Диоксид хлора при COVID-19: гипотеза о возможном механизме молекулярного действия при SARS-CoV-2

 

Эдуардо Инсигнарес-Каррионе *, Бланка Болано Гомеси Андреас Людвиг КалькерДиректор по глобальным исследованиям LVWWG, Liechtensteiner Verein für Wissenschaft und Gesundheit, Лихтенштейн, Швейцария 2Директор научно-исследовательского отдела Genesis Foundation, Колумбия

Швейцарский исследователь биофизики SVNB, управляющий директор, Liechtensteiner Verein für die Wissenschaft und Gesundheit, Швейцария

 

Оригинальный документ: 

 

Абстрактные

 

Введение: Цель этого обзора - выдвинуть гипотезу о механизме действия диоксида хлора при COVID-19 путем изучения механизма его действия в структуре SARS-CoV-2.

Методы: Были проведены обзоры исследований механизма действия диоксида хлора на вирусы, особенно SARS-CoV-2 и вирусы гриппа на аминокислотном уровне в вирусном спайке, и эти данные были перенесены на те же структурные аминокислоты SARS-CoV-2. . Мы использовали трехмерные компьютерные реконструкции, использование данных посредством криоэлектронных исследований и предыдущие работы, основанные на программном обеспечении дополненной реальности ChimeraX (UCSF). 

Результаты: Прогнозирование и моделирование окисления диоксида хлора в структурных аминокислотах SARS-CoV-2 позволяет сделать вывод о сайтах, в которых диоксид хлора оказывает денатурализующее действие на вирусную структуру и человеческий ACE2, а также позволяет понять чрезвычайную скорость, с которой он действует, что может объяснить первые результаты клинических наблюдательных исследований использования диоксида хлора при COVID-19, проведенных авторами в Боливии при строгом соблюдении этического комитета. 

Вывод: Окисление диоксидом хлора критических аминокислот в пике коронавируса SARS-CoV-2 и в структуре ACE2 позволяет нам понять потенциально терапевтическое действие диоксида хлора, растворенного в воде пероральным путем в COVID-19. Мы надеемся в ближайшее время опубликовать клинические испытания этого многообещающего системного вирулицида. 

Ключевые слова: SARS-CoV-2 • COVID-19 • Аминокислоты • Диоксид хлора 

 

Введение 

COVID-19 - инфекционное заболевание, вызываемое вирусом SARS-CoV-2. Впервые он был обнаружен в китайском городе Ухань (провинция Хубэй) в декабре 2019 года. За три месяца он распространился практически на все страны мира, поэтому Всемирная организация здравоохранения объявила его пандемией. (ВОЗ, 11 марта 2020 г.). 

Специального лечения нет; Основные лечебные мероприятия заключаются в облегчении симптомов и поддержании жизненно важных функций. Исследования по поиску эффективного лечения начались после подтверждения масштабов пандемии болезни. Основная проблема заключается в том, что спустя одиннадцать месяцев после официального начала заболевания эффективное лечение болезни все еще неизвестно. В отсутствие эффективного лечения мы изучали новые терапевтические возможности с намерением найти эффективное и безопасное лечение COVID-19. 

В соответствии с вышеизложенным, это исследование касается текущих результатов и предыдущих исследований, добавляющих возможное терапевтическое действие в качестве вирулицидного средства диоксида хлора в водном растворе и без присутствия хлорита натрия с использованием концепций трансляционной медицины, основанных на знаниях о структуре вируса и механизм действия диоксида хлора на вирусы, чтобы предложить возможное лечение выбора для COVID-19 [1,2]. 

* Адрес для корреспонденции: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript.Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript./ Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Ботов, для его просмотра включен JavaScript. 

Авторские права: © 2020 Insignares-Carrione E, et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

 

Полученный 10 Ноябрь 2020; Принятый 22 Ноябрь 2020; опубликованный 30

Ноябрь 2020

Диоксид хлора 

Действие диоксида хлора определяется его селективностью по pH и площадью или размером, где он производит свое действие. Это означает, что эта молекула диссоциирует и выделяет кислород при контакте с другой кислотой [3]. При реакции его атом хлора связывается с натрием в среде и превращается в хлорид натрия (обычная соль), выделяя кислород, который окисляет присутствующие патогены с кислым pH, превращая их в щелочные оксиды. Следовательно, когда диоксид хлора диссоциирует, он выделяет кислород в кровь, как это делают эритроциты (красные кровяные тельца) по тому же принципу (известному как эффект Бора), который должен быть селективным по кислотности.

 

Как это обычно бывает в крови, диоксид хлора выделяет кислород при контакте с кислой почвой, будь то молочная кислота или кислотность патогена. Его возможное терапевтическое действие постулируется из-за, среди прочего, того факта, что он создает щелочную среду, устраняя при этом небольшие кислые патогены путем окисления с электромагнитной перегрузкой, которую невозможно рассеять одноклеточными организмами. Время гибели вируса должно быть аналогично времени задержки, вызванному химической реакцией, из-за времени, необходимого для покрытия всего объема. Можно ожидать, что у вируса диаметром 120 нанометров время уничтожения будет намного короче из-за его геометрического фактора.

 

Согласно исследованиям Золтана Носттициуса, диоксид хлора является противомикробным агентом избирательного размера, который может быстро убивать микроорганизмы размером с микрометр, но не может причинить реального вреда гораздо более крупным организмам, таким как животные или люди, поскольку не может проникать глубоко в их ткани.

 

Известно, что многоклеточная ткань обладает наибольшей способностью рассеивать электрические заряды и поэтому на нее не так же влияют напряжения процесса окисления-восстановления (ОВП), как в случае одноклеточных организмов, и поэтому с биохимической точки зрения существует большая защита ячеек из-за размера.

 

Диоксид хлора, который является наиболее эффективным нецитотоксическим дезинфицирующим средством, известным после озона, и используемый в качестве водного раствора, имеет огромные возможности.

его можно использовать в терапевтических целях, поскольку он также способен проникать в биопленку и удалять ее, чего не делает озон [3]. Большим преимуществом возможного терапевтического использования диоксида хлора при инфекциях является невозможность бактериальной или вирусной устойчивости к ClO2так как он имеет механизм окисления в отличие от хлора (Cl2), который действует путем хлорирования [3].

 

Хотя озон обладает более сильным антисептическим действием, его высокий окислительный потенциал 2.07 и короткий период полураспада всего 15 минут при 25 ° C и pH 7.0 делают его менее эффективным, чем ClO.2для терапевтического применения в естественных условиях. Диоксид хлора - это pH (-) и избирательный окислитель, и, в отличие от других веществ, он не вступает в реакцию с большинством компонентов живых тканей (3). Диоксид хлора быстро вступает в реакцию с фенолами и тиолами, необходимыми для жизни бактерий.

 

В фенолах механизм заключается в атаке бензольного кольца, устранении запаха, вкуса и других промежуточных соединений [4]. Диоксид хлора эффективно убивает вирусы и до 10 раз эффективнее гипохлорита натрия (отбеливатель или отбеливатель). Также было показано, что он очень эффективен против мелких паразитов, простейших [5]. Одна тема, которая в последнее время много обсуждается, - это реакционная способность диоксида хлора с аминокислотами. В тестах на реакционную способность диоксида хлора с 21 аминокислотой только цистеин [4], триптофан [5], тирозин [6], пролин и гидроксипролин реагировали при pH около 6.

 

Цистеин и метионин (4) - две ароматические аминокислоты, содержащие серу, триптофан и тирозин, а также два неорганических иона Fe2+и Mn2+[3]. Цистеин, поскольку он принадлежит к группе тиолов, является аминокислотой, которая в 50 раз более активна со всеми микробными системами, чем четыре другие аминокислоты, и, следовательно, для нее невозможно создать устойчивость к диоксиду хлора.

 

Предлагаемая здесь гипотеза состоит в том, что причина противовирусного действия диоксида хлора может быть объяснена его действием по крайней мере на пять перечисленных выше аминокислот или на пептидные остатки.

 

Диоксид хлора (ClO2) использовался с 1944 года для обработки питьевой воды из-за его биоцидной способности, а также в большинстве бутилированных вод, пригодных для потребления человеком из-за его почти нулевой токсичности в водном растворе, систематически используемом для дезинфекции и консервирования пакеты для переливания крови [3,4]. Поскольку это селективный окислитель, его действие очень похоже на действие фагоцитоза, при котором для уничтожения всех типов патогенов используется мягкий процесс окисления [3,4].

 

Диоксид хлора (ClO2) представляет собой желтоватый газ, который на сегодняшний день не является частью традиционной фармакопеи как лекарство, несмотря на то, что он доказал свою эффективность в денатурирующих вирусах, с множеством патентов на эффективное использование различных методов лечения, таких как дезинфекция или стерилизация компонентов крови (клеток крови, белков крови и т. .) 4, парентеральное лечение (внутривенный путь) ВИЧ-инфекций или для лечения нейродегенеративных заболеваний, таких как боковой амиотрофический склероз (БАС), болезнь Альцгеймера и другие патенты на использование, например, патенты на лечение рака, индуцирующего апоптоз (CN 103720709 A ) лечение опухолей (US 10, 105, 389 B1), противовирусное лечение синусита (US 2o16 / 0074432 A1), иммунологическая система стимуляции (US 5,830,511), инициация и дифференциация стволовых клеток (WO2014082514A1), метод лечения влагалища (US 6280716B1), лечение кожи против вирусов и бактерий (США 4,737,307), Метод лечения амебиаза человека (США 4,296,102), Лечение кандидозных инфекций (США 2015/0320794 A1), Лечение ран t (US 87.3106), Лечение полости рта (US 100015251), (US4689215), Против воспалений (US53841134), Лечение грибка ногтей (US 20100159031) и Против воспалений (US53841134), Лечение грибка ногтей (US 20100159031) и Против воспалений ( US53841134), Средства против грибка ногтей (US 20100159031) и патент Швейцарии / 11136-CH. (Калькер А.) [4].

 

Исходя из вышеизложенного, можно создать три помещения:

 

1. Двуокись хлора может бороться с вирусами посредством процесса селективного окисления, денатурируя белки капсида и последующего окисления генетического материала вируса, делая его недееспособным. Поскольку адаптация к процессу окисления невозможна, он предотвращает развитие устойчивости вируса, делая диоксид хлора (ClO2) многообещающее лечение любого вирусного подвида.

    

2. Существуют научные доказательства того, что диоксид хлора эффективен против

   коронавирусы SARS-CoV-2 [4] и SARS-CoV-2, такие как работа, проведенная в Университете Керетаро в Мексике и опубликованная в ноябре 2020 года COVID-19 под названием "в естественных условиях оценка противовирусного действия ClO2(диоксид хлора) в куриных эмбрионах, зараженных птичьим коронавирусом

    

   (IBV), в котором ClO2лечение оказало заметное влияние на инфекцию IBV. А именно, титры вирусов были в 2.4 раза ниже, а смертность уменьшилась вдвое у инфицированных эмбрионов, обработанных ClO.2. Инфекция вызвала аномалии развития независимо от лечения. Повреждения, типичные для инфекций IBV, наблюдались у всех инокулированных эмбрионов, но степень тяжести, как правило, была значительно меньше в ClO.2-обработанные эмбрионы. Нет макро или микроскопических доказательств токсичности, вызванной ClO.2был обнаружен в использованных дозах.

    

3. Токсичность: самые большие проблемы, возникающие с лекарствами или веществами, которые можно рассматривать как таковые в целом, связаны с их токсичностью и побочными эффектами. Существует токсичность диоксида хлора при вдыхании через дыхательные пути, но нет сообщений о токсичности в рекомендуемой дозе 30 мг или 30 ppm в водном растворе при пероральном приеме и нет клинически доказанной смерти даже при высоких дозах при пероральном приеме. Смертельная доза (LD50, коэффициент острой токсичности) оценивается в 292 мг на килограмм в течение 14 дней, тогда как ее эквивалент для взрослого с массой тела 50 кг составляет 15,000 50 мг, вводимых в течение двух недель. Субтоксичные пероральные дозы, которые можно использовать, составляют примерно 100 ppm, растворенных в 10 мл воды 500 раз в день, что эквивалентно 2 мг. Кроме того, диоксид хлора в результате диссоциации разлагается на ион хлора, который немедленно связывается с ионом натрия, образуя обычную соль NaCl и кислород O19 в организме человека. Таким образом, диоксид хлора в рекомендуемых дозах при COVID-30 30 мг или 5 частей на миллион в день не токсичен [8-XNUMX].

 

Вирулицидные эффекты диоксида хлора

 

Диоксид хлора - эффективное противомикробное средство, убивающее бактерии, вирусы и некоторых паразитов [9]. Его бактерицидный профиль широкого спектра обусловлен действием этого соединения как нецитотоксического окислителя.

 

Вирусы обычно состоят из внешнего слоя или белковой оболочки, которая инкапсулирует нуклеиновую кислоту, которая может быть ДНК или РНК. Когда диоксид хлора вступает в контакт с вирусом, на вирусе-мишени выделяется единственный высокореактивный образующийся атом кислорода. Этот кислород связывается с определенными аминокислотами в белковой оболочке вируса, денатурируя белки и делая вирус неактивным. Кроме того, возникающие атомы кислорода связываются с гуанином, одним из четырех оснований нуклеиновых кислот, обнаруженных в РНК и ДНК, образуя 8-оксогуанин. Такое окисление остатков гуанина предотвращает репликацию вирусных нуклеиновых кислот [10].

 

В опубликованной научной литературе есть сообщения о том, что диоксид хлора инактивирует широкий спектр вирусов, включая грипп A, аденовирус человека, ротавирус человека, эховирус, бактериофаг f2 и полиовирус [11-16].

 

Вирусы гриппа A представляют собой сферические одноцепочечные РНК-вирусы с отрицательным смыслом, которые обладают липидной мембраной, содержащей пики, состоящие из гликопротеинов, известных как HA (гемагглютинин) и NA (нейраминидаза). Внутри вируса имеется восемь одиночных цепей РНК [17]. Доклиническое исследование показало, что газообразный диоксид хлора эффективен в предотвращении аэрозольной инфекции вируса гриппа А. В этом исследовании использовались низкие концентрации газообразного диоксида хлора (т.е.

0.03 ppm) в клетке для мышей. Этот уровень ниже уровня долгосрочного воздействия OSHA (8 часов) для газообразного диоксида хлора в окружающем воздухе на рабочем месте человека, который составляет 0.1 ppm [18]. Газообразный диоксид хлора эффективно снижает количество инфекционных вирусов в легких мышей и заметно снижает смертность. Смертность составила 70% (7/10) на 16 день в группе, не получавшей диоксид хлора, и 0% (0/10) в группе, получавшей диоксид хлора. Авторы подтвердили эти результаты, повторив свой эксперимент. Результаты повторного исследования составили 50% (5/10) смертности в группе, не получавшей лечения, и 0% (0/10) в группе лечения.

 

Авторы пришли к выводу, что низкие уровни газообразного диоксида хлора (например, 0.03 частей на миллион), которые ниже допустимого уровня воздействия на рабочих местах человека, «могут использоваться в присутствии людей для предотвращения их заражения вирусом гриппа A и, возможно, другими связанными вирусами. с респираторными инфекциями дыхательных путей (стр. 65). Они предположили, что «газообразный диоксид хлора можно использовать в местах

например, офисы, театры, отели, школы и здания аэропортов без эвакуации людей, без нарушения их нормальной деятельности ». Авторы предположили, что их метод« открывает новый путь для предотвращения пандемического гриппа »(стр.

65) после проведения учебы в школе с положительными результатами в этом отношении.

 

Было обнаружено снижение инфекционности вируса. в пробирке за счет применения диоксида хлора, и более высокие концентрации приводят к еще большему снижению. Это подавление инфекционности коррелировало с изменениями вирусных белков. Эти изменения являются результатом включения атомов кислорода в остатки триптофана и тирозина, расположенные в белках НА и NA [11]. Эти белки денатурируются за счет добавления атомов кислорода, что исключает способность вируса инфицировать другие клетки [19]. Более позднее исследование показало, что инактивация вируса гриппа A вызывается переносом 2 атомов кислорода от хлора к диоксиду к определенному остатку триптофана (W153) в концевом белке гемагглютинина (HA) [20].

 

Аденовирусы - это вирусы без оболочки с икосаэдрическим капсидом, содержащим геном двухцепочечной ДНК. Классифицировано семь групп аденовирусов человека [21]. Недавнее исследование показало, что диоксид хлора может помочь снизить уровень аденовируса в питьевой воде [12]. В этом исследовании изучалось влияние диоксида хлора и ультрафиолета на уровень аденовируса в питьевой воде в Нидерландах. Авторы обнаружили, что применение диоксида хлора в низких концентрациях (0.05–0.1 ppm) снижает количество аденовирусов в питьевой воде, тогда как УФ-дезинфекция недостаточна без дезинфекции диоксидом хлора.

 

Ротавирусы - это двухцепочечные РНК-вирусы, которые состоят из 11 уникальных двухцепочечных молекул РНК, окруженных трехслойным икосаэдрическим белковым капсидом [22]. Эти вирусы, которые являются основной причиной тяжелых диарейных заболеваний у младенцев и детей раннего возраста во всем мире, инактивируются диоксидом хлора. Фактически, при концентрации диоксида хлорида от 0.05 до 0.2 ppm они инактивируются в течение 20 секунд. в пробирке [23,24].

 

Бактериофаг f2 представляет собой вирус с одноцепочечной РНК с положительным смыслом, который инфицирует Кишечная палочка бактерия. An в пробирке исследование показало, что 0.6 мг / л диоксида хлора быстро (то есть в течение 30 секунд) инактивировал бактериофаг f2 и препятствовал его способности связываться с хозяином, E. палочки [пятнадцать]. Как инактивация вируса, так и подавление его способности связываться с хозяином возрастали с повышением pH и повышением концентрации диоксида хлора. Кроме того, авторы обнаружили, что диоксид хлора денатурирует белки капсида вируса, вступая в реакцию с остатками тирозина, триптофана и цистеина. Эти аминокислоты почти полностью разложились в течение 15 минут после воздействия диоксида хлора.

 

Полиовирус - это вирус с положительной цепью РНК [25]. Риденур и Ингерсон обнаружили, что диоксид хлора может инактивировать вирус полиомиелита в пробирке.

Позже Альварес и О'Брайен расширили эту работу, показав, что обработка 1 ppm диоксида хлора в пробирке приводит к отделению РНК от капсида, а также вызывает изменения в РНК [16,26].

 

В дополнение к исследованиям, упомянутым выше, Агентство по охране окружающей среды США (EPA), которое 10 апреля 2020 года включило диоксид хлора в список дезинфицирующих средств, зарегистрированных EPA для уничтожения вируса SARS-CoV-2, обеспечивает дополнительную поддержку вирулицидных эффектов хлор [27]. На веб-сайте EPA указано, что этот продукт предназначен для использования на поверхности, а не для человека.

 

Исследования на людях влияния диоксида хлора на вирус SARS-CoV-2 еще не проводились. В настоящее время два из авторов (Insignares и Bolano) проводят первое в мире многоцентровое клиническое исследование эффективности перорального диоксида хлора у людей при COVID-19 (ClinicalTrials. Gov ID: NCT04343742). An в пробирке Исследование показало, что диоксид хлора инактивирует генетически родственный вирус SARS-CoV-2 [28]. Концентрация

Было обнаружено, что 2.19 мг / л диоксида хлора вызывают полную инактивацию SARS-Co-V в сточных водах. Филиал нашей группы находится в процессе проведения в пробирке исследование действия диоксида хлора на SARS-CoV-2 в Индии, и мы в процессе публикации отчета о моделировании механизма действия диоксида хлора в SARS-Co-V-2 с использованием метода in silico, осуществляется в Японии.

 

В Эквадоре (Aememi) для диоксида хлора, эффективной терапии для лечения COVID-19; 51) Предварительное испытание было проведено с применением перорального диоксида хлора на 104 пациентах с COVID-19, которые имели различные профили с точки зрения возраста, пола и тяжести заболевания, меньшинство было диагностировано путем тестирования, а большинство - путем скрининга согласно типичным симптомы болезни. Таким образом, данные обрабатывались с использованием шкалы оценки симптомов, где 10 - максимальное восприятие, а 0 - минимальный симптом: лихорадка, озноб, мышечная боль, сухой кашель, головная боль, боль в спине, затрудненное дыхание, рвота, диарея, болезненность. горло, потеря обоняния, потеря вкуса, плохой аппетит.

 

Диоксид хлора в концентрации 3000 ppm был рекомендован в дозе 10 см20, разведенной в одном литре воды, принимаемой в течение дня, разделенной на 3 дневных доз, принимаемых каждые полтора часа в течение 4 дней. Результаты распределялись по симптомам после первого, второго, третьего и четвертого дней лечения. Они были разделены на мужчин и женщин, а также были представлены общие результаты. В следующих таблицах показаны симптомы, а на первом и последнем графике - поведение по шкале симптомов между первым и четвертым днем ​​перорального приема диоксида хлора (рисунки XNUMX и XNUMX).

 

 

 

Рисунок 1. Структурные различия между RBMs SARS-CoV-2 и SARS-CoV.

 

 

Рисунок 2. Трехмерная структура SARS-CoV-2 Mpro в двух разных представлениях.

 

 

Рисунок 3. Результаты диоксида хлора на 1-й день его приема.

 

Из этого предварительного исследования можно сделать следующие выводы: диоксид хлора определенно безвреден - совсем не токсичен - в рекомендуемых и принимаемых дозах, и все начальные симптомы начали уменьшаться с первого дня лечения, причем снижение полностью очевидно на четвертый. день. В частности, резко уменьшились симптомы, наиболее характерные для продолжающейся инфекции, такие как лихорадка, озноб, головная боль, боль в горле, потеря аппетита и потеря чувства вкуса и запаха. Другие симптомы, такие как мышечная боль и кашель, оставались довольно частыми, поскольку они, как правило, остаются остаточными дольше после того, как болезнь закончилась.

Апрель 2020 г., обнаружены следующие результаты: 1. PubMed (Medline): 4 ссылки, 2.

LILACS: 18 ссылок, 3. Кокрановская библиотека: 56 ссылок, 4. Наука: 1,168

ссылки, 5. Scielo: 61 ссылка, 6. MedScape: 19 ссылок, в общей сложности 1,326 научных публикаций, содержание которых было посвящено использованию диоксида хлора в различных приложениях и механизму действия диоксида хлора при SARS-CoV-2 вирусы. Наконец, мы просмотрели реестры на www.. Clinicaltrials.gov и Международного реестра клинических исследований ВОЗ

Платформа (ICTRP) для выявления текущих или неопубликованных клинических испытаний.

Материалы и методы

 

Для поиска справочной информации, использованной в этой статье, поисковые системы в Интернете были проверены с использованием критериев MesH в соответствии со стратегией поиска, указанной в последующих строках в периоды с января по

 

Стратегия поиска

 

«Диоксид хлора» ИЛИ «Протокол диоксида хлора» ИЛИ Диоксид хлора И вирус; Диоксид хлора И SARS-COV-2; ИЛИ «Медикаментозное лечение COVID-19» ИЛИ «Спайк-гликопротеин, вирус COVID-19» ИЛИ «тяжелый острый респираторный синдром.

Рисунок 4: Результаты диоксида хлора на 4-й день его приема.

 

коронавирус 2 "ИЛИ" COVID-19 "ИЛИ" 2019-nCoV "ИЛИ" SARS-CoV-2 "O" 2019

новый коронавирус «ИЛИ» ИЛИ «коронавирусная болезнь 2019» ИЛИ (пневмония).

 

Из результатов поиска мы выбрали те, в которых упоминалось вирулицидное действие диоксида хлора на различные микроорганизмы, в частности на вирусы, среди которых SARS-CoV-2 или SARS-CoV.

 

Мы также рассмотрели проведенные исследования действия диоксида хлора на аминокислоты, особенно те, которые входят в состав вирусных капсидов. На основании полученных данных мы подчеркиваем, что в 1986 году Noss et al. продемонстрировали, что инактивация бактериального вируса (бактериофага) f2 с помощью ClO2было связано с его реакциями с вирусным

капсидные белки. Кроме того, они обнаружили, что три аминокислоты вирусного

белок, а именно цистеин, тирозин и триптофан, может реагировать с ClO2быстро [15]. В 1987 году Тан и другие исследовали реакционную способность ClO2на 21 свободную аминокислоту [29]. ClO2реагировал только с шестью аминокислотами, растворенными в 0.1 М натрий-фосфатном буфере при pH 6.0. Реакция с цистеином, триптофаном и тирозином была слишком быстрой, чтобы следовать его методике.

 

Реакционная способность трех быстро реагирующих аминокислот (цистеина, тирозина и триптофана) изучалась в лаборатории в период с 2005 по 2008 год, и было обнаружено, что цистеин имеет самую высокую реактивность среди этих трех аминокислот [30,31].

 

В 2007 году Огата обнаружил, что антимикробная активность ClO2основан на денатурации определенных белков, что в основном связано с окислительной модификацией остатков триптофана и тирозина двух модельных белков (бычьего сывороточного альбумина и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы), используемых в их экспериментах [32]. В 2012 году Огата снова продемонстрировал, что инактивация вируса гриппа с помощью ClO2был вызван окислением остатка триптофана (W153) в гемагглютинин (белок из шипа вируса), подавляя его способность связываться с рецепторами [20].

 

В этом контексте интересно отметить, что спайковый белок нового коронавируса SARS-CoV-2 содержит 54 остатка тирозина, 12 триптофана и 40 цистеина [33].

 

Если предположить, что в водном растворе все эти аминокислотные остатки

способен реагировать с ClO2как и со свободными аминокислотами, инактивация вируса может быть чрезвычайно быстрой даже в растворе 0.1 мг / л ClO2.

 

С другой стороны, мы выбрали статьи, в которых описывается действие SARS-CoV-2 в клетках, в его взаимодействии с ACE2, и, в частности, мы исследовали видеоролики с дополненной реальностью или видеоролики моделирования на основе Silico для трехмерного представления. С сайтов действий, таких как видеоролики, в которых спикулярный белок и рецептор ACE2, среди прочего, обрабатываются с помощью программного обеспечения дополненной реальности ChimeraX (UCSF) [34-41].

 

Таким же образом мы рассмотрели структуру вирусного всплеска и основывались на исследованиях Дэниела Рэппа и Джейсона С. Маклеллана из Техасского университета.

 

Трехмерное изображение игольчатого гликопротеина S бета-коронавируса SARS-CoV-2 было замечено с помощью электронной криомикроскопии в рекордно короткие сроки. Благодаря этому изображению с разрешением 3.5 Å подтверждено, что этот белок S связан с белком hACE2 человеческих клеток с более высокой аффинностью, чем у коронавируса SARS-CoV-2. Белок S является мишенью для иммунизирующих нас антител. Его трехмерная структура позволяет понять, почему опубликованные моноклональные антитела против SARS-CoV-3 не эффективны против SARS-CoV-2. Это, несомненно, поможет ускорить разработку вакцин и методов лечения инфекции COVID-2 [19].

 

В этих видеороликах моделирования и виртуальной реальности наблюдается, что белок S представляет собой тример, состоящий из трех пептидов, каждый из которых имеет две субъединицы S1 и S2. Субблок S1 действует как шарнир с двумя конформациями, называемыми «вниз» (RBD вниз) и «вверх» (RBD вверх). Электронная криомикроскопия показывает, что только один из пептидов находится в состоянии «вверх», а два других - в состоянии «вниз». Привязка к сотовому приемнику происходит в «восходящей» конфигурации. После связывания три пептида белка S отщепляются по сайту S1 / S2; затем происходит второе расщепление в точке S2 ', разворачивая ключевой пептид слияния (FP) на стыке между мембранами.

 

Спикулярный белок (S) представляет собой трансмембранный тримерный белок I типа, содержащий от 1,160 до 1,400 аминокислот, в зависимости от типа коронавируса.

Этот белок образует коронавирусную корону; Он состоит из трех повторяющихся пептидов и сильно гликозилирован, что облегчает его связывание с белками и сахарами. Каждый пептид состоит из двух доменов, называемых S1 и S2. В бета-коронавирусах, таких как SARS-CoV-2, расщепление субъединиц S1 и S2 происходит во время слияния между мембранами.

 

Домен S1 имеет два субдомена, один N-концевой (NTD), который заканчивается аминокислотой со свободной аминогруппой (-NH2), и другой C-концевой (CTD), который заканчивается карбоксильной группой (-COOH ); оба связываются с рецептором ACE2 клетки-хозяина, тогда они являются рецептор-связывающими доменами (RBD). Домен S2 является С-концевым по типу и является высококонсервативным среди всех коронавирусов, которые намного больше различаются по субъединице S1. Домен S2 содержит две области, HR1 и HR2, в которых группы из семи аминокислот (называемых гептидами) повторяются в форме abcdefg, которые содержат гидрофобные остатки a и d, которые участвуют в слиянии между мембранами. Домены HR1 и HR2 являются терапевтическими мишенями, поскольку известны лекарства, которые ингибируют их действие, предотвращая или препятствуя слиянию.

 

Инфекция эпителиальных клеток дыхательных путей контролируется S-белком вируса. На общих этапах процесса слияния сначала домен S1 распознает и связывается с рецептором клетки-хозяина. Во-вторых, есть первое разделение в доменах S1 и S2 и второе разделение в точке S2 '; последний позволяет активировать гибридный пептид (FP), который соединяет мембраны хозяина и вируса (эта стадия называется промежуточной стадией слияния или промежуточной стадией слияния). И, в-третьих, область между HR1 и HR2 ремоделируется (складывается), давая начало гептамеру (6-HB), который присоединяется к обеим мембранам, обеспечивая проникновение вируса.

 

Белок S коронавирусов играет ключевую роль в разработке вакцин (антигены, которые вызывают иммунный ответ на присутствие домена S1) и для разработки противовирусных препаратов (ингибиторы некоторых стадий слияния между мембранами, обычно атакующие определенные области домен S2). Знание трехмерной структуры протеина S необходимо для борьбы с эпидемией COVID-19.

 

Последовательность белка S SARS-CoV-2 на 98% совпадает с белком S коронавируса Bat-RaTG13, с той большой разницей, что он содержит четыре аминокислоты RRAR (аргинин-аргинин-аланин-аргинин) вместо одной. аргинин (R). Кроме того, они различаются 29 остатками, 17 из которых находятся в области RBD. Сравнение, проведенное между 61 полным геномом SARS-CoV-2, доступным в GISAID (Глобальная инициатива по обмену всеми данными о гриппе), показывает, что между всеми ними имеется только 9 различных аминокислот; и все эти варианты находятся в очень хорошо сохранившихся местах, что, похоже, не влияет на летальность коронавируса.

 

Во-первых, удалось охарактеризовать трехмерную структуру спикулярного гликопротеина S коронавируса SARS-CoV-3 и его связывающего домена рецептора RBD. Затем рецептор клетки-хозяина, человеческий ангиотензин-превращающий фермент hACE2. Следующим шагом для исследователей было определение структуры комплекса SARS-CoV-2 RBD / hACE2, которая была получена с помощью рентгеновской кристаллографии с разрешением 2 и 2.45 Å. Среди результатов было установлено, что очень тонкие структурные изменения объясняют более высокую инфекционность и патогенез SARS-CoV-2.68 (COVID-2) по сравнению с SARS-CoV-19 (SARS).

 

Эти результаты имеют большое значение для разработки лекарств для борьбы с COVID-19. В силиконе реконструкции были выполнены (с использованием теоретических моделей с использованием компьютеров), но наблюдение реальной кристаллографической структуры с помощью дифракции рентгеновских лучей имеет важное значение. Как было отмечено вначале, авторы находятся в процессе публикации японского in silico они провели исследование механизма действия диоксида хлора на спайк SARS-CoV-2 и гемоглобин.

 

Первая проблема, которая возникает в процессе исследования, заключается в том, как сформировать комплекс SARS-CoV-2 RBD / hACE2 с достаточной стабильностью для его наблюдения; Предыдущий опыт образования комплекса SARS-CoV-2RBD / hACE2 (подтвержденный в 2005 г.) был ключевым, в котором солевой мостик между Arg426 RBD и Glu329 hACE2 используется для усиления связывания комплекса. Очень важным наблюдением является то, что цистеин в положениях Cys336-Cys361, Cys379-Cys432 и Cys391-Cys525 стабилизирует пять бета-листов (β1, β2,

β3, β4 и β7), а Cys480-Cys488 является ключевым в соединении между гребнем SARS-CoV-2 RBM и N-концевой спиралью hACE2 [43-45].

 

При моделировании действия диоксида на эти аминокислоты (Cys) легко понять невероятное прямое вирулицидное действие диоксида на вирусы и, в частности, на SARS-CoV-2. Обнаруженное изображение демонстрирует разрушительное действие диоксида хлора на вирус, разлагая и денатурируя его. Сравнение комплексов SARS-CoV-2RBD / hACE2 и SARS-CoV-2 RBD / hACE2 позволяет понять, почему COVID-19 более заразен, чем SARS-CoV.

 

SARS-CoV-2 RBM образует более крупный и высококонтактный стыковой интерфейс с hACE2, чем SARS-CoV-2RBM; солевой мостик между SARS-CoV-2RBD и hACE2 слабее, чем между SARS-CoV-2 RBD и hACE2. Кристаллическая структура комплекса также содержит глюканы, связанные с четырьмя сайтами hACE2 и сайтом RBD. Глюкан, связанный с Asn90 из hACE2, образует водородную связь с Arg408 в ядре RBD; это взаимодействие сохраняется между SARS-CoV-2 и SARS-CoV.

 

Структурные различия между RBMs SARS-CoV-2 и SARSCoV незначительны, но влияют на конформации петель в гребнях связывания рецепторов. В обоих RBM одна из гребневых связей содержит дисульфидную связь, которая имеет решающее значение для связывания. SARS-CoV-2 и bat-CoV Rs3367 содержат мотив с тремя остатками Pro-Pro-Ala в указанной петле; но в SARS-CoV-2 и bat-CoV RaTG13 демонстрирует мотив из четырех остатков Gly-Val / Gln-Glu / Thr-Gly; Следовательно, конформация петли изменяется, потому что глицины более гибкие. Это изменение способствует связыванию RBD / hACE2. Кроме того, гребень имеет более компактную форму благодаря водородным связям Asn487 и Ala475 в SARS-CoV-2 RBM, что приближает петлю, содержащую Ala475, к hACE2.

 

Контакт гребня SARS-CoV-2 RBM с N-концевой спиралью hACE2 больше, чем у SARS-CoV-2RBM. Например, N-концевой остаток Ser19 hACE2 образует новую водородную связь с основной цепью Ala475 RBM SARS-CoV-2, а Gln24 N-концевой спирали hACE2 также образует новый контакт с SARS-CoV. -2 УКР. По сравнению с Leu472 из SARS-CoV-2RBM, Phe486 из SARS-CoV-2 RBM указывает в другом направлении и образует гидрофобную область с участием Met82, Leu79 и Tyr83 из hACE2 (рис. 1).

 

Сравнение с SARS-CoV-2RBM показывает, что эти небольшие структурные изменения RBM SARS-CoV-2 более благоприятны для связывания hACE2. Это тонкие различия, но очень важные с функциональной точки зрения. Были обнаружены два критических сайта связывания (горячие точки связывания вируса), критическая точка горячей точки-31 на солевом мостике Lys31 и Glu35 и горячая точка 353 на другом солевом мостике между Lys353 и Asp38. Эти два солевых мостика являются слабыми из-за большого расстояния во взаимодействии, но, будучи заключенными в гидрофобную среду, которая снижает эффективную диэлектрическую проницаемость, их энергия связи выше (Рисунок 2).

 

Чтобы подтвердить эти структурные данные, были проведены биохимические исследования аффинности связывания RBD / hACE2 после введения определенных мутаций в SARS-CoV-2 RBD. Эти мутации предполагают, что коронавирус летучих мышей RaTG13 может инфицировать людей (что подтверждает зоонозное происхождение эпидемии). Более того, RBMs SARS-CoV-2 и bat-COV RaTG13 содержат аналогичный мотив из четырех остатков в ACE2-связывающем гребне, подтверждая, что один произошел от другого. Кроме того, для усиления распознавания hACE2 SARS-CoV-2 демонстрирует два изменения в остатках L486F и Y493Q RaTG13, которые, по-видимому, способствовали передаче SARS-CoV-2 от летучих мышей к человеку. Следовательно, в COVID-19 может не быть промежуточного хозяина между летучей мышью и человеком, в отличие от того, что произошло с SARS и MERS. конечно, пока невозможно исключить наличие посредника, которым вполне может быть ящер или другое дикое животное, продаваемое на рынке Ухани; В случае с панголином необходимо секвенировать большее количество геномов коронавируса панголина, чтобы прояснить вопрос, но до сих пор между ними было доказано более чем 99% геномное сходство [46].

 

Результаты и обсуждение

 

Спайк SAR-CoV-2 сильно гликозилирован, и гликозилирование

считается, что он играет важную роль в обнаружении вируса против нашей собственной иммунной системы. Часть альфа-спиралей проходит по длине белка-шипа. По большей части бета-листы концентрируются на этом конце, где белок спайков сливается с клеткой, чтобы инфицировать ее. Интересно то, что спирали состоят из аминокислот, чувствительных к действию диоксида хлора (на уровне цистеина).

 

Белок-шип на самом деле состоит из трех переплетенных цепей с идентичными аминокислотными последовательностями; каждая из этих цепей называется протомером. Однако протомеры не имеют одинаковых трехмерных конформаций.

 

Мы можем увидеть разницу в конформации протомеров, исследуя участок шипового белка, который имеет решающее значение для жизненного цикла вируса, рецептор-связывающий домен или RBD. RBD - это место, где вирус связывается с ферментом на поверхности клеток-хозяев, позволяя ему сливаться с клеткой и транспортировать вирусный генетический материал внутри. Два из этих RBD находятся в более низкой конформации в структуре. Однако один из этих RBD перевернулся. Эта «восходящая» конформация представляет собой более высокую энергию, готовую связываться с клеточным рецептором и вести к слиянию. Считается, что при связывании белка шипа каждый из этих RBD изменяется на эту менее стабильную конформацию.

 

Наши собственные ферменты, те, которые разрывают пептидные связи, называемые протеазами, могут разрезать белок-спайк в определенных местах, и происходят конформационные изменения в слиянии белков-спайков. RBD связан с ACE2, рецептором на поверхности нашей клетки, с которым коронавирус связывается, вызывая слияние. Эти структуры также сильно гликозилированы. Если мы спрячем сахара, чтобы создать модель для понимания взаимодействия RBD-ACE2, и поместим туда диоксид хлора, действующий на аминокислоты, мы сможем сосредоточиться на некоторых слабых взаимодействиях, которые удерживают вместе RBD и ACE2.

 

Например, у нас есть обширная сеть водородных связей на границе раздела RBD-ACE2, которая вторгается в два остатка тирозина (Tyr-489 и Tyr-83). Эта боковая цепь тирозина также связана с карбонильным водородом боковой цепи аспарагина (Asn-487), который, в свою очередь, связывается через свой атом водорода NH с карбонилом глутамина в ACE2 (gln-24). Мы предполагаем, что диоксид хлора окисляет эти остатки Tyr-489 и Tyr-83, среди прочих, с которыми поверхность раздела RBD-ACE2 денатурируется, и вирус больше не может связываться или уже окислен. Кроме того, диоксид хлора также окисляет пролин, присутствующий в ACE2, что завершает окисление и деформацию ACE2.

 

Двигаясь вдоль альфа-спирали ACE2, мы имеем глутаматную боковую цепь, которая депротонируется при pH 7.4, и остаток лизина, несущий положительный заряд при этом pH.

 

Если вирус сливается, вирусный генетический материал попадает в клетку. В случае коронавирусов этот фрагмент РНК перемещается к рибосомам нашей клетки и удерживает их в заложниках для создания собственных вирусных белков. Интересно то, что эта вирусная РНК способна изменять трехбуквенный каркас оснований РНК, который считывается рибосомой; это по существу дублирует пептидную последовательность, которая может быть получена из вирусной реплики с использованием наших рибосом; белки, необходимые вирусу для сборки дополнительных копий самого себя, которые в конечном итоге будут выпущены из клетки и заразят другие. В этом процессе передается важный белок, и это основная протеаза, которая разрезает цепь вирусных полипептидов в функциональных белках, необходимых для сборки новых вирусов. Это еще одна терапевтическая цель, если человек уже инфицирован вирусом; лекарство, которое присоединяется к протеазе, можно вводить, избегая развития зрелых вирусных белков, останавливая, таким образом, репликацию вируса.

 

Эта основная протеаза SAR-CoV-2 представляет собой димер, состоящий из двух идентичных белковых цепей, и должна димеризоваться, чтобы стать функциональной протеазой. На границе раздела димеров происходит множество аминокислотных взаимодействий, но исследователи, опубликовавшие эту кристаллическую структуру, предполагают, что ионные взаимодействия между боковой цепью этого остатка аргинина и этим глутаматом приводят к димеризации. Это взаимодействие присутствует с обеих сторон димера. Двигаясь к активному центру, важные остатки состоят из цепи цистеина (Cys-145) и гистидина (His-41).

 

Этот фермент представляет собой цистеиновую протеазу, поэтому он использует нуклеофильный цистеин для атаки амидной связи пептида. В этом механизме азот гистидина захватывает протон боковой цепи цистеина, позволяя ему атаковать пептидную связь.

Пептидная связь разрывается, и затем может войти молекула воды, высвобождая цистеин, так что протеаза может разорвать другую полипептидную цепь. Ферменты, содержащие нуклеофильные каталитические остатки, являются отличными мишенями для необратимого ингибирования. Поскольку они содержат боковую цепь нуклеофильной аминокислоты - в данном случае цистеин, - можно разработать ингибиторы, которые связываются с ферментом постоянной ковалентной связью. Здесь также действует диоксид хлора, окисляя цистеин, поэтому этот механизм блокируется им. В отличие от обратимых ингибиторов, которые могут перемещаться в активный центр и выходить из него, эти необратимые ингибиторы, также называемые ингибиторами самоубийства, навсегда инактивируют белок, не позволяя ему выполнять свою работу и создавать больше вирусных белков. Эти исследователи ранее разработали ингибиторы других протеаз коронавируса. Они смогли связать один из этих ингибиторов с активным сайтом протеазы SARS-CoV-2. Серин явно участвует в ковалентной связи с кетоном-ингибитором. Теперь это обратимая реакция, так что она не является самоубийственным ингибитором, так как цистеин ковалентно связан в этом активном центре. Здесь карбонил ингибитора образует водородную связь с тремя группами NH на белке. Каталитический гистидин протеазы также участвует в образовании водородных связей. Это кольцо участвует в разветвленной сети водородных связей, которая включает как атомы основной цепи структуры, так и боковые цепи. Знание контактов, которые ингибитор устанавливает с ферментом, позволяет химикам и биологам рассматривать взаимодействия и потенциально создавать еще более эффективные ингибиторы. Помимо ферментативного ингибирования, которое было бы эффективной стратегией борьбы с вирусом, появление диоксида хлора как вещества, которое не ингибирует, а «растворяет» за счет окисления ключевые структуры вируса, позволяет действовать почти «хирургическим» молекулярным прецизионность, поэтому он гораздо более эффективен в качестве механизма контроля вирусной инфекции [47].

 

Заключение

 

В заключение, зная расположение областей, где расположены аминокислоты, чувствительные к окислению диоксидом хлора, подчеркнув, что спайковый белок коронавируса SARS-CoV-2 содержит 54 тирозина, 12 триптофана, 40 остатков цистеина, помимо пролин, который, в свою очередь, присутствует в структуре ACE2 в связи с RBD, позволяет проецировать действие диоксида хлора на вирусный спайк. Лучший педагогический пример: шип - это ключ, а ACE2 - замок. Деформация ключа из-за окисления диоксида хлора в аминокислотах цистеина, тирозина, триптофана и пролина, спиральных цепей и окисления замка (ACE2) предотвращает не только соединение, но и растворяет существующее соединение между спайк (RBD) и ACE, очень быстро.

 

Признание

 

Мы хотим выразить нашу благодарность за ваше сотрудничество и вклад доктору Митчеллу Б. Листеру из Медицинской школы Университета Колорадо, филиал Колорадо-Спрингс, памятник, CO 80132.

 

Финансирование

 

Работа поддержана собственными ресурсами исследователей.

 

Конфликт интересов

 

Калькера, Андреас заявляет о возможном финансовом интересе, поскольку он является изобретателем швейцарского патента / 11136-CH. У двух других авторов нет конкурирующих экономических интересов. Это не влияет на соблюдение авторами всех правил обмена данными и материалами.

 

 

Рекомендации

 

1. Го, Ян-Жун, Цин-Донг Цао, Чжун-Си Хонг и Юань-Ян Тан и др. «Происхождение, передача и клинические методы лечения вспышки коронавирусного заболевания 2019 г. (COVID-19) - обновленная информация о статусе». Mil Med Res 7 (2020): 1-10.

2. Оярсун, Гомес Мануэль. «Трансляционная медицина: серебряный мост между фундаментальными науками и клинической медициной». Преподобный Чил Я дышал 33 (2017): 81-84.

3.https://www.lenntech.es/procesos/desinfeccion/quimica/desinfectantes- хлор-diocope.html

1. Ison A, Odeh IN и Margerum DW (2006) Кинетика и механизмы окисления диоксида хлора и цистеина, хлорита и глутатиона. Инорг Хим 45: 8768-8775.

2. Стюарт Д. Д., Наполитано М. Дж., Бахмутова-Альберт Е. В. и Маргерум Д. В. (2008) Кинетика и механизмы окисления триптофана диоксидом хлора. Инорг Хим 47: 1639-1647.

3. Наполитано, Майкл Дж., Брэндон Дж. Грин, Джеффри С. Никосон и Дейл В. Маргерум. «Окисление тирозина, N-ацетилтирозина и допа диоксидом хлора». Химический токсикологический препарат 18 (2005): 501-508.

4. Тан, Хсиу-Кун, Уиллис Б. Уиллер и Ченг-И Вэй. «Реакция диоксида хлора с аминокислотами и пептидами: исследования кинетики и мутагенности». Мутация Res 188 (1987): 259-266.

5. Логинова И.В., Рубцова С.А., Кучин А.В. «Окисление диоксидом хлора производных метионина и цистеина до сульфоксидов». Chem Nat Compd 44 (2008): 752-754.

6. Грей, Николас Ф. «Свободный и комбинированный хлор». В: Микробиология болезней, передающихся через воду, (2ndEdn) Academic Press, Лондон.

7. Янг, RO. "Диоксид хлора (ClO2) В качестве нетоксичного противомикробного агента для вирусов, бактерий и дрожжей (Candida Albicans) ». Int J Vaccines Vaccin (вакцины Int J) 2 (2016): 00052.

8. Огата, Норио и Такаши Сибата. «Защитный эффект низкоконцентрированного диоксида хлора против гриппа и вирусной инфекции». J Gen Virol 89 (2008): 60-67.

9. Шейвен, Джек, Питер Теунис, Труди Суйлен и Хенк Кетелаарс и др. «QMRA аденовируса в питьевой воде на водоочистных сооружениях с использованием УФ-дезинфекции и дезинфекции диоксидом хлора». Вода Res 158 (2019): 34-45.

10. Хараке, М. и М. Батлер. «Инактивация ротавируса человека, SA11 и других кишечных вирусов в сточных водах дезинфицирующими средствами». Эпидемиол Инфекция 93 (1984): 157-163.

11. Чжун, Цинся, Анна Карратала, Рэйчел Оссола и Вирджини Бахманн и др. «Перекрестная устойчивость устойчивых к УФ-излучению или диоксиду хлора эховирусов 11 к другим дезинфицирующим средствам». Границы микробиол 8 (2017): 1928.

12. Носс, Карл I, Фред С. Хаухман и Винсент П Оливьери. «Реакционная способность диоксида хлора с белками». Вода Res 20 (1986): 351-356.

13. Альварес, Мария Э. и Р. Т. О'Брайен «Механизмы инактивации полиовируса диоксидом хлора и йодом». Апл Рейн Микробиол 44 (1982): 1064-1071.

14. https://Microbeonline.Com/Influenza-Flu-Virus-Structure-Classification/

     

15. https://Www.Osha.Gov/Dts/Sltc/Methods/Inorganic/Id202/Id202bkr.Html

     

16. Огата, Норио. «Денатурация белка диоксидом хлора: окислительная модификация остатков триптофана и тирозина». Биохим 46 (2007): 4898-4911.

17. Огата, Норио. "Инактивация гемагглютинина вируса гриппа диоксидом хлора: окисление консервативного остатка триптофана 153 в сайте связывания рецептора". Дж. Ген Вирол 93 (2012): 2558-2563.

18. Немеров, Глен Р., Фиби Л. Стюарт и Виджей С. Редди. «Структура аденовируса человека». Курр Опин Вирол 2 (2012): 115-121.

19. Песавенто, Дж. Б., С. Е. Кроуфорд, М. К. Эстес и Б. В. Венкатарам Прасад. «Ротавирусные белки: структура и сборка». В Реовирусы: Вход, сборка и морфогенез, Springer, Берлин, Гейдельберг, 2006.

20. Деннехи, Пенелопа Х. "Ротавирусная инфекция: болезнь прошлого?" Инфекция Dis Clin

    29 (2015): 617-635.

     

21. Чен, Ю-Шиоу и ДЖЕЙМС М. Вон «Инактивация ротавирусов человека и обезьян диоксидом хлора». Appl Environ Microbiol 56 (1990): 1363-1366.

22. Хогл, Джеймс М. «Вхождение в клетку полиовируса: общие структурные темы в путях проникновения вирусных клеток». Анну Рев Микробиол 56 (2002): 677-702.

23. Риденур, GM и RS Ingols. «Инактивация вируса полиомиелита« свободным »хлором». Am J Public Health Здоровье наций 36 (1946): 639-644.

24. https://www.epa.gov/pesticide-registration/list-n-disinfectants-use-against- SARS-коронавирус-2

25. Ван, Синь-Вэй, Цзинь-Сун Ли, Мин Джин и Бей Чжэнь и др. «Исследование устойчивости к коронавирусу, связанному с тяжелым острым респираторным синдромом». J Virol Методы 126 (2005): 171-177.

26. Тан, Хсиу-Кун, Уиллис Б. Уиллер и Ченг-И Вэй. «Реакция диоксида хлора с аминокислотами и пептидами: исследования кинетики и мутагенности». Mutat Res 188 (1987): 259-266.

     

27. Исон, Ана, Ихаб Н. Одех и Дейл В. Маргерум «Кинетика и механизмы окисления цистеина и глутатиона диоксидом хлора и хлоритом». Инорг Хим 45 (2006): 8768-8775.

     

28. Наполитано, Майкл Дж., Брэндон Дж. Грин, Джеффри С. Никосон и Дейл В. Маргерум. «Окисление тирозина, N-ацетилтирозина и допа диоксидом хлора». Химический токсикологический препарат 18 (2005): 501-508.

     

29. Стюарт, Дэвид Дж., Майкл Дж. Наполитано, Екатерина В. Бахмутова-Альберт и Дейл В. Маргерум. «Кинетика и механизмы окисления триптофана диоксидом хлора». Инорг Хим 47 (2008): 1639-1647.

     

30. Tao, Y, K Queen, CR Paden And J Zhang и др. Изолят коронавируса 2 тяжелого острого респираторного синдрома 2019-Ncov. USA-IL1 / 2020, Полный геном. NCBI Genbank, 2020.

     

31. Сун, Вэньфэй, Мяо Гуй, Синьцюань Ван и Е Сян. «Крио-ЭМ структура гликопротеина шипа коронавируса SARS в комплексе с рецептором ACE2 клетки-хозяина». Plos Патогены 14 (2018): E1007236.

     

32. Хаймс, Хавьер А., Николь М. Андре, Жан К. Милле и Гэри Р. Уиттакер. «Структурное моделирование протеина шипа нового коронавируса 2019 года (Ncov) выявляет протеолитически чувствительную петлю активации как отличительную особенность по сравнению с SARS-CoV-2 и родственными SARS -Как коронавирусы ». Архив 2002.06196 (2020): 2-4.

     

33. Грифони, Альба, Джон Сидни, Юн Чжан и Ричард Шойерманн и др. «Цели-кандидаты для иммунного ответа на новый коронавирус 2019 года (Ncov): гомология последовательности и прогнозы на основе биоинформатики». Cell-Host-Microbe-D-20-00119 (2020).

     

34. Се, Лянчжи, Чуньюн Сун, Чунся Луо и Янцзин Чжан и др. «Сравнение структуры SARS-CoV-2 и SARS-CoV-2, Spike-RBD и связывания рецепторов и потенциальное влияние на разработку нейтрализующих антител и вакцины». Биорксив (2020).

     

35. Янь, Жэньхун, Юаньюань Чжан, Иньин Го и Лу Ся и др. «Структурные основы признания 2019-Ncov человеческим ACE2». Биорксив (2020).

     

36. Лан, Джун, Дживан Ге, Джинфанг Ю и Сиси Шан и др. «Структура домена связывания шипа SARS-CoV-2 с рецептором, связанного с рецептором ACE2». природа 581 (2020): 215-220.

     

37. Чжан, Линлинь, Дайзун Линь, Синьюаньюань Сунь и Катарина Рокс и др. «Рентгеновская структура основной протеазы нового коронавируса SARS-CoV-2 позволяет разработать Α-Ингибиторы кетоамида ». Биорксив (2020).

38. Уоллс, Александра C, Юнг-Джун Парк, М. Алехандра Торторичи и Эбигейл Уолл и др. «Структура, функция и антигенность гликопротеина шипа SARS-CoV-2». Ячейка (2020).

     

39. Wrapp, Daniel, Nianshuang Wang, Kizzmekia S. Corbett и Jory A. Goldsmith, и др. «Крио-ЭМ-структура спайка 2019-Ncov в префузионной конформации». Наука 367 (2020): 1260-1263.

     

40. Шан, Цзянь, Ган Е, Ке Ши и Юшун Ван и др. «Структурные основы распознавания рецепторов SARS-CoV-2». природа 581 (2020): 221-224.

     

41. Сяоли, Сюн, Кун Цюй и Джон А.Г. Бриггс "Закрытый и термостабильный тример белка SARS-CoV-2", природа Структурная мол. биол. Биорксив (2020).

     

42. Лам, Томми Цан-Юк, На Цзя, Я-Вей Чжан, Маркус Хо-Хин Шум и др. «Идентификация коронавирусов, связанных с SARS-CoV-2, у малайских панголинов». природа (2020): 1-4.

     

43. Zambrano-Estrada, Xochitl, Carlos A Dominguez-Sanchez, Marina Banuet-Martinez и Fabiola Guerrero-De La Rosa, и др. «Оценка противовирусного эффекта диоксида хлора (ClO2) Использование модели позвоночного, инокулированной птицами

    Коронавирус. " Биорксив (2020).

     

44. Гарсия, Р. Предварительные результаты Использование перорального диоксида хлора у пациентов с COVID-19. Прямой отчет, 2020.

 

Как процитировать эту статью: Знаки отличия - Каррионе Э., Болано Гомес Б. и Калькер Андреас. «Диоксид хлора в COVID-19: гипотеза о возможном механизме молекулярного действия в SARS-CoV-2». Журнал J Mol Genet Med 14 (2020): 468