водоочистных сооружениях с использованием УФ-дезинфекции и диоксида хлора. Исследования воды. 2019; 158: 34-45.

[13] Хараке М., Батлер М. Инактивация ротавируса человека, SA11 и других кишечных вирусов в сточных водах дезинфицирующими средствами. Epidemiol Infect 1984; 93 (1): 157-63.

[14] Чжун К., Карратала А., Оссола Р., Бахманн В., Кон Т. Перекрестная устойчивость эковируса 11, устойчивого к УФ-лучам или диоксиду хлора, к другим дезинфицирующим средствам. Фронтальная микробиология 2017; 8: 1928.

[15] Носс К.И., Хаучман Ф.С., Оливьери В.П. Реакционная способность диоксида хлора с белками. Water Res 1986; 20 (3): 351-6.

[16] Альварес М.Э., О'Брайен Р.Т. Механизмы инактивации полиовируса диоксидом хлора и йодом. Апл. Царство. Microbiol 1982; 44 (5): 1064-71.

[17] Танкешвар А. Вирус гриппа (гриппа): Введение, классификация и структура.https://microbeonline.com/influenza-flu-virus-structure-classification/. 19 апреля 2020 г .;

Проверено 4 апреля 2020 года.

[18] Министерство труда, безопасности и гигиены труда США. Диоксид хлора.https://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id202/id202bkr.html Проверено 19

Апрель 2020 г.

[19] Огата Н. Денатурация белков диоксидом хлора: окислительная модификация остатков триптофана и тирозина. Биохим 2007; 46 (16): 4898-911.

[20] Огата Н. Инактивация гемагглютинина вируса гриппа диоксидом хлора: окисление консервативного остатка 153 триптофана в сайте связывания рецептора. J Gen Virol 2012; 93 (12): 2558-63.

[21] Немеров Г.Р., Стюарт П.Л., Редди В.С. Структура аденовируса человека. Curr Opin Virol 2012; 2 (2): 115-21.

[22] Песавенто Дж. Б., Кроуфорд С. Е., Эстес М. К., Прасад Б. В.. Белки ротавируса: структура и сборка. В Reovirus: Entry, Assembly и Morphogenesis 2006 (стр. 189-219). Шпрингер, Берлин, Гейдельберг.

[23] Деннехи PH. Ротавирусная инфекция: болезнь прошлого? Infect Dis Clin 2015; 29 (4): 617-35.

[24) Чен Ю.С., Вон Дж. М.. Инактивация диоксидом хлора ротавирусов человека и обезьян. Appl Environ Microbiol 1990; 56 (5): 1363-6.

[25] Hogle JM. Вход в полиовирусные клетки: общие структурные темы в путях проникновения вирусных клеток. Annu Rev Microbiol 2002; 56 (1): 677-702. (54)

[26] Риденур GM, Ingols RS. Инактивация вируса полиомиелита «свободным» хлором. Am J Public Health Nations Health 1946; 36 (6): 639-44.

[27] Агентство по охране окружающей среды США. Список N: дезинфицирующие средства для использования против SARS-CoV-2.https://www.epa.gov/pesticide-registration/list-n-disinfectants-use-

против-sars-cov-216 апреля 2020 г .; Проверено 19 апреля 2020 года.

[28] Wang XW, Li JS, Jin M et al. Изучение резистентности тяжелого острого коронавируса, ассоциированного с респираторным синдромом. J Virol Methods 2005; 126 (1-2): 171-7.

(29). Носс К.И., Хаухман Ф.С., Оливьери В.П. Реакционная способность диоксида хлора с белками. Water Res.1986; 20 (3): 351–6,https://doi.org/10.1016/0043-1354(86)90083-7.

(30). Тан Х, Уиллер Б.В., Вей С. Реакция диоксида хлора с аминокислотами и пептидами: исследования кинетики и мутагенности. Mutat Res 1987; 188 (4): 259–66, https:

//doi.org/10.1016/0165-1218 (87) 90002-4.

(31). Исон А., Одех И. Н., Маргерум Д. В.. Кинетика и механизмы окисления диоксида хлора и цистеина, хлорита и глутатиона. Inorg Chem 2006; 45: 8768–75,https://doi.org/10.1021/ic0609554.

(32). Наполитано MJ, Грин BJ, Nicoson JS, Margerum DW. Окисление тирозина, N-ацетилтирозина и допа диоксидом хлора. Chem Res Toxicol 2005; 18: 501–8,https://doi.org/10.1021/tx049697i

(33). Стюарт DJ, Наполитано MJ, Бахмутова-Альберт EV, Margerum DW. Кинетика и механизмы окисления триптофана диоксидом хлора. Inorg Chem 2008; 47: 1639–47,https://doi.org/10.1021/ic701761p.

(34. 2007). Огата Н. Денатурация белков диоксидом хлора: окислительная модификация остатков триптофана и тирозина. Биохимия 46; 4898: 911–10.1021, https://doi.org/061827/biXNUMXu.

(35). Огата Н. Инактивация гемагглютинина вируса гриппа диоксидом хлора: окисление консервативного остатка 153 триптофана в сайте связывания рецептора. J Gen Virol 2012; 93: 2558–63, https://doi.org/10.1099/vir.0.044263-0.

(36). Тао Й, Королева К., Паден ЧР, Чжан Дж., Ли Й, Уехара А. и др. Тяжелый острый респираторный синдром коронавирус 2

изолят 2019-nCoV / USA-IL1 / 2020, полный геном. NCBI GenBank; 2020. Доступно на https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide/MN988713.1?report5genbank&log$5nuclalign&blast

_rank51 и RID5304U21XH016.

1. Том Годдард, «Как коронавирусы попадают в клетки», YouTube, 03 февраля 2020 г., на основе статьи Вэньфэй Сонг, Мяо Гуй, Е Сян, «Крио-ЭМ-структура гликопротеина пика коронавируса SARS в комплексе с его рецепторной клеткой.

   ACE2, »Патогены PLoS, 14: e1007236 (13 августа 2018 г.), doi: https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1007236.), среди других.

    

2. Хавьер А. Хаймс, Николь М. Андре, Гэри Р. Уиттакер, «Структурное моделирование спайкового белка нового коронавируса (nCoV) 2019 года показывает, что протеолитически чувствительная петля активации является отличительной особенностью по сравнению с SARS-CoV и родственными SARS-подобными коронавирусами. »Препринт bioRxiv 942185 (18 февраля 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.10.942185 ,

    

3. Альба Грифони, Джон Сидни, Алессандро Сетте, «Цели-кандидаты для иммунных ответов на новый коронавирус (nCoV) 2019 г .: прогнозы, основанные на гомологии последовательностей и биоинформатике», препринт bioRxiv 946087 (20 февраля 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.12.946087

    

4. Chunyun Sun, Long Chen, Liangzhi Xie, "SARS-CoV-2 и SARS-CoV Spike-RBD Сравнение структуры и связывания рецепторов и возможные последствия для разработки нейтрализующих антител и вакцин", препринт bioRxiv 951723 (20 февраля 2020 г.) , doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.16.951723

    

5. Ренхун Ян, Юаньюань Чжан, Цян Чжоу, «Структурная основа для распознавания 2019-nCoV человеческим ACE2», препринт bioRxiv 956946 (20 февраля 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956946

    

6. Джун Лан, Дживан Гэ, Синьцюань Ван, "Кристаллическая структура домена связывания пикового рецептора 2019-nCoV, связанного с рецептором ACE2", препринт bioRxiv 956235 (20 февраля 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956235

    

7. Линлин Чжан, Дайзун Линь, Рольф Хильгенфельд, «Рентгеновская структура основной протеазы нового коронавируса SARS-CoV-2 позволяет создавать ингибиторы α-кетоамида», препринт bioRxiv 952879 (20 февраля 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952879

8. Александра К. Уоллс, Парк Янг-Джун, Дэвид Вислер, «Структура, функция и антигенность гликопротеина шипа SARS-CoV-2», препринт bioRxiv 956581 (20 февраля 2020 г.), DOI: https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956581

    

    

9. Дэниел РэппООН,*, Няньшуан ВанООН,*, Киззмекия С. Корбеттвнутри, Джейсон С. МаклелланООН,†

    

   Крио-ЭМ структура пика 2019-нКоВ в конформации до слияния, Science 13 марта 2020 г .: Vol. 367, Number 6483, pp. 1260-1263 DOI: 10.1126 / science.abb2507

    

10. Цзянь Шан, Ган Е,…, Фанг Ли, «Структурные основы распознавания рецепторов SARS-CoV-2», Nature (30 марта 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2179 y

    Джун Лан, Дживан Гэ,…, Синьцюань Ван, «Структура связывающего домена спайкового рецептора SARS-CoV-2, связанного с рецептором ACE2», Nature (30 марта 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1038/s41586-020-2180-5.

11. Сяоли Сюн, Кун Цюй,…, Джон А.Г. Бриггс, «Закрытый и термостабильный пиковый тример белка SARS-CoV-2», Nature Structural & Molecular Biology (31 июля 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1038/s41594-020-0478-5,

12. Препринт bioRxiv 152835 (17 июня 2020 г.), doi: https://doi.org/10.1101/2020.06.15.152835. [/]

13. Лам TTY и др .. Идентификация коронавирусов, связанных с SARS-CoV-2, у малайских панголинов. Природа. 2020. DOI: 10.1038 / s41586-020-2169-0

     

14. Хочитль Самбрано-Эстрада, Карлос Домингес-Санчес, Марина Бануэт -

Мартинес, Фабиола Герреро де ла Роса, просмотр профиля ORCID Тереза ​​Гарсия-Гаска, Луис Прието-Валиенте, просмотр профиля ORCID Карина Асеведо-Уайтхаус Оценка противовирусного эффекта

диоксида хлора (ClO2) с использованием модели позвоночного, зараженной птичьим коронавирусом.

bioRxiv 2020.10.13.336768; DOI: https://doi.org/10.1101/2020.10.13.336768.

(51) aememi. Гарсия, Р. и др. 2020; Предварительные результаты перорального применения диоксида хлора у пациентов с конвидом 19. Прямой доклад.